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Summary December 23rd, 2018
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이 문서는 코어 및 바늘 생 검 도구를 사용 하 여 소 유선 생을 선물 한다. 수확된 조직 세포 배양 또는 유 방 생리학과 신진 대사 유전자 발현, 단백질 표정, 단백질 수정, immunohistochemistry, 대사 산물의 농도 등을 평가 하기 위해 사용할 수 있습니다.
Transcript
생검은, 나는 대부분의 사람들이 알다시피 생각으로, 관심있는 기관에서 조직의 비트를 제거하고이 경우, 그것은 유방 선입니다. 생검 샘플은 유전자 발현 분석과 같은 일을 하려고 하는 경우에 매우 유용합니다, 조직의 일부를 취하고 조직분석을 하는 것과 같은 일을 하려는 경우에, 유방 선의 현미경 수준에서 구조를 보고, 또한 호르몬 작용과 관련된 신호 경로 와 같은 것을 결정하는 데 매우 유용합니다, 예를 들면, 호르몬 작용에 관련있는 신호 경로 와 같은 것을 결정하는 것이 아주 유용합니다. , 그래서 당신은 유방 조직 샘플링의 어떤 종류를 할 때 주의해야주의 중 하나는, 당신은 진정으로 대표샘플을 촬영 한 것입니다? 왜냐하면, 당신은 포도의 클러스터처럼 될 것입니다 비골을 캡처 할 수 있습니다, 또는 당신은 정말 정상을 대표하지 않는 몇 가지 개별 폐포를 캡처 할 수 있습니다, 그래서, 당신이 당신의 유방 생검을 할 때 당신이 가지고있는 희망은 당신이 우유의 생산에 대한 책임 기능 조직을 말하는 단지 멋진 단어입니다, 이는 당신이 근실 조직을 수집하는 것입니다 , 대표샘플입니다.
유방 선에 있는 감각 신경 종말의 대부분은 피부와 연관됩니다, 그래서 당신이 초기 절개를 만들려고 하는 지역의 적당한 준비를 완료하면, 피부를 마취하기 위하여, 그 때 부피 조직 자체와 관련되었던 어떤 감각 신경 결말의 방법으로 아주 조금이 있다는 것을 인식하고 평가하는 것이 중요합니다 동물이 느끼는 불편함은 대부분 피부와 관련이 있습니다. 따라서 이 조직으로 할 수 있는 다양한 것들이 있으며, 동물에게 공급된 것과 우유 단백질 출력 또는 우유 성분 출력의 반응을 관찰하는 것과 비교하여 동물이 어떻게 작동하는지에 대한 자세한 정보를 실제로 수집할 수 있습니다. 설명된 모든 방법은 버지니아 기술 기관 동물 관리 및 사용 위원회에 의해 승인되었습니다.
예정된 생검 하루 전에, 세척하고 동물, 특히, 우더를 문질러 분뇨와 더러운 물질을 제거합니다. 동물의 건강, 신체 상태 및 행동을 평가합니다. 건강한 소만 사용하세요.
완전히 젖소. 동물을 짜내는 슈트로 옮기면 착유 2시간 이내에 땀샘의 우유 존재를 최소화하십시오. 머리 문으로 동물을 억제합니다.
뒤로 앞으로 이동을 방지하기 위해 소의 머리에 로프 홀터를 놓습니다. 동물의 머리를 한쪽으로 당기고 로프를 스퀴즈 슈트에 묶어 빠른 릴리즈 매듭을 사용하여 머리를 제자리에 고정시합니다. 주사 부위를 70%의 이소프로필 알코올 면봉으로 청소하고, 정맥내 체중킬로그램당 플루닉스신 메글루민 1.1~2.2밀리그램을 투여하고, 경정맥을 통해 생검 15~20분 전에 투여한다.
경정맥을 찾습니다. 경정맥의 기저에 압력을 가하여 경정맥을 올립니다. 주사기에 거품이 없는지 확인합니다.
제기 된 경정맥에 바늘을 삽입하고 주사기에 혈액 의 0.5 밀리리터를 두 번 그리고 내용과 섞는다. 주사기에 혈액이 나타나지 않으면 바늘을 재배치하십시오. 바늘이 정맥에 거주하는 경우, 내용물들을 주입한다.
