Summary
एक उच्च मंच प्रतिबंध के बिना चूहों को ठीक कर सकता है और एक्यूपंक्चर हेरफेर के दौरान पीठ पर एक्यूपॉइंट को पूरी तरह से बेनकाब कर सकता है। यह लेख उच्च मंच के निर्माण के लिए तरीकों का वर्णन करता है, अस्थमा का चूहा मॉडल स्थापित करता है और एक गैर-विकासशील और वास्तविक समय पूरे शरीर की प्लेथिस्मोग्राफी (डब्ल्यूबीपी) प्रणाली का उपयोग करके श्वसन कार्य में परिवर्तन के उपाय करता है।
Abstract
एक उच्च मंच प्रतिबंध के बिना चूहों को ठीक कर सकता है और एक्यूपंक्चर हेरफेर के दौरान पीठ पर एक्यूपॉइंट को पूरी तरह से बेनकाब कर सकता है। यह लेख उच्च मंच के निर्माण के लिए तरीकों का वर्णन करता है, अस्थमा का चूहा मॉडल स्थापित करता है और एक गैर-विकासशील और वास्तविक समय पूरे शरीर की प्लेथिस्मोग्राफी (डब्ल्यूबीपी) प्रणाली का उपयोग करके श्वसन कार्य में परिवर्तन के उपाय करता है।
Introduction
अस्थमा एक पुरानी बीमारी है जो ब्रोंकोस्कोक्ट्रिक्शन और एयरवे हाइपर-रिस्पॉन्सिवनेस1की विशेषता है। दुनिया भर में लगभग 339.4 मिलियन लोगों कोअस्थमा 2का पता चला है। अस्थमा की व्यापकता विश्व स्तर पर बढ़ रही है, अगलेदशक में १००,०००,० नए मामलों की उम्मीद है । सांस कोर्टिकोस्टेरॉयड और 2 -agonists βलंबेसमय से अभिनय प्रभावी ढंग से सभी रोगियों के लक्षणों को नियंत्रित नहीं करते4. इसलिए, अस्थमा के इलाज के लिए एक्यूपंक्चर जैसे वैकल्पिक उपचारों का उपयोग बढ़ा हुआ ध्यान प्राप्त कर रहा है5. अस्थमा के इलाज के लिए एक प्रभावी तरीका सुई GV14 (Dazhui), द्विपक्षीय BL12 (फेंगमेन) और द्विपक्षीय BL13 (Feishu)6है । एक्यूपंक्चर लार में स्रावात्मक इम्यूनोग्लोबुलिन ए (सिगा) के स्तर को काफी कम कर देता है और एलर्जी अस्थमा के रोगियों के नाक स्राव और परिधीय रक्त eosinophil गिनती ८५%6की कुल प्रभावी दर के साथ कम कर देता है । क्रोनिक अस्थमा के साथ चूहों में BL13 और ST36 (Zusanli) में एक्यूपंक्चर आईएल-17 के स्तर को 40% तक कम कर देता है और अंडाकार (ओवीए) समूह की तुलना में चिकनी मांसपेशियों की मोटाई 33% तक कम हो जाती है, और इस प्रकार सूजन के लक्षणों से राहत7,8। हालांकि, अस्थमा के लिए एक्यूपंक्चर उपचार का तंत्र पूरी तरह से स्पष्ट नहीं है।
पशु मॉडल अस्थमा अनुसंधान के लिए एक महत्वपूर्ण उपकरण हैं9 क्योंकि पशु मॉडल अस्थमा उपचार की प्रभावशीलता का आकलन करने के लिए श्वसन समारोह के निरंतर माप के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है10. इस बीच, अस्थमा के रोगविज्ञान के अध्ययनों के लिए परीक्षण नमूनों की आवश्यकता होती है, जिसमें श्वासनली, फेफड़े और ब्रोनकोल्वेलर लावेज के नमूने शामिल हैं ताकि प्रमुख कारकों के स्तर में परिवर्तन को सत्यापित किया जा सके11। अस्थमा के चूहे मॉडल आमतौर पर अस्थमा रोग विज्ञान का आकलन करने के लिए उपयोग किया जाता है क्योंकि वे लंबे