Summary
Her præsenterer vi en kvalitetsevalueringsmetode baseret på en multipel lysspredningsteknik til evaluering af kvaliteten af Indigo Naturalis.
Abstract
Kvalitetskontrol af kinesisk urtemedicin er en afgørende komponent i kinesisk urtemedicin forskning og udvikling. Stillet over for udfordringerne ved modernisering og internationalisering af kinesisk urtemedicin er det presserende at etablere grundige og effektive procedurer til kvalitetsidentifikation af kinesisk urtemedicin, og der er et presserende behov for nye analyse- og testteknikker, der er effektive, nøjagtige og miljøvenlige.
Multipel lysspredning er en banebrydende og analytisk metode, der nøjagtigt og hurtigt kan vurdere kvaliteten af kinesisk urtemedicin uden at ændre prøvens art eller tilstand eller bruge organiske reagenser. Indigo Naturalis betragtes som et godt middel mod pædiatrisk hypertermi, psoriasis, leukæmi og ulcerøs colitis. I denne undersøgelse blev processen med tilsætning af Indigo Naturalis-pulver i vand registreret præcist ved hjælp af et multipelt lysspredningsinstrument.
De kvalitative og kvantitative målinger af instrumentet kan bruges til nøjagtigt at fange den samlede bane og synkende opførsel af Indigo Naturalis-pulver i vand og til at etablere en hurtig evalueringsmetode for kvaliteten af Indigo Naturalis med prøvens transmissions- og backscatteringspektrogrammer som kvalitative indikatorer og stabilitetsindeks som en kvantitativ indikator. Den analytiske teknik baseret på flere lysspredninger giver en hurtig, præcis, grøn og miljøvenlig metode til kvalitetsevaluering af Indigo Naturalis og understøtter udviklingen og transformationen af Indigo Naturalis af høj kvalitet.
Introduction
I traditionel kinesisk medicin påvirkes den kliniske effektivitet af medicin og sikkerheden i behandlingsforløbet direkte af kvaliteten af kinesisk urtemedicin i løbet af sygdomsbehandlingen. Ved hjælp af banebrydende identifikationsteknologi kan man vurdere effektiviteten af kinesisk urtemedicin og garantere brugersikkerhed. Den kinesiske urtemedicin vandtestmetode refererer til nedsænkning af urterne i vand eller opløsningsmiddel og derefter hurtigt og præcist bestemme lægemidlets ægthed ved at observere ændringerne i farve, størrelse og form1.
Det var oprindeligt et godt valg til identifikation af kinesisk medicin. Ulempen ved den traditionelle vandtestmetode er imidlertid, at nøjagtigheden og følsomheden ved at skelne ægtheden af kinesisk medicin er lav på grund af subjektiviteten af observation med det blotte øje2. Et af de vigtigste medicinske materialer, der anvendes i vandtestmetoden, er Indigo Naturalis, der betragtes som et effektivt middel til pædiatrisk hypertermi, psoriasis, leukæmi og ulcerøs colitis3. Den ægte Indigo Naturalis flyder på vandoverfladen, og vandet bliver ikke mørkeblåt efter omrystning. Den falske Indigo Naturalis har dog partikler, der synker, og vandet bliver mørkeblåt efter at have rystet4. Dets princip skyldes hydrofob og let flydende indigo, indirubin og andre organiske komponenter af høj kvalitet Indigo Naturalis. Tværtimod, på grund af lavt organisk materiale, en stor mængde kalk og tung tekstur, vil nogle partikler doteret med falske Indigo Naturalis synke hurtigt5. Denne metode er imidlertid kun en simpel kvalitativ identifikation, og den begrænser den hurtige identifikation af ægtheden af kinesisk urtemedicin og afslører ikke ændringerne af Indigo Naturalis i vand.