바늘을 부드럽게 제거하고, 출혈을 방지하기 위해 주사 부위에 부드러운 압력으로 거즈를 바르십시오. 자일라진 염산염을 정맥내 투여, 0.01 ~ 0.05 밀리그램의 체밀 용기에서 체액 용기에 약 5~10분 전에 체액의 확립을 위한 충분한 시간을 허용한다. 꼬리를 들어 올리고 70 %의 이소 프로필 알코올 면봉으로 주사 부위를 청소하십시오.
주사기에 거품이 없는지 확인합니다. 꼬리 용기에 바늘을 삽입하고 주사기에 혈액 0.2 밀리리터를 넣고 내용과 섞어 바늘이 용기에 상주되도록 합니다. 바늘이 상주하는 경우 주사기 내용물주입합니다.
바늘을 부드럽게 제거합니다. 주사 부위에 부드러운 압력으로 거즈를 바하십시오. 그것은 정말 중요 한 두 반전을 가지고, 톨라졸린 처럼, 이것은 낙농 소자 자일라진의 효과에 민감한 때문에, 그리고 자일라진의 과다 복용 폐 부종을 일으킬 수 있습니다., 잠재적으로 젖소에 대 한 치명적일 수 있는, 그래서 과잉 세이션의 흔적에 대 한 당신의 소를 보고 하 고 이러한 발생 하는 경우, 다음 에 주어진될 수 있습니다.
우리는 소들이 시술 중에 서기를 원합니다. 자일라진이 너무 많으면 앉을 수 있습니다. 보조가 절차에 대한 꼬리를 묶어, 우더에 생검 사이트를 선택, 일반적으로 결합 조직의 수집을 최소화하고 동맥 통으로 침투를 피하기 위해 상부 영역에서.
생검 중에 이러한 혈관을 피하기 위해 큰 피하 혈관을 식별하기 위해 특별한주의를 기울여 피부를 관찰하고 눈에 띄게하십시오. 생검 부위 주변의 15-15센티미터 평방 영역에서 모발을 잘라서 포비도오드 요오드, 0.75% 사용 가능한 요오드 또는 클로르헤시딘 글루코네이트 스크럽으로 생검 부위를 준비합니다. 70%의 이소프로필 알코올을 적어도 세 번 번 하여 눈에 띄고 보이지 않는 모든 파편을 제거합니다.
무균 스크럽 솔루션과 이소프로필 알코올을 원형 운동으로 적용하여 내부 아웃 방식으로 적용합니다. 방부제 스크럽 용액이 적어도 5 분 동안 피부와 접촉하도록 하십시오. 18G 바늘로 나비 주입 세트를 사용하여 절개 부위에 2% 리도카인 염산염의 6밀리리터를 피하하여 라인 블록을 만듭니다.
더 깊은 조직에 침투하지 마십시오. 국소 마취가 3~5분 동안 확산되도록 하고, 절개 전에 스크럽 용액과 알코올의 또 다른 반복을 수행합니다. 기다리는 동안 생검 기구를 준비하십시오.
진통을 제공하는 측면에서 하고 싶은 것은 피부를 둔감하게 하는 것입니다. 우리가 피부와 피하 조직에 더 많은 신경 내면을 가지고 있기 때문에, 그리고 parenchyma에서, 우리는 실제로 단지 스트레치 수용체에 관하여 말하고 있고, 이들은 피부와 피하 조직과 같은 외과 고통을 느끼지 않습니다. 사실, 당신은 parenchyma에 국소 마취제를 넣어 결국 경우, 당신은 절차 동안 출혈의 위험을 증가시킬 수 있습니다.
생검 도구를 취급하고 절개를 위해 무균 기술을 사용합니다. 손을 씻고 눈에 보이는 오염을 모두 제거하고 멸균 수술 장갑을 바르십시오. 사용 순서대로 멸균 부위에 수술 기구를 배치합니다.