समय तक चलने वाले वायुमार्ग प्रतिक्रियाओं का उत्पादन करते हैं और तत्काल और देर से चरण वायुमार्ग प्रतिक्रियाएं12दिखाते हैं। हालांकि, बार-बार प्रयोगात्मक उत्तेजना के कारण, चूहे अक्सर चिड़चिड़ा हो जाते हैं। इसलिए, चूहों को ठीक करने के लिए एक उपयुक्त विधि की आवश्यकता है। चूहे के निर्धारण के लिए आमतौर पर उपयोग किए जाने वाले तरीकों में संज्ञाहरण और बाध्यकारी13शामिल हैं । यद्यपि संज्ञाहरण विधि एक्यूपॉइंट का बेहतर एक्सपोजर प्रदान करती है, यह तंत्रिका चालन को प्रभावित कर सकती है और अंततः प्रायोगिक परिणामों को प्रभावित करती है14। बाध्यकारी विधि संज्ञाहरण के समान शारीरिक प्रभावों को प्रेरित नहीं करती है, लेकिन संयमित चूहों को कंकाल मांसपेशियों के तनाव का अनुभव होगा। इसके अलावा, सुई आसानी से निर्धारित स्थिति15तक नहीं पहुंच सकता है । यहां, हम एक उच्च मंच पेश करते हैं जिसका उपयोग चूहों को प्रतिबंधित किए बिना ठीक करने और पीठ पर एक्यूपॉइंट को पूरी तरह से बेनकाब करने के लिए किया जा सकता है। एक्यूपंक्चर के प्रशासन के दौरान चूहों को उच्च मंच पर रखा जा सकता है। उच्च मंच चूहे को केवल खड़ा होने के दौरान समायोजित करने में सक्षम है, और जैसा कि इसे जमीन से एक निश्चित दूरी पर रखा जाता है, चूहे16ऊंचाइयों के डर के कारण आगे नहीं बढ़ेंगे।
इस लेख में उच्च मंच के निर्माण, अस्थमा के चूहे के मॉडल की स्थापना, उच्च मंच पर चूहे की जरूरत का संचालन और पूरे शरीर की प्लेथिस्मोग्राफी (डब्ल्यूबीपी) प्रणाली का उपयोग करके श्वसन कार्य की माप का विस्तार से वर्णन किया गया है।
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Protocol
सभी पशु प्रयोगों की समीक्षा की और पारंपरिक चीनी चिकित्सा के शंघाई विश्वविद्यालय के पशु प्रयोगों की नैतिकता पर समिति द्वारा अनुमोदित किया गया (नैतिक निकासी संख्या PZSHUTCM190308020) ।
1. उच्च मंच का निर्माण
- सहायक डिवाइस की लंबाई और चौड़ाई 86 सेमी x 17 सेमी(चित्रा 1)तक सेट करें।
- कनेक्टिंग डिवाइस को सहायक डिवाइस से लंबवत ठीक करें। कनेक्टिंग डिवाइस चूहे को उच्च मंच की शीर्ष सतह पर चलने से रोकने के लिए लगभग 30 सेमी लंबा होना चाहिए और इसकी चौड़ाई 14 सेमी है।
- कनेक्टिंग डिवाइस के लिए क्षैतिज पेडल (5 सेमी x 5 सेमी) को ठीक करें। क्षैतिज पेडल के तल पर निलंबित ऊंचाई 50 सेमी से अधिक या बराबर होनी चाहिए।
नोट: प्रयोगात्मक चूहों की संख्या के आधार पर, प्रत्येक पेडल पर रखे एक चूहे के साथ कई क्षैतिज पैडल का उपयोग किया जा सकता है।
2. अस्थमा के चूहे के मॉडल की स्थापना
- ओवी के साथ चूहों को संवेदनशील
- 0 दिन पर संवेदीकरण समाधान तैयार करें। 1 मिलीग्राम ओवी और 10 मिलीग्राम एल्यूमीनियम हाइड्रोक्साइड के साथ संवेदीकरण समाधान के प्रत्येक 1 एमएल को सॉल्वेंट के रूप में सामान्य नमकीन के साथ तैयार करें।