Multipel lysspredningsteknologi er en teknologi, der kan måle scanning af lyssignaler med flere vinkler baseret på en laser, der passerer gennem prøven. Det indfaldende lys spredes, når det trænger ind i prøven eller støder på partikler. Hvis det spredte lys trænger gennem prøven, dannes et transmissionslyssignal; Hvis prøvekoncentrationen er høj, reflekteres lyset af partiklerne og danner et tilbagespredningslyssignal. Ændringerne i lysintensitet afspejler ændringerne i partikelkoncentration og partikelstørrelse i flydende præparat6. De mange lysspredningsinstrumenter kan hurtigt og præcist analysere fænomener som emulgering, flokkulering, udfældning og brud på suspension, emulsion og skumvæske ved hjælp af flere lysspredningsteknologier samt kvantitativt analysere egenskaber såsom forekomsten af ovennævnte fænomener.
Flere lysspredningsteknologier har vist betydelige fordele ved overvågning af partikelstabilitet7, rødvinsklaring8 og kvalitetskontrol af mælkegæring9. Ved hjælp af denne teknologi kan den traditionelle vandtestmetode for Indigo Naturalis være intuitiv, kvantitativ og videnskabelig. Baseret på princippet om multipel lysspredningsteknologi etablerede denne undersøgelse derfor en hurtig evalueringsmetode for kvaliteten af Indigo Naturalis, idet prøvens turbiskanske stabilitetsindeks (TSI) blev taget som indeks for kvalitetskontrol (figur 1).
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
1. Forberedelse af analyseprøve
- Opsæt fire forskellige partier af Indigo Naturalis urtepulver til testen. Hver prøve sendes gennem den syvende sigte og den niende sigte efter tur, og prøven indsamles mellem syvende og niende sigte5.
BEMÆRK: Den gennemsnitlige blændestørrelse for den syvende sigte er 125 μm ± 5,8 μm. Den gennemsnitlige blændestørrelse på den niende sigte er 75 μm ± 4,1 μm. - 0,2 g af prøven (Indigo Naturalis-pulver) vejes nøjagtigt på et vejepapir og lægges til side.
2. Tilsætning af prøver
- Byg et jernstøttestativ og læg en jernring med en tragt på 5 cm i diameter.
- Brug en pipette til at tilsætte 20 ml rent vand til prøveglasflasken (bunddiameter 2,6 cm, højde 6 cm). Anbring prøveglasflasken direkte under tragten, så tragtens nederste kant flugter med flaskens munding.
BEMÆRK: Rengør ydersiden af prøveglashætteglasset med et rent, ikke-slibende køkkenrulle, og inspicer glasoverfladen for synlige mærker. Hvis der er, skal du skifte glasflaske. Pas på ikke at spilde, når du tilsætter væske. - Prøven slippes i en højde af 80 cm fra tragtens nederste kant, så den kan glide frit langs tragten ind i prøveflasken.
3. Betjening af instrumentet
- Tænd Turbiscan Lab-instrumentet, og varm det op i 30 minutter.
- Opret filen. Klik på knappen Opret fil i topmenuen (eller funktionen Ny fil i menuen Filer) for at oprette en ny tom målefil. Definer dens navn og gem placering (som standard er datamappen placeret på: "C: / brugere / admin / Formulaction / FAnalyser / Data".
- Klik på knappen Vis Turbiscan Lab-temperatur i topmenuen for at indstille instrumentets måltemperatur til 25 °C.
BEMÆRK: Instrumenttemperaturen påvirkes af rumtemperaturen, så vær omhyggelig med at justere omgivelsestemperaturen. - Klik på Programscanning i topmenuen for at åbne installationsanalyseprogrammet. Føj programmet til listen, og tilføj 30 s som en cyklus og 21 scanninger til analysesekvensen på proceslinjen. Vælg dette analyseprogram til alle efterfølgende målinger.
- Flyt det forberedte prøvehætteglas ind i målesystemet. Når du har konfigureret programmet, skal du klikke på Start for at starte målingen.
