Encyclopedia of Experiments: Biology
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Transcript
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- 在具有缓冲溶液的盘子中进行解剖,并在均匀的照明下进行解剖。将苍蝇,腹侧向上,放入菜中,并在整个过程中保持准备淹没。 在保持前体底部时,轻轻地将苍蝇头部从身体中拉开,将两者分开。大脑位于苍蝇头部的背面或侧面。因此,在解剖过程中,抓住角质层的前部或脊椎部分,以避免损害器官。
要隔离大脑,保持一只眼睛的中间边缘,抓住并拉向相反的方向,以创建一个开口进入头部胶囊。同时将皮质层放在眼睛上,从另一只眼睛抓住皮质层的中间边缘,然后慢慢将头部胶囊直接拉开以露出大脑。如有必要,继续清除残留的皮质层、附加的气囊或气管。 高质量的制剂将保留视叶、中央大脑和SOG等结构。在示例协议中,我们将看到德罗索菲拉成人脑解剖的详细演示用来研究蘑菇体。
- 要设置解剖,将麻醉的感兴趣的苍蝇放在冰冷的金属垫上或坐在冰上的培养皿中。或者,使用排放二氧化碳的飞垫。接下来,在解剖盘的中心放置少量PTN,以创建PTN的气泡。然后,在立体显微镜下,在均匀的照明下用PTN气泡填充视场。 现在,操纵苍蝇,使它们腹部向上,并转移一个腹部到PTN。将动物完全淹没在PTN中,并执行淹没在PTN中的整个解剖。 第二对钳子, 抓住前肢, 把头从身体上拉下来。
- 偶尔, 前体将被移除,但头部将保持连接到身体。如果发生这种情况, 抓住一个网膜的中间边缘, 并应用横向力去除头部。
-丢弃腹部和胸腔。在此步骤中保持头部在PTN中至关重要。使用这种方法显然无法分析从中央大脑到 VNC 的连接。接下来,抓住皮质层中孔边缘左视网膜的中间边缘,并缓慢地将钳子直接拉开以防止光瓣撕裂,视叶是白色细腻的气管覆盖的不透明结构。当视网膜分离时,张力会略有降低。
- 为了防止大脑撕裂,抓住每只眼睛的内在边缘,非常缓慢地将钳子拉开,这一点至关重要。移动过快会导致大脑形态改变或脑组织受损。
- 如图所示, 抓住每对钳子的皮质层, 非常缓慢地将它们拉向相反的方向。如果做对了, 皮质层应该从脑组织中分离出来, 保持大脑完好无损。 这一步需要非常锋利的钳子。接下来,小心地逐块去除周围的皮质层。在去除顽固附着的皮质层时,它可以通过抓住剩余的VNC来帮助保护大脑,避免压碎大脑。 最后,使用P200移液器将解剖后的大脑转移到装满PTN的盘子的井中,用于固定和免疫。