- इंट्रापेरिटोनेली रूप से प्रत्येक चूहे को 0 दिन में संवेदीकरण समाधान के 1 एमएल के साथ इंजेक्ट करें। बाद में उपयोग के लिए एक उपयुक्त सिरिंज के साथ संवेदनशील समाधान ड्रा।
- पूंछ को पकड़ो और चूहे को उठाएं, इसे किसी न किसी सतह पर रखें, और धीरे-धीरे पूंछ को वापस खींचें। शेष तीन उंगलियों और हथेलियों के साथ पीठ की त्वचा को कसकर पकड़े हुए बाएं अंगूठे और तर्जनी के साथ कान और गर्दन दोनों की त्वचा को पकड़ें (अतिरिक्त बल लगाने से परहेज करने के लिए सावधान रहें जो चूहे का दम घुट जाएगा)।
- दाहिने हाथ से, संवेदीकरण समाधान के 1 एमएल के साथ तैयार सिरिंज के साथ चूहे में इंट्रापेरिटोनियल इंजेक्शन करें।
- ओए के साथ चूहों को चुनौती देना
- ढक्कन के साथ एक बॉक्स का चयन करें (लंबाई, चौड़ाई और ऊंचाई 39 सेमी x 28 सेमी x 23 सेमी हैं), और साइड में एक छोटा छेद ड्रिल करें। सीलबंद बॉक्स, नेबुलाइजिंग कप और संपीड़न नेबुलाइजर को रबर ट्यूब(सप्लीमेंट्री फिगर 1)से कनेक्ट करें।
नोट: संकुचित नेबुलाइजर का नेबुलाइज्ड कण आकार 1 - 5 माइक्रोन है, नेबुलाइजेशन दर 0.2 मिलील/मिनट से अधिक है, और अंतिम दबाव 205 केपीए है। - संवेदीकरण के बाद 14वें दिन, घर के बने सीलबंद बॉक्स के ढक्कन को खोलें और चूहे को बॉक्स में रखें (बॉक्स 5 चूहों को समायोजित कर सकता है), और फिर सील किए गए बॉक्स को बायोसेफेटी कैबिनेट में डाल दें।
- चुनौती समाधान तैयार करें। सामान्य खारा के 30 मिलीग्राम के साथ 300 मिलीग्राम ओवी को अच्छी तरह से मिलाएं।
- अल्ट्रासोनिक नेबुलाइजर चालू करें और नेबुलाइजिंग कप में चुनौती समाधान के 30 एमएल जोड़ें। चुनौती समाधान की खुराक और घर का बना सील बॉक्स की मात्रा के अनुसार चूहों की संख्या को समायोजित करें।
- नेबुलाइजेशन को कई बार दोहराएं (दिन में एक बार) या अस्थमा के लक्षणों की गंभीरता के अनुसार प्रक्रिया को समायोजित करें।
- ढक्कन के साथ एक बॉक्स का चयन करें (लंबाई, चौड़ाई और ऊंचाई 39 सेमी x 28 सेमी x 23 सेमी हैं), और साइड में एक छोटा छेद ड्रिल करें। सीलबंद बॉक्स, नेबुलाइजिंग कप और संपीड़न नेबुलाइजर को रबर ट्यूब(सप्लीमेंट्री फिगर 1)से कनेक्ट करें।
3. एक्यूपंक्चर उपचार
- अस्थमा(अनुपूरक चित्रा 2)के इलाज के लिए पारंपरिक चीनी चिकित्सा के सिद्धांत के अनुसार, GV14, द्विपक्षीय BL12 और द्विपक्षीय BL13 सहित एक्यूपॉइंट्स का चयन करें । दूसरे दिन मैनुअल एक्यूपंक्चर का प्रशासन करें और कुल 7 सत्र(चित्रा 2)के लिए हर दूसरे दिन एक बार प्रदर्शन करें।
- एक्यूपंक्चर जीवी 14 सातवें ग्रीवा कशेरुका और पहले वक्ष कशेरुका (स्कैपुला के खोखले) के बीच स्थित है, पीठ के मिडलाइन पर(चित्रा 3)।
- इंटरकोस्टल रिक्त स्थान (स्कैपुला के निचले किनारे) के दोनों किनारों पर तीसरे वक्ष कशेरुका के नीचे स्थित BL13 को एक्यूपंक्चर।