BEMÆRK: Pas på ikke at ryste glasflasken, når du bevæger dig, og flyt den kun lidt. - Efter dataindsamling skal du klikke på listen over beregnede parametre for automatisk at beregne TSI.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Figur 2A-D svarer til henholdsvis S1, S2, S3 og S4 af Indigo Naturalis. A er af høj kvalitet Indigo Naturalis, der viser den samme lystransmission i enhver højde inden for 0-10 min, hvilket er meget stabilt. B er den almindelige Indigo Naturalis, og dens lystransmission svinger lidt med tidsskiftet og er generelt stabil. C og D er falske og ringere produkter. Der kan være to betingelser i transmissionsspektrogrammerne for falske Indigo Naturalis, nemlig transmissionslyset i C faldt hurtigt i det første måleøjeblik, og transmissionslyset i bunden af prøveflasken var signifikant lavere end i toppen, hvilket tyder på, at aflejringen fandt sted i prøveflasken første gang og deponeringen var meget hurtig. Imidlertid er transmissionslyset i D stabilt ved nultid og falder derefter langsomt med forlængelsen af tiden. Sammenlignet med C indikerer det, at der er langsom sedimentering i prøveflasken.
Figur 3A-D svarer til henholdsvis S1, S2, S3 og S4 i Indigo Naturalis. Fra spektraldataene for backscattering light kan det groft udledes, at prøvedataene er i overensstemmelse med transmissionslyset. Ingen eller små udsving (henholdsvis figur 3A og figur 3B) angiver, at prøven er stabil. Figur 3C, D kan være uklar på grund af sedimenteringen af prøven, og udsvingene øges, hvilket fører til prøvens ustabilitet.
Ved at sammenligne transmissionsspektrogrammet (figur 2) og backscattering-spektrogrammerne (figur 3) for de fire Indigo Naturalis med start- og slutsnapshots af videoerne (figur 4) og supplerende video S1, supplerende video S2, supplerende video S3 og supplerende video S4 optaget af instrumentet med flere lysspredninger, kan ægtheden af Indigo Naturalis hurtigt og groft identificeres.
Med forlængelsen af måletiden bør transmissionsspektrogrammerne og backscatteringspektrogrammerne af Indigo Naturalis af høj kvalitet svinge lidt eller slet ikke, og transmissionsspektrogrammer og backscatteringspektrogrammer af pseudo eller ringere Indigo Naturalis kan gradvist eller kraftigt falde. Supplerende Video S1, Supplerende Video S2, Supplerende Video S3 og Supplerende Video S4 afspejlede også tydeligt dette resultat. TSI-værdierne afspejler akkumuleringen af intensitetsændringer i transmissionslys eller tilbagespredningslys sammenlignet med den foregående måling i måletiden, og det er også den omfattende ændring af prøvens volumenkoncentration og partikelstørrelse i hele scanningsperioden. Kvaliteten af de fire typer Indigo Naturalis kan skelnes nøjagtigt ved at kontrastere deres TSI på 10 min (figur 5 og tabel 1). Jo højere TSI-værdien er, desto mere ustabilt bliver systemet, og jo større ændres prøven10. Hvis TSI-værdien er <10 i scanningsperioden, betragtes prøven som stabil. Derfor viser den nuværende protokol en metode til hurtig identifikation af Indigo Naturalis af god kvalitet baseret på TSI i et instrument med flere lysspredninger.
