두 광자 레이저 축 절 : 얼룩말 물고기 배아에서 축슨을 다치게하고 축축한 회복을 관찰하는 방법

- 페닐 티오레아에 관심있는 배아를 배치, PTU, 리퍼의 용액은 수정 후 24 시간에서 시작되는 안료 형성을 억제합니다. 이것은 이 절차에 필요한 해부학을 더 가시적으로 만듭니다.

사이트의 이미지 전에 가져 가라. 다음, GFP가 빨간색 형광을 일으키는 910 나노 미터 레이저와 축소를 볼 수 있습니다. 이 레이저의 강도를 증가하여 주변 조직에 영향을 미치지 않고 표적 부위를 손상시키는 이 과정은 축절제술이라고 합니다.

- 실험실에서 맞춤형 내장 2광자 범위를 사용할 수 없는 경우, Zeiss 510 공초점 2광자 현미경도 축축이를 분리하는 데 사용할 수 있습니다.

두 레이저모두 GFP를 검출하는 데 사용되지만, 두 개의 광자 방출은 빨간색으로 시각화되고 두 개의 광자 방출은 녹색으로 시각화됩니다.

아르곤 레이저를 끄고 두 개의 광자 레이저를 켜십시오. 약 9% 전송의 강도로 스캔하여 축축이 여전히 초점을 맞추고 있는지 확인합니다.

다음, 채널 탭에서, 두 광자의 강도를 약 9%에서 30%로 변경합니다.