- एक्यूपंक्चर दूसरे वक्ष कशेरुका के नीचे स्थित BL12, इंटरकोस्टल रिक्त स्थान के दोनों किनारों पर (स्कैपुला के नीचे, BL13 के अनुसार पहचानकी गई स्थिति)।
- चूहों को पकड़ें और उन्हें उच्च मंच पर रखें।
- डिस्पोजेबल स्टेनलेस-स्टील सुई (0.3 मिमी x 13.0 मिमी, पूरक चित्रा 3)दाहिने हाथ के अंगूठे और तर्जनी के साथ संभालें, और दाहिने हाथ की हथेली से चूहे के पीछे दबाएं।
नोट: डिस्पोजेबल सुई केवल एक बार उपयोग किया जाना चाहिए । क्योंकि बार-बार इस्तेमाल करने से सुई कुंद हो जाएगी, जिससे चूहों में दर्द बढ़ जाता है। - ऊपरी किनारे (GV14) या स्कैपुला (BL12 और BL13) के निचले किनारे के बीच में अवसाद को स्पर्श करें, और फिर एक्यूपॉइंट्स का पता लगाने के लिए सुई टिप के साथ चूहे की त्वचा को धीरे से चुभते हैं।
- एक्यूपॉइंट के विशिष्ट स्थान का निर्धारण करने के बाद सुई को जल्दी से डालें और तेजी से दाहिने हाथ को हटा दें।
- समान रूप से 10-20 एस के लिए ६० बार/मिनट की दर से लगभग ३६० ° सुइयों मुड़, उंहें हर 5 मिनट में हेरफेर, और फिर उंहें 20-30 मिनट(अनुपूरक चित्रा 4)के बाद वापस ले ।
4. पेन्ह माप
- मेथाकोलिन तैयार करें: 100 मिलीग्राम मेथाकोलिन को 5 एमएल सेंट्रलाइज ट्यूब में रखें और पीबीएस को 2 मिलीग्राम (50 मिलीग्राम/एमएल मेथाचोलिन) की मात्रा में जोड़ें। इसके बाद 50 मिलीग्राम/एमएल मेथाकोलिन सॉल्यूशन को 25 एमजी/एमएल, 12.5 मिलीग्राम/एमएल, 6.25 मिलीग्राम/एमएल और 3.125 मिलीग्राम/एमएल को पतला करें।
- उपकरण निरीक्षण
- सिग्नल एम्पलीफायर चालू करें (एयरोसोल वितरण प्रणाली और कृंतक पूर्वाग्रह प्रवाह आपूर्ति प्रणाली सभी बंद हो जाती है, और नेबुलाइजेशन कनेक्टर बंद हो जाता है)।
- चैनलों की जांच करें: कैलिब्रेटपर क्लिक करें, मोटे समायोजन बेसलाइन को 0 पर वापस करें और सीधे वर्तमान (डीसी) स्थिति पर स्विच करें। बेसलाइन को 0 से ठीक ट्यून करें और एक सिरिंज के साथ 5 एमएल गैस इंजेक्ट करें। फिर, बारी वर्तमान (एसी) स्थिति में स्विच करें।
- चैनलों की जांच करने के बाद, सुनिश्चित करें कि त्रुटि मूल्य 0.5% से कम है।
- पैरामीटर सेट करना
- एयरोसोल वितरण प्रणाली और कृंतक पूर्वाग्रह प्रवाह आपूर्ति प्रणाली को चालू करें। पारा गेंद पर तरल स्तर के अनुसार प्रवाह दर को 4.5 एमएल तक समायोजित करें।
- अध्ययन विकल्प बनाने पर क्लिक करें और खुराक प्रतिक्रिया अध्ययनका चयन करें, प्रजातियों के चूहे का चयन करें और आगेक्लिक करें ।
- सरल खुराक सूचीका चयन करें, खुराक की संख्या 6 सेट करें और आगेक्लिक करें ।
- पेंह और क्षेत्र मापदंडों का चयन करें: पशु अनुकूलन समय को 5 मिनट, नेबुलाइजेशन समय को 2 मिनट, प्रतिक्रिया समय 3 मिनट और वसूली का समय 2 मिनट निर्धारित करें।
- क्रमिक रूप से नेबुलाइजर (200 माइक्रोन प्रति चूहा) के लिए निम्नलिखित समाधान जोड़ें: मेथाकोलिन (0 मिलीग्राम/एमएल, 3.125 मिलीग्राम/एमएल, 6.25 मिलीग्राम/एमएल, 12.5 मिलीग्राम/एमएल, 25 मिलीग्राम/एमएल और 50 मिलीग्राम/एमएनएल)। पेंह में वास्तविक समय परिवर्तन देखा जासकता है (चित्रा 4)।