Figur 1: Princippet om evaluering af kvaliteten af Indigo Naturalis ved multipel lysspredning. Indigo og indirubin er hovedårsagerne til den stærke hydrofobicitet af Indigo Naturalis. Indholdet af indigo og indirubin bestemmer partiklernes sedimenteringshastighed. Med denne egenskab kan et multipelt lysspredningsinstrument skelne mellem forskellige kvaliteter af Indigo Naturalis. Multipellysspredningsinstrumentet har multipel lysspredningsteknologi, og dets målesonde består af en pulserende nær-infrarød lyskilde (λ = 880 nm) og to synkrondetektorer. En af dem er en transmissionslysdetektor, som bruges til at modtage lyset, der passerer gennem prøveflasken (0° med det indfaldende lys) og til at bestemme den klare prøve. Den anden er en backscattering lysdetektor, som bruges til at modtage prøvens backscattering light (45° fra det indfaldende lys) og til at bestemme højkoncentrationsprøven. Målesonden scanner hele prøvecellen fra bund til top, en gang hver 40 μm, og indsamler transmissionslys (T) og backscattering light (BS) data. Ved at indstille måletider og scanningstid scannes prøven gentagne gange, og signal- og dataindsamlingen behandles af strømspændingsomformeren for at opnå et atlas, der repræsenterer prøvens stabilitetsegenskaber. Klik her for at se en større version af denne figur.
Figur 2: Transmissionsspektrogrammer af fire Indigo Naturalis i instrumentet til spredning af flere lys. A-D svarer til henholdsvis S1, S2, S3 og S4 i Indigo Naturalis. (A) Høj kvalitet, stabil Indigo Naturalis, der viser den samme lystransmission i enhver højde inden for 0-10 min. (B) Den almindelige Indigo Naturalis og dens lystransmission svinger lidt med tidsskiftet og er generelt stabil. (C, D) Falske og ringere produkter. C) Transmissionslyset i bunden af prøveflasken var betydeligt lavere end i toppen, hvilket tyder på, at aflejringen fandt sted i prøveflasken på et tidligt tidspunkt, og at deponeringen var meget hurtig. (D) Transmissionslyset er imidlertid stabilt ved nul tid og falder derefter langsomt med tiden. Sammenlignet med C indikerer det, at der er langsom sedimentering i prøveflasken. Klik her for at se en større version af denne figur.
Figur 3: Backscattering spektrogrammer af fire Indigo Naturalis i multiple light scattering instrumentet. A-D svarer til henholdsvis S1, S2, S3 og S4 i Indigo Naturalis. Fra spektraldataene for backscattering light kan det groft udledes, at prøvedataene er i overensstemmelse med transmissionslyset. (A) Ingen udsving, hvilket tyder på, at prøven er meget stabil. B) Udsvingene er små, hvilket tyder på, at stikprøven er forholdsvis stabil. (C, D) Turbiditet skyldes sedimenteringen af prøven, og udsvingene øges, hvilket fører til prøvens ustabilitet. Klik her for at se en større version af denne figur.
Figur 4: Start og slut snapshots af videoerne af bundfældningsprocessen af fire Indigo Naturalis i instrumentet med flere lysspredninger. A-D svarer til henholdsvis S1, S2, S3 og S4 i Indigo Naturalis. I resultaterne, ved at sammenligne scanningsbillederne på 0 min og 10 min, kan det ses, at A (Supplemental Video S1) og B (Supplemental Video S2) er meget klare i hele processen. C (Supplemental Video S3) er delvist grumset i starten, og derefter helt grumset til sidst. D (supplerende video S4) ændres gradvist fra afklaring til turbiditet. Klik her for at se en større version af denne figur.
Figur 5: TSI for fire Indigo Naturalis fra 0 min til 10 min. Grafen viser TSI's kurve med scanningstid. Ifølge variationen i TSI-kurven har S4 den højeste hældning, og TSI-værdien ændres særlig markant. Dernæst er hældningen på S3 også relativt stor, og TSI-værdien har været i en langsom stigning. Hældningerne på S1 og S2 er dog tæt på nul, og TSI-værdierne ændres mindre. Klik her for at se en større version af denne figur.