10번 메스, 멸균 거즈를 가지고 생검 기구와 항상성 멸균 수건을 조립하십시오. 절차 하나, 핵심 생검 악기. 수술 장갑을 사용하여 핵심 생검 장비를 조립합니다.
멸균 커튼에 멸균 조각 7개를 놓습니다. 블레이드를 도킹 시스템에 삽입합니다. 도킹 스테이션이 정렬되도록 2피스 위에 3피스를 삽입합니다.
블레이드의 마지막 가장자리를 4피스의 도킹 시스템에 넣습니다. 4피스를 앞으로 밀어내고 4장 옆에 3장 옆에 있는지 관찰합니다. 장치에 5피스를 삽입합니다.
도킹 스테이션이 정렬되었는지 확인합니다. 조각 2의 상단에 조각 6을 삽입합니다. 도킹 스테이션이 정렬되었는지 확인합니다.
잠금 나사를 도킹 스테이션에 삽입합니다. 잠금 나사를 덮기 위해 3피스를 앞으로 밀어넣습니다. 공구를 활성화하여 4피스를 앞으로 밀고 공구 바깥쪽의 블레이드를 관찰합니다.
블레이드를 공구로 되돌리기 위해 4개의 조각을 다시 당깁니다. 소가 충분히 진정되고 생검 부위가 충분히 마취되어 피부를 꼬집어 반응을 보장하십시오. 10번 메스를 사용하여 근해에서 탈산까지 피부와 피하 조직을 통해 2~3센티미터 의 수직 절개를 합니다.
멸균 기술을 사용하여 무성 드릴에 생검 악기를 부착하십시오. 생검 도구에 대한 드릴을 놓고 도구가 드릴에 단단히 부착되어 있는지 확인합니다. 모든 절차 동안 개인이 꼬리를 상승시킴으로써 적절한 구속을 보장하십시오.
시계 방향 회전과 저속을 사용하여 드릴을 켭니다. 공구가 회전하는 동안 절개를 통해 약 7.5 센티미터의 전체 생검 도구를 우더로 진행합니다. 드릴을 끄고 공구 의 4조각을 수동으로 확장하고, 시계 방향 회전과 저속을 사용하여 드릴을 켜고, udder에서 티슈 코어를 포함하는 계측기를 제거합니다.
적어도 20 분 동안 멸균 수건을 사용하여 상처에 즉시 강한 압력을 가하십시오. 조직에 캐뉼라를 삽입합니다. 도구를 활성화하기 위해 조각을 앞으로 밀어 넣습니다.
느린 시계 방향으로 회전합니다. 조직 샘플은 이제 캐뉼라 내부에 있습니다. 핀셋을 사용하여 생검 도구에서 조직을 제거합니다.
1개의 X 인산염 완충식식에 견본을 유지하고 조직의 양을 평가합니다. 생검 후 10분마다 암소의 활력 징후를 최소 30분 동안 복용하십시오. 생검 부위에 20분 동안 압력을 가한 후 출혈을 확인하십시오.
혈액의 물방울이있는 경우, 추가 5 ~ 10 분 동안 압력을 적용계속. 모든 출혈이 중지 된 후 5 밀리미터 간격으로 스테인레스 스틸 스테이플을 사용하여 절개를 닫습니다. 생검 부위에 에어로졸 붕대를 적용합니다.
수술 후 50 분 동안 동물을 관찰하십시오. 절차 2, 바늘 생검 악기. 장치에 대한 제조업체의 지침을 따릅니다.
멸균 기술을 사용하여 패키지에서 생검 바늘을 제거합니다. 손상이 관찰되면 바늘을 버리십시오. 장치에 바늘을 부착합니다.
덮개를 닫고 장치를 수탉. 소가 충분히 진정되고 생검 부위가 충분히 마취되어 피부를 꼬집어 반응을 보장하십시오. 10번 메스를 사용하여 근해에서 탈산까지 피부와 피하 조직을 통해 1~2센티미터 의 수직 절개를 합니다.
생검 바늘을 절개 부위에 삽입하여 피부에서 약 10~13cm 정도 삽입합니다. 생검 바늘 장치를 활성화하여 조직을 수집합니다. 젖꼭지에서 바늘을 제거합니다.