- विभिन्न सांद्रता के साथ सभी 6 समाधानों पर प्रतिक्रिया व्यक्त की गई है, प्रयोग को पूरा करने के लिए फ़ाइल और अंत सत्र पर क्लिक करें।
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Representative Results
GV14, द्विपक्षीय BL12 और द्विपक्षीय BL13 अंक पर एक्यूपंक्चर के साथ, चूहा एक प्रवण स्थिति रखता है । चूहा अपने सिर को केवल बाहर की ओर मोड़ सकता है और अंदर नहीं क्योंकि एक दिशा लकड़ी के बोर्ड(चित्रा 5)के साथ अवरुद्ध है।
जैसे-जैसे मेथाकोलिन एकाग्रता बढ़ी, पेन्ह एक बढ़ती प्रवृत्ति दिखाता है और विकास दर धीरे-धीरे बढ़ती जाती है। 3.125 मिलीग्राम/एमएल, 6.25 मिलीग्राम/एमएल, 12.5 मिलीग्राम/एमएल, 25 मिलीग्राम/एमएल और 50 मिलीग्राम/एमएल की सांद्रता में, पेन्ह में 18.40% ± 10.70% की वृद्धि हुई, 26.30%, 88.10% ± ± 45.63%, 427.60% ± 172.92% और 882.27% ± क्रमशः 27.55%, बढ़ती खुराक (आंकड़ा 6) के साथ बढ़ता है, एक प्रभाव दिखा रहा है कि बढ़ती खुराक के साथ बढ़ जातीहै (आंकड़ा 6)।
चित्रा 1. उच्च मंच का निर्माण। उच्च मंच में एक सहायक उपकरण, तीन कनेक्टिंग डिवाइस और तीन पैडल होते हैं। सपोर्टिंग डिवाइस की लंबाई और चौड़ाई 86 सेमी x 17 सेमी, कनेक्टिंग डिवाइस की लंबाई और चौड़ाई 30 सेमी x 14 सेमी, पेडल की लंबाई और चौड़ाई 5 सेमी x 5 सेमी है। प्रत्येक कनेक्टिंग डिवाइस को 20 सेमी से अलग किया जाता है । कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें ।
चित्रा 2। अस्थमा के चूहे के मॉडल की स्थापना के लिए प्रोटोकॉल। संवेदीकरण 0 दिन पर किया जाता है, और एक्यूपंक्चर 2 से 14 दिनों से उच्च मंच पर हर दूसरे दिन किया जाता है । चुनौती के बाद पेन्ह में बदलाव को मापा जाता है । कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें ।
चित्र 3. जीवी 14 (दजाहुई) की शारीरिक स्थिति ,बीएल12 (फेंगमेनऔर चूहों परबीएल13 (फेशू) । (क)एक चूहे के पीछे का शारीरिक विच्छेदन जिसमें स्कैपुला, पहली पसली, दूसरी पसली, तीसरी पसली और दूसरी छाती कशेरुका (टी 2) दिखाई दे रही है । (ख)पसलियों और छाती कशेरुका का सगितल विमान । (ग)स्कैपुला का क्रॉस सेक्शन । (घ)GV14: स्कैपुला के खोखले में स्थित, पीठ की मिडलाइन; BL13: स्कैपुला के निचले किनारे पर स्थित; BL12: स्कैपुला के नीचे स्थित है, BL13 के अनुसार तैनात है। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें ।
चित्र 4. श्वसन कार्य में वास्तविक समय में परिवर्तन। ब्लू कर्व पेंह में वास्तविक समय परिवर्तन दिखाता है। ग्रीन कर्व एक निश्चित अवधि में ज्वारीय मात्रा (TVb) में कुल परिवर्तन दिखाता है। बैंगनी वक्र एक निश्चित अवधि में पेंह में कुल परिवर्तन दिखाता है। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें ।