| Nej. | Indigo indhold | Indirubin indhold | TSI på 10 min |
| S1 | 9,00% ± 0,38% | 0.60% ± 0.00% | 0,61 ± 0,06 |
| S2 | 2,07% ± 0,01% | 0.20% ± 0.00% | 2,74 ± 0,14 |
| S3 | 1,40% ± 0,02% | 0.00% ± 0.00% | 28.46 ± 3.51 |
| S4 | 0.00% ± 0.00% | 0.00% ± 0.00% | 68,75 ± 1,28 |
Tabel 1: TSI for fire Indigo Naturalis på 10 min (n=3). Ifølge den stærke hydrofobicitet af Indigo Naturalis kan det udledes, at indigo og indirubinindholdet i Indigo Naturalis bestemmer dets kvalitet. Når indholdet af indigo og indirubin er højt, flyder prøven næsten fuldstændigt på vandoverfladen, hvilket resulterer i små TSI-værdier. Efter 10 minutter er TSI-sekvensen for hver batch S4 > S3 > S2 > S1. For S1 og S2 er TSI-værdien ret lille, hvilket afspejler, at prøverne er relativt stabile og af god kvalitet. For S3 og S4 er TSI-værdien ekstremt stor, hvilket også afspejler prøvens ustabilitet, og kvaliteten er ringere.
Supplerende video S1: Animationsvideo af bundfældningsprocessen for en Indigo Naturalis af god kvalitet i instrumentet til spredning af flere lys. I hele animationsvideoen kan det ses, at S1 er næsten uændret, hvilket indikerer, at den er relativt stabil. Klik her for at downloade denne fil.
Supplerende video S2: Animationsvideo af bundfældningsprocessen for almindelig Indigo Naturalis i instrumentet med flere lysspredninger. I hele animationsvideoen kan det ses, at S2 er næsten uændret, hvilket indikerer, at den er relativt stabil. Klik her for at downloade denne fil.
Supplerende video S3: Animationsvideo af bundfældningsprocessen for falsk Indigo Naturalis i instrumentet med flere lysspredninger. I hele animationsvideoen kan det ses, at S3 er uklar i det tredje minut af scanningen, hvilket indikerer ustabilitet. Klik her for at downloade denne fil.
Supplerende video S4: Animationsvideo af bundfældningsprocessen for falske Indigo Naturalis i instrumentet med flere lysspredninger. I hele animationsvideoen kan det ses, at S4 er uklar i det tredje minut af scanningen, hvilket indikerer ustabilitet. Klik her for at downloade denne fil.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Ifølge traditionel kinesisk medicin har Indigo Naturalis magten til at rydde varme og afgiftning, afkøle blod, eliminere pletter, rense ild og standse kramper. Baseret på randomiserede dobbeltblindede kontrollerede kliniske forsøg11,12,13 er Indigo Naturalis effektiv til behandling af psoriasis, ulcerøs colitis og akut promyelocytisk leukæmi ud over sin traditionelle behandling af hoste og slim, hæmoragiske symptomer, sår og hævelser, levervarme og epilepsi. På grund af mangfoldigheden af Indigo Naturalis er kvalitetsforskellen stor, og indholdsdetekteringsprocessen er kompliceret. På den ene side omfatter kilderne til Indigo Naturalis Strobilanthes cusia (Nees) Kuntze, Persicaria tinctoria (Aiton) Spach og Isatis tinctoria L., det geografiske miljø og forskellige høsttider fører til de iboende kvalitetsforskelle14. På den anden side kræver forberedelsesprocessen for Indigo Naturalis trin som iblødsætningsgæring, kalkbankende indigo, vandflueraffinering osv. Imidlertid vil denne proces sandsynligvis producere forskellige kvaliteter af Indigo Naturalis, og indholdet af Indigo Naturalis varierer fra batch til batch. På nuværende tidspunkt har flere undersøgelser vist, at den kvalificerende sats for indekskomponentindholdet i Indigo Naturalis er lav. Falske og ringere produkter forårsager store kvalitetsproblemer, hvilket gør det ekstremt vanskeligt at bruge Indigo Naturalis klinisk15,16,17. Derfor er det presserende og uundværligt for Indigo Naturalis at udvikle en standardiseret kvalitetskontrolmetode.