적어도 20 분 동안 멸균 수건을 사용하여 상처에 즉각적인 강한 압력을 가하십시오. 바늘에서 조직을 제거 한 후, 절개를 닫기 위해 이전에 설명 된 절차를 따르십시오. 전체 절차는 동물 당 완료하는 데 약 45 분이 걸립니다.
혈전은 생검분기에서 제거될 필요가 있습니다. 또한 가능하면 우유 수율과 음식 섭취량을 관찰해야합니다. 항상 수술 전, 도중, 그리고 수술 후에 동물의 건강과 웰빙을 보장하십시오.
동물에게 투여되는 모든 약물을 문서화합니다. 생검 후 7~10일 동안 우유에 혈액이 있는지 확인하십시오. 후속 착유에서 생검 분기에서 손으로 혈전을 제거하고 완전한 우유 제거가 발생하는지 확인합니다.
우유 수율을 관찰하고 가능하면 수술 용 스테이플이 제거 될 때까지 개별 일일 사료 섭취량을 관찰하십시오. 수술용 스테이플이 제거될 때까지 하루에 두 번 동물을 체온, 호흡 및 심박수 및 태도에 대해 모니터링합니다. 수술 스테이플이 제거 될 때까지 비종, 부드러움 및 배수의 흔적에 대한 생검 부위를 매일 두 번 확인하십시오.
이러한 관찰이 관찰되는 경우 수의사와 상의하십시오. 절개 부위에서 스테이플을 제거 10 받는 일 후 생검 후, 치유 속도에 따라. 현지 또는 전신 감염의 징후가 관찰되는 경우 수의사와 상의하십시오.
그래서, 생검을 복용 하 자마자, 혈액을 중단 하 고 따라서 그 조직에 영양분과 산소 공급, 그래서 만약 당신이 그 조직 코어를 제거에 매우 신속 하지 않습니다., 그리고 어떻게 든 조직 활동을 중지, 실험실에서 시간에 나중에 측정할 수 있습니다 농도 진정으로 생체 공학의 시간에 그 동물에서 무슨 일이 있었는지의 반영 되지 않을 수 있습니다. 전형적으로, 우리는 조직을 급속하게 제거하고, 그 활동을 보존하기 위하여 액체 질소로 그것을 동결하는 것을 플래시할 것입니다. 하나는 그 조직으로 할 수있는 또 다른 일, 이것은 실제로 우리가 수집 한 조직으로 했던 일, 하나는 분리하고 배양 시스템에서 그 조직에 존재하는 세포를 성장할 수 있었다.
우리의 경우에, 우리는 그 조직 안에 있는 상피 세포에 관심이 있습니다, 그 실제로 합성 하 고 우유 구성 요소를 분 비 하는 세포 때문에, 그래서, 그 조직 조각에서 그 세포 배양에 배치 되었다, 그리고 실제로, 그들은 여전히 오늘 성장 하 고. 동물은 시술 후 10 일 동안 하루에 두 번 관찰되었습니다. 수술 기간 이나 수술 후 기간에 합병증이 발생하지 않았으며, 암소의 중요한 매개 변수는 정상 한계 내에 남아 있습니다.
선형 모델은 생검 10 일 전에 동물이 하루에 23.35 킬로그램의 우유를 생산한다는 것을 보여줍니다. 동물은 생검 후 10 일 전부터 10 일 동안 우유 수확량에 상당한 변화를 보이지 않았습니다. 소 유방 선생검은 동물이 짧은 복구 시간을 가질 수 있도록, 최소 침습 절차입니다.
따라서, 이 생검 절차는 우리가 동물에 반복적인 측정을 사용할 수 있는 많은 영양 예심 및 그밖 모형예에서 이용될 수 있습니다, 그래서, 예를 들면, 우리가 4개의 다른 영양 처리를 가진 4개의 기간이 있는 경우에, 우리는 쉽게 각 기간의 끝에 이 소 4개의 다른 시간을 생검할 수 있었습니다, 각 기간 사이 아마 1 주일 휴식 시간을 허용합니다 동물이 정상 생산으로 돌아갈 수 있도록 합니다.
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