चित्रा 5। उच्च मंच पर चूहों में जीवी 14 (Dazhui),BL12 (फेंगमेन)औरबीएल13 (फेशू)का एक्यूपंक्चर। (A)चूहों में जीवी14, बीएल12 और बीएल13 की स्थिति का शीर्ष दृश्य। (ख)एक उच्च मंच पर एक्यूपंक्चर चूहे का पार्श्व दृश्य । चूहे को मंच पर रखा जाता है और एक्यूपंक्चर के दौरान प्रवण स्थिति में बनाए रखा जाता है। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें ।
चित्रा 6. पेन्ह का माप। डब्ल्यूबीपी का उपयोग सामान्य चूहे के पेन्ह को मापने के लिए किया जाता है। जैसे-जैसे मेथाकोलिन की एकाग्रता बढ़ती है, पेन्ह भी धीरे-धीरे बढ़ता जाता है। डेटा को एसईएम (एन = 3) ± मतलब के रूप में प्रस्तुत किया जाता है। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें ।
अनुपूरक चित्र 1। नेबुलाइजर स्पेसिफिकेशंस। संकुचित नेबुलाइजर का नेबुलाइज्ड कण आकार 1 - 5 माइक्रोन है, नेबुलाइजेशन दर 0.2 मिलील/मिनट से अधिक है, और अंतिम दबाव 205 केपीए है। इस फाइल को डाउनलोड करने के लिए यहां क्लिक करें।
अनुपूरक चित्र 2। चूहे में GV14 (Dazhui),BL12 (फेंगमेन)और BL13 (Feishu)की योजनाबद्ध स्थिति । कृपया इस फाइल को डाउनलोड करने के लिए यहां क्लिक करें ।
अनुपूरक चित्रा 3. सुई विनिर्देश। सुई की लंबाई 13 मिमी है और व्यास 0.3 मिमी है। कृपया इस फ़ाइल को डाउनलोड करने के लिए यहां क्लिक करें।
अनुपूरक चित्र 4। एक्यूपंक्चर हेरफेर की योजनाबद्ध। सुई डालने के बाद, समान रूप से विभिन्न दिशाओं में लगभग 360 ° सुई मुड़। इस फाइल को डाउनलोड करने के लिए यहां क्लिक करें।
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Discussion
इस अध्ययन में उपयोग किए जाने वाले GV14, द्विपक्षीय BL12 और द्विपक्षीय BL13 एक्यूपॉइंट पीठ पर स्थित हैं, और इस प्रकार उच्च मंच चूहों को ठीक करने के लिए उपयुक्त है। अन्य अध्ययनों में, एक पर्याप्त निर्धारण विधि का चयन एक्यूपॉइंट्स15की स्थिति के अनुसार किया जाना चाहिए। पेट पर एक्यूपॉइंट के लिए, चूहे को काले शंकु (बेकर्स द्वारा उपयोग किए जाने वाले पेस्ट्री बैग के समान)17में नीचे रखा जा सकता है। निर्धारण के लिए संयम शंकु से एक श्रृंखला जुड़ी होती है, साथ ही चूहे का पिछला पैर भी तय होता है। इस तरह जानवर के शरीर के सामने कांट में मजबूती से फिक्स हो जाता है, जबकि पेट और पीठ का संपर्क खुल जाता है। पैर पर एक्यूपॉइंट के लिए, चूहे को एक विशेष पारदर्शी बाल्टी में खड़ी रखा जा सकता है, जिससे पूंछ और पिछले पैर स्वाभाविक रूप से बाल्टी18के बाहर हो जाते हैं। पारदर्शी बैरल चूहे के शरीर को कवर करता है, लेकिन पैर पर एक्यूपंक्चर के लिए यह सुविधाजनक है।