Et vigtigt trin i den beskrevne proces er, at glasflasken med prøven skal flyttes ind i prøvetanken så hurtigt som muligt, samtidig med at flasken ikke rystes. Ellers kan inkonsekvent håndtering give vildledende resultater. For det andet vil omgivelsestemperaturen have indflydelse på instrumentets indstillede temperatur. Når rumtemperaturen overstiger 30 °C, og instrumenttemperaturen er lavere end rumtemperaturen, stiger instrumenttemperaturen. Det er værd at bemærke, at stuetemperaturen skal styres under instrumenttemperaturen.
Selvom flere lysspredninger har unikke fordele i forhold til traditionelle metoder, har det også sine begrænsninger. For det første kan multiplex lysspredning ikke definitivt give det nøjagtige indhold af en prøve, men kan kun identificere ægtheden og et groft givet interval. For det andet er det uden yderligere identifikation af kinesisk urtemedicin i øjeblikket kun relevant for den hurtige kvalitetsvurdering af Indigo Naturalis. For det tredje er kriterierne for nutidig kvalitetsevalueringsforskning langt fra opfyldt ved at være afhængige af flere lysspredningsmetoder og flere lysspredningsinstrumenter.
Sammenlignet med den eksisterende vandtestmetode ligger betydningen af multipel lysspredningsmetoden i følgende punkter. For det første har den høj følsomhed og pålidelighed. Følsomheden og opløsningen er meget højere end for observation med det blotte øje. Multipel lysspredningsenheden kan fange, hvordan løsningen ændrer sig over tid og oprette en animeret video af hele processen. For det andet kan det analyseres kvalitativt og kvantitativt. Ved berøringsfri måling kan instrumentet automatisk bestemme prøvens stabilitet ved hjælp af dens optiske egenskaber (transmissionslys, tilbagespredningslys, TSI og partikelstørrelse).
I fremtiden mener vi, at denne metode i sidste ende vil være nyttig inden for traditionel kvalitetskontrol af kinesisk medicin, især i vurderingen af ægthed. Denne undersøgelse understøttede validiteten og nøjagtigheden af multiple lysspredningsmetoden i den hurtige vurdering af kinesisk medicinkvalitet ved hjælp af Indigo Naturalis som et eksempel. Efterhånden som udstyr og applikationsteknologi udvikler sig løbende, vil flere lysspredningsteknologier derfor blive kombineret med andre detektionsteknikker for at supplere hinanden, hvilket har større indflydelse på kvalitetskontrol af kinesiske plantelægemidler i fremtiden.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Forfatterne har ingen interessekonflikter at oplyse.
Acknowledgments
Arbejdet ønsker at anerkende støtte fra National Natural Science Foundation of China (nr. 82173976), National Key Research and Development Program (nr. 2018YFC1707205) og State Key Laboratory of Innovative Drugs and High Energy Saving Pharmaceutical Equipment, Jiangxi University of Traditional Chinese Medicine (nr. GZSYS202003).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Analytical balance (1/10,000) | Sartorious, Germany | BSA224S | www.sartorius.com.cn |
| Funnel | Chengdu Kelong Chemical Co. LTD | Diameter 5 cm | www.cdkelongchem.com |
| Indigo Naturalis S1 | Xianyou, Fujian | 20210501 | |
| Indigo Naturalis S2 | Yaan, Sichuan | 20201102 | |
| Indigo Naturalis S3 | Xianyou, Fujian | 20161012 | |
| Indigo Naturalis S4 | Xianyou, Fujian | 20180305 | |
| Iron ring | Chengdu Kelong Chemical Co. LTD | / | www.cdkelongchem.com |
| Iron stand | Chengdu Kelong Chemical Co. LTD | / | www.cdkelongchem.com |
| Mili-Q ultra-pure water meter | Milipore, USA | Mili-Q | www.merckmillipore.com |
| Ninth sieve | Chengdu Kelong Chemical Co. LTD | Average aperture size 75 µm | www.cdkelongchem.com |
| Sample bottle | French Formulaction Company | Bottom diameter 2.6 cm, height 6 cm | www.formulaction.com |
| Seventh sieve | Chengdu Kelong Chemical Co. LTD | Average aperture size 125 µm | www.cdkelongchem.com |
| Turbisoft Lab multiple light scattering instrument | French Formulaction Company | Turbisoft Lab 2.3.1.125 Fanalyser 1.3.5 | www.formulaction.com |
| Weighing paper | Chengdu Kelong Chemical Co. LTD | / | www.cdkelongchem.com |
References
- Li, G. M. The application of water test in the identification of traditional Chinese medicine. Chinese Medicine Modern Distance Education of China. 19 (23), 153-155 (2021).
