Summary
में इस वीडियो और परख प्रदर्शन किया है कि परीक्षण एक aphids कि infests क्षेत्र और एक नहीं है कि तंबाकू के पौधों की दो प्रकार के लिए निकोटीन की सहिष्णुता.
Abstract
पौधे कीट खिलाने के लिए प्रतिक्रिया में कई अलग अलग seconday चयापचयों का उत्पादन upregulate सकता है. इन चयापचयों, निकोटीन, अच्छी तरह से करने के लिए कीटनाशक गुण है पता है. तम्बाकू पौधों की herbivory करने के लिए प्रतिक्रिया, या कीड़े द्वारा पर gnawed, इस neurotoxic उपक्षार के उत्पादन में वृद्धि है. यहाँ, हम एक प्रयोग है कि एक तंबाकू अनुकूलित हरी आड़ू aphid, Myzus persicae, तनाव इस कीट का तनाव है कि में हमला करना तम्बाकू नहीं है की तुलना में निकोटीन के उच्च स्तर को बर्दाश्त कर सकते हैं इस सवाल का पता कैसे सेट करने के लिए प्रदर्शन करेंगे क्षेत्र.
Protocol
इस प्रयोग में, 4 वयस्क aphids एक छोटे से प्लास्टिक के कप में संलग्न हैं. वे तरल parafilm के 2 परतों कप के शीर्ष पर फैला के बीच pipetted आहार से खिलाओ. 3 दिनों के बाद खिला, निकोटीन के विभिन्न सांद्रता वाले आहार की विषाक्तता के लिए एक कप में वयस्क और लार्वा aphids की गणना के द्वारा आहार नियंत्रण की तुलना में है.
- Sucrose और 20 एमिनो एसिड युक्त समाधान करें. इस आहार पर aphids निर्वाह सामान्य स्तर पर reproducing कर सकते हैं कम से कम 1 सप्ताह के लिए. कृत्रिम आहार के लिए संलग्न फाइल देखने के लिए कृपया.
- 6 अलग Eppendorf निकोटीन युक्त ट्यूबों में इस आहार के 1 एमएल विभाज्य. निकोटीन के विभिन्न सांद्रता का इस्तेमाल करने के लिए सम्मान के साथ उन्हें लेबल, 0 500μM से लेकर.
- 4 aphids, या तो लाल या हरे रंग का चयन करें, और इन प्रयोगात्मक कप में डाल दिया.
- जब aphids का चयन, यह महत्वपूर्ण है कि वे लगातार उम्र के हो. आमतौर पर, समान आकार और रंग (लाल aphids गहरा हो जब वे बड़े हो) के aphids के लिए देखो.
- कप parafilm का एक टुकड़ा के साथ कवर. Parafilm के 2 टुकड़ों के बीच भोजन बंद करें. आंशिक रूप से कप के किनारों के आसपास दूसरे parafilm स्तर खिंचाव. विभाज्य परतों के बीच तरल आहार, और ऊपर परत के नीचे सील.
- कीट कमरे में इन कप 3 दिन, जो समय के बाद प्रयोग के लिए डाटा एकत्र किया जा सकता है के लिए एक लंबे समय दिन photoperiod में रोशनी के तहत रखें.
कृपया यात्रा संयंत्र जीवविज्ञान की वार्षिक समीक्षा के बारे में अधिक जानकारी के लिए इस प्रोटोकॉल और संयंत्र कीट herbivory के लिए प्रतिरक्षा.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