इन तरीकों का प्रदर्शन करते समय कई महत्वपूर्ण चरणों पर विचार किया जाना चाहिए। एक्यूपंक्चर उपचार से पहले, चूहों को पहले से कुछ दिनों के लिए प्रशिक्षण के लिए उच्च मंच पर रखा जाना चाहिए जब तक कि चूहे चुप न रहें और उच्च मंच पर सुचारू रूप से सांस लेते हैं। एक्यूपंक्चर हेरफेर के लिए, दाहिने हाथ की हथेली चूहे को वापस दबाती है, सुई डालने में आसान होती है। श्वसन कार्य मापन के लिए, डब्ल्यूबीपी प्रणाली पेन्ह में परिवर्तन को मापता है जो चूहों के फेफड़े के प्रतिरोध में परिवर्तन को गैर-निवास तरीके से प्रतिबिंबित करता है और मनोवैज्ञानिक तनाव19,20के प्रभाव को कम करता है। चूहों पर बाहरी वातावरण के प्रभाव को कम किया जाना चाहिए। बाहरी वातावरण के कारण होने वाली जलन को कम करने के लिए चूहे को परीक्षण कक्ष में रखा जाना चाहिए और फिर एक प्लास्टिक बैग (वेंटिलेशन के लिए पृष्ठीय पक्ष पर 1 सेमी x 1 सेमी छेद के साथ) के साथ परीक्षण कक्ष को कवर किया जाना चाहिए।
इस प्रयोग की सीमा यह है कि सुई गिर सकती है यदि चूहा एक्यूपंक्चर के दौरान झूलता है। इसलिए, गहराई को समायोजित करने के लिए हर 5 मिनट में नीरस छेड़छाड़ की जानी चाहिए। इसके अलावा, उच्च मंच चूहों के लिए उपयुक्त है, लेकिन चूहों जैसे छोटे जानवरों के लिए नहीं।
संक्षेप में, हम एक्यूपंक्चर के दौरान प्रतिबंध के बिना चूहों को ठीक करने के लिए एक उच्च मंच के निर्माण के लिए विधि का विस्तृत विवरण प्रदान करते हैं। उच्च मंच चूहे के पीछे एक्यूपॉइंट को पूरी तरह से बेनकाब कर सकता है। उच्च मंच और नॉनइनवेसिव श्वसन कार्य माप का उपयोग अस्थमा के उपचार के रूप में एक्यूपंक्चर के विश्लेषण की सुविधा प्रदान कर सकता है। पीठ पर एक्यूपंक्चर के चिकित्सीय तंत्र का अध्ययन अस्थमा और क्रोनिक ऑब्सट्रक्टिव पल्मोनरी डिजीज जैसे श्वसन रोगों के लिए नए उपचार ला सकता है।
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Disclosures
लेखकों के पास खुलासा करने के लिए कुछ नहीं है ।
Acknowledgments
इस काम को नेशनल नेचुरल साइंस फाउंडेशन ऑफ चाइना (नंबर 81922076, 81973951, 81873373), शंघाई के सहयोगी इनोवेशन की कंस्ट्रक्शन प्रोजेक्ट (नहीं) ने सपोर्ट किया। ZYJKFW201811010, ZYJKFW201701005) ।
Materials
Name | Company | Catalog Number | Comments |
0.3 mm x 13.0 mm acupuncture needle | China Suzhou Medical Device Factory | ||
Al(OH)3 | American Thermo | 77161 | |
Compression nebulizer | Jiangsu Lude Medical Electronics Co., Ltd. | NB-212C | |
Fine Pointe V2.0 | American Buxco | ||
Laboratory gas drying unit | American Drierite | 26800 | |
Methacholine | American Sigma | MKCF6054 | |
Ovalbumin | American Sigma | A5503-25G | |
Phosphate Buffer solution (1x) | Gelifesciences | SH30256.01 | |
Seal box | IRIS Corporation of Japan | ||
Whole-body plethysmography respiratory function measurement system | American Buxco |
References
- Papi, A., Brightling, C., Pedersen, S. E., Reddel, H. K.