- Ye, B. Analysis of application effect of water test method in identification of traditional Chinese medicine. Heilongjiang Medicine Journal. 33 (02), 283-285 (2020).
- Yang, Q. Y., et al. From natural dye to herbal medicine: a systematic review of chemical constituents, pharmacological effects and clinical applications of indigo naturalis. Chinese Medicine. 15 (1), 127 (2020).
- Chen, C. The application value of water test method in the identification of Chinese medicine. Journal of Traditional Chinese Medicine Management. 30 (10), 133-134 (2022).
- Liu, X. M., et al. Establishment and application of a rapid quality inspection method for Indigo Naturalis based on quantitative portrayal of water testing process. Acta Pharmacologica Sinica. 57 (11), 3411-3418 (2022).
- Mengual, O., Meunier, G., Cayre, I., Puech, K., Snabre, P. Characterisation of instability of concentrated dispersions by a new optical analyser: the TURBISCAN MA 1000. Colloids and Surfaces A: Physicochemical and Engineering Aspects. 152 (1), 111-123 (1999).
- Olatunji, O. N., Du, J., Hintz, W., Tomas, J. Application of particle sedimentation analysis in sterically-stabilized TiO2 particles stability assessment. Advanced Powder Technology. 27 (4), 1325-1336 (2016).
- Ferrentino, G., et al. Fining of red wine monitored by multiple light scattering. Journal of Agricultural and Food Chemistry. 65 (27), 5523-5530 (2017).
- Ramezani, M., Ferrentino, G., Morozova, K., Scampicchio, M. Multiple light scattering measurements for online monitoring of milk fermentation. Foods. 10 (7), 1582 (2021).
- Yang, H. B., et al. A new approach to evaluate the particle growth and sedimentation of dispersed polymer microsphere profile control system based on multiple light scattering. Powder Technology. 315, 477-485 (2017).
- Zhang, X. X., et al. Treatment of non-high-risk acute promyelocytic leukemia with realgar-indigo naturalis formula (RIF) and all-trans retinoid acid (ATRA): study protocol for a randomized controlled trial. Trials. 21 (1), 7 (2020).
- Sugimoto, S., et al. Clinical efficacy and safety of oral Qing-Dai in patients with ulcerative colitis: a single-center open-label prospective study. Digestion. 93 (3), 193-201 (2016).
- Lin, Y. K., et al. Clinical assessment of patients with recalcitrant psoriasis in a randomized, observer-blind, vehicle-controlled trial using indigo naturalis. Archives of Dermatology. 144 (11), 1457-1464 (2008).
- Sun, Q., Leng, J., Tang, L., Wang, L., Fu, C. A Comprehensive review of the chemistry, pharmacokinetics, pharmacology, clinical applications, adverse events, and quality control of indigo naturalis. Frontiers in Pharmacology. 12, 664022 (2021).
- Yang, Y. J., et al. Investigation and analysis of the commodity quality of Indigo Naturalis herbs in Beijing area. Lishizhen Medicine and Materia Medica Research. 23 (07), 1787-1788 (2012).
- Yao, Z. A., et al. Comparative study of thirty-eight batches of indigo naturalis. Journal of Chengdu University of TCM. 34 (02), 86-88 (2011).
- Bai, Z., et al. Determination of indigo and indirubin in indigo naturalis by HPLC. Modern Chinese Medicine. 12 (08), 27-29 (2010).
