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Marquage de proximité basé sur AirID pour l’interaction protéine-protéine chez les plantes
 
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Marquage de proximité basé sur AirID pour l’interaction protéine-protéine chez les plantes

Article DOI: 10.3791/64428-v 08:36 min September 16th, 2022
September 16th, 2022

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Nous présentons ici un protocole étape par étape pour réaliser l’expérience de marquage de proximité (PL) chez le concombre (Cucumis sativus L.) en utilisant la protéine AT4G18020 (APRR2)-AirID comme modèle. La méthode décrit la construction d’un vecteur, la transformation d’une construction par agroinfiltration, l’infiltration de biotine, l’extraction de protéines et la purification de protéines marquées à la biotine par une technique de purification par affinité.

Tags

AirID Étiquetage de proximité Interaction protéine-protéine Approches PL Ascorbate peroxydase modifiée APEX Escherichia coli Biotine Ligase BirA BioID TurboID Restrictions Nouvelle version Systèmes végétaux Protéine AT4G18020 (APRR2) Protocole étape par étape Construction vectorielle Agroinfiltration Transformation de la biotine Extraction de protéines Technique de purification d’affinité Analyse des IPP dans les plantes
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