The Journal of Visualized Experiments (JoVE) is a peer reviewed, PubMed-indexed video journal. Our mission is to increase the productivity of scientific research.
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Children's Hospital, Harvard Stem Cell Institute, Harvard Medical School
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LeBlanc, J., Venezia Bowman, T., Zon, L. Transplantation of Whole Kidney Marrow in Adult Zebrafish. J. Vis. Exp. (2), e159, doi:10.3791/159 (2007).
Hematopoietic स्टेम सेल HSC () pluripotent कोशिकाओं है कि एक जीव की जीवन भर सभी विभेदित रक्त प्रजातियों को बनाए रखने की एक दुर्लभ आबादी हैं. HSC के कार्यात्मक परिभाषा एक प्रतिरोपित सेल है कि एक विकिरणित प्राप्तकर्ता लंबी अवधि के सभी रक्त प्रजातियों पुनर्गठन करने की क्षमता है है. इस पदनाम स्तनधारी प्रणाली में मौलिक काम के दशकों द्वारा स्थापित किया गया था. Hematopoietic सेल प्रत्यारोपण (HCT) और माउस में रिवर्स आनुवंशिक जोड़तोड़ का प्रयोग, HSC जीव विज्ञान के अंतर्निहित नियामक कारकों को अनावरण किया शुरुआत कर रहे हैं, लेकिन अभी भी काफी हद तक के तहत पता लगाया. हाल ही में, zebrafish एक शक्तिशाली आनुवंशिक हड्डीवाला hematopoiesis अध्ययन के मॉडल के रूप में उभरा है. Zebrafish में HCT की स्थापना के वैज्ञानिकों ने बड़े पैमाने पर आनुवंशिक और रासायनिक स्क्रीनिंग zebrafish में उपलब्ध उपन्यास HSC विनियमन अंतर्निहित तंत्र प्रकट तरीके का उपयोग करने के लिए अनुमति देगा. इस अनुच्छेद में, हम एक वयस्क zebrafish में HCT प्रदर्शन विधि प्रदर्शित करता है. हम विच्छेदन और zebrafish पूरे गुर्दे मज्जा की तैयारी, zebrafish में वयस्क hematopoiesis की साइट, और intracardiac इंजेक्शन के माध्यम से विकिरणित प्राप्तकर्ता मछली के संचलन में इन दाता कोशिकाओं की शुरूआत दिखाते हैं. इसके अतिरिक्त, हम एक "आईसीयू" में मछली की देखभाल के बाद प्रत्यारोपण का वर्णन करने के लिए अपने दीर्घकालिक स्वास्थ्य में वृद्धि. सामान्य, मछली के कोमल देखभाल में पहले, दौरान और बाद प्रत्यारोपण के लिए मछली की संख्या है कि एक से अधिक महीने के लिए निम्न कार्यविधि का है, जो लंबी अवधि के मूल्यांकन (<3 महीने) engraftment लिए आवश्यक है बच जाएगा में वृद्धि करने के लिए महत्वपूर्ण है. प्रयोगात्मक इस प्रोटोकॉल स्थापित करने के लिए इस्तेमाल किया डेटा कहीं प्रकाशित किया जाएगा. इस प्रोटोकॉल की स्थापना बड़े पैमाने पर zebrafish आनुवंशिकी और प्रत्यारोपण के जीव विज्ञान के विलय के लिए अनुमति देगा.
किरणन
गुर्दा विच्छेदन
परिधीय रक्त निष्कर्षण
इंजेक्शन
मछली आईसीयू के बाद इंजेक्शन
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