Encyclopedia of Experiments: Biology
A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
- התחל על ידי הכנת המתחם להיבדק רעילות, ולהפיץ אותו לבארות של צלחת בדיקה. להעביר תולעים של השלב ההתפתחותי המתאים לכל באר, ומיד להתחיל טיימר.
לאחר זמן קבוע מראש, לספור את מספר התולעים שעדיין בחיים בכל באר. האור הבהיר של מיקרוסקופ ניתוח או הקשה עדינה על הצלחת צריך לגרום כל תולעים חיות לזוז.
- בהדגמה זו, מתח חמצוני יהיה המושרה באמצעות paraquat. הכן פתרון paraquat טרי 100 מילימולאר כמתואר בטקסט הפרוטוקול הנלווה. Paraquat הוא תרכובת מסוכנת ורעילה מאוד, ויש לטפל בו על פי ההנחיות המתאימות.
פיפטה 40 מיקרוליטרים של פתרון paraquat לכל באר של צלחת 96-well. השתמש לפחות 12 בארות כמו שכפולים של כל מצב נבדק. באמצעות תאומת פלטינה לבחור, להעביר חמש עד שמונה L4 זחלים בעלי חיים לכל באר.
ציין את שעת ההתחלה ואת שעת הסיום עבור כל מצב שנבדק.
תולעים שאינן זזות גם לאחר איתור אור בעוצמה גבוהה נכבשות כמתות.
כדי לקבוע את אחוז ההישרדות עבור כל נקודת זמן, חשב תחילה את המספר הכולל של בעלי חיים בכל תנאי על-ידי הוספת המספר הכולל של בעלי החיים שהועברו לכל באר.