Asthma. Lancet. 391 (10122), 783-800 (2018). - Global Initiative for Asthma, 2019. Global strategy for asthma management and prevention. , Available from: https://ginasthma.org/gina-reports/ (2019).
- Enilari, O., Sinha, S. The Global Impact of Asthma in Adult Populations. Annals of Global Health. 85 (1), (2019).
- Global Initiative for Asthma, 2020. Global strategy for asthma management and prevention. , Available from: https://ginasthma.org/gina-reports/ (2020).
- Zhuang, Y., Xing, J. J., Li, J., Zeng, B. Y., Liang, F. R.
History of acupuncture research. International Review of Neurobiology. 111, 1-23 (2013). - Yang, Y. Q., et al. Considerations for use of acupuncture as supplemental therapy for patients with allergic asthma. Clinical Reviews in Allergy & Immunology. 44 (3), 254-261 (2013).
- Nurwati, I., et al. Reduction of interleukin-17 level by acupuncture at Feishu (BL13) is strengthened by acupuncture at Zusanli (ST36) in a mouse model of chronic asthma: An experimental study. Medical Acupuncture. 27 (4), 278-282 (2015).
- Nurwati, I., et al. Improvement in inflammation and airway remodelling after acupuncture at BL13 and ST36 in a mouse model of chronic asthma. Acupuncture in Medicine. 37 (4), 228-236 (2019).
- Reddy, A. T., Lakshmi, S. P., Reddy, R. C. Murine model of allergen induced asthma. Journal of Visualized Experiments. (63), e3771 (2012).
- Zhou, D. D., et al. Metallothionein-2 is associated with the amelioration of asthmatic pulmonary function by acupuncture through protein phosphorylation. Biomedicine & Pharmacotherapy. 123, 109785 (2020).
- Yin, L. M., et al. Transgelin-2 as a therapeutic target for asthmatic pulmonary resistance. Science Translational Medicine. 10 (427), (2018).
- Shin, Y. S., Takeda, K., Gelfand, E. W. Understanding asthma using animal models. Allergy Asthma & Immunology Research. 1 (1), 10-18 (2009).
- Cui, K. M., et al. Electro-acupuncture relieves chronic visceral hyperalgesia in rats. Neuroscience Letters. 376 (1), 20-23 (2005).
- Tobin, J. R., Martin, L. D., Breslow, M. J., Traystman, R. J. Selective anesthetic inhibition of brain nitric oxide synthase. Anesthesiology. 81 (5), 1264-1269 (1994).
- Dimitrov, N., Sivrev, D., Atanasova, D. Method of rat immobilization during experimental acupuncture. Scripta Scientifica Medica. 45, 105-108 (2013).
- Aguilar, R., et al. emotional reactivity and fear of heights: a factor analytic map from a large F(2) intercross of Roman rat strains. Brain Research Bulletin. 57 (2), 17-26 (2002).
- Lai, X., et al. Proteomic response to acupuncture treatment in spontaneously hypertensive rats. PloS One. 7 (9), 44216 (2012).
- Niu, C., et al. A novel uni-acupoint electroacupuncture stimulation method for pain relief. Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine. 2011, 209879 (2011).
- McFadden, E. R., Luparello, T., Lyons, H. A., Bleecker, E. The mechanism of action of suggestion in the induction of acute asthma attacks. Psychosomatic Medicine. 31 (2), 134-143 (1969).
- Savov, J. D., et al. Ozone-induced acute pulmonary injury in inbred mouse strains. American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology. 31 (1), 69-77 (2004).