電気スタキシスアッセイ:C.エレガンスにおける運動を観察する方法

- 感覚刺激がなければ、C.エレガンスの動きは一般的に前進し、方向転換をもたらすランダムな方向転換操縦によって中断される。C.エレガンスは電界を感電する。つまり、穏やかな直流またはDCにさらされると、ワームは負極または陰極の方向にまっすぐな中断のない経路で移動する。

ワームの移動をより正確に観察するには、動物をマイクロ流体装置に入れ、DC電界を適用します。フィールドの方向を逆にして、ワームは陰極の方向に向かって逆方向に向かいます。交流電流、ACを適用し、ワームが停止します。フィールドの方向の交互の変化がワームの神経運動システムを圧倒し、ワームの固定化を引き起こします。

次のプロトコル例では、マイクロ流体装置における電気タクシーのアッセイを示すセットアップが見られます。

- ちょうど組み立てられたマイクロチャネルを、モニタに接続されたカメラを搭載した顕微鏡のxy-可動ステージに配置することで、このステップを開始します。

マイクロチャネルの抵抗が約0.6メガオームであることを確認した後、マイクロチャネルの出力チューブを使い捨ての注射器に取り付けます。

入口と出口の両方のチューブが充填されると、 注射器を外し、チューブの相対的な高さを調整して流れを静水的に操作し、チャネルの中心にワームを配置します。

- 流れが本当にゼロかどうかわからない場合は、電界の極性を変更し、それが回るにつれてワームの線形速度を評価することによって、ワームの動きに逆転を誘発することができます。

- 電源を適切な電圧に設定してください。電気信号をアクティブにし、ワームがフィールドに順応するための1分間の事前暴露を許可します。

実験が終わったら、チャネルからすべての液体とワームを取り除き、イオン除去水でチャンバーをすすいで、デバイスを125°Cのホットプレートに残して乾燥させます。