The Journal of Visualized Experiments (JoVE) is a peer reviewed, PubMed-indexed video journal. Our mission is to increase the productivity of scientific research.
This article is a part of JoVE General. If you think this article would be useful for your research, please recommend JoVE to your institution's librarian.
You do not have access to any JoVE content through your current IP address.
IP: 107.22.156.205, User IP: 107.22.156.205, User IP Hex: 1796644045
Current Access Through Your Registered Email Address
You aren't signed into JoVE. If your institution subscribes to JoVE, please sign in or create an account with your institutional email address to access this content.
The JoVE video player is compatible with HTML5 and Adobe Flash. Older browsers that do not support HTML5 and the H.264 video codec will still use a Flash-based video player. We recommend downloading the newest version of Flash here, but we support all versions 10 and above.
Unable to load video. Please check your Internet connection and reload this page. If the problem continues, please let us know and we'll try to help.
An unexpected error occurred. Please check your Internet connection and reload this page. If the problem continues, please let us know and we'll try to help.
Video Article Chapters
Aseptische technieken worden gebruikt in deze procedure.
Longziekte is een belangrijke oorzaak van dood en waarschijnlijk een epidemie gegeven toename van de vervuiling en roken de hele wereld. Vooruitgang in de stamceltherapie kan verlichten veel van de symptomen geassocieerd met long-en vaatziekten en veroorzaken alveolaire reparatie bij volwassenen. Gelijktijdig met de voortdurende zoektocht naar stamcellen van toepassing zijn voor menselijke behandeling, moet nauwkeurige levering en homing (op de site van ziekte) worden gerustgesteld voor een succesvolle therapie. Hier, ik melden dat stamcellen veilig kan worden ingeprent via de luchtpijp het openen van een non-stop op weg naar de longen. Deze methode houdt in een huid incisie, caudaal inbrengen van een canule in en langs de tracheale lumen, en de injectie van een stamcel voertuig mengsel in luchtwegen van de longen. Een breed scala van media-oplossingen en stabilisatoren kunnen worden ingeprent via tracheotomie, waardoor de mogelijkheid om een breder scala aan celtypen te leveren. Met de alveolaire epitheel beperken deze cellen aan het lumen, kan longschade uitbreiding en negatieve druk tijdens het inhaleren ook helpen bij het stamcel-integratie. Tracheale aflevering van stamcellen, met een snelle opname en de mogelijkheid om een breed scala aan behandelingen te behandelen, kan versnellen de ontwikkeling van cel-gebaseerde therapieën, het openen van nieuwe wegen voor de behandeling van longziekte.
Operationele platform met tape en hechtdraad draad
1cc spuit
23G naald
Verdoving: Avertin 25 mg / ml (als alternatief ketamine 9 mg / ml en xylazin 1 mg / ml)
Tondeuse met # 40 blade
Steriele handschoenen
Alcoholdoekjes
Jodium
Gesteriliseerd chirurgische instrumenten
Suture draad
22G catheter
200 ul pipet (steriele)
Gesteriliseerd pipettips
Antibiotische zalf lijm
Sharpie container
In werking
Aseptische technieken worden gebruikt in deze procedure.
Weeg muis.
Intraperitoneale injectie van anesthesie (250 mg / kg Avertin of als alternatief ketamine 90 mg / kg en xylazine 10 mg / kg) bij doses voldoende zijn om spontane ademhaling toe te staan, maar chirurgische anesthesie-concentratie te bieden. Voor een operatie te beginnen de teen knijpen werd gebruikt als een indicator van diepe pijn met geen reactie van het verdoofde dier.
Leg muis met snijtanden verscholen in hechtdraad draad en tape de staart te stabiliseren.
Clip haar met een # 40 klipper mes.
Verandering handschoenen (ga verder met steriele handschoenen).
Desinfecteer twee keer met alcohol voorafgaand aan de huid incisie.
Steriliseren gebied met een iodophore.
Met behulp van steriele instrumenten maken een kleine incisie (<1 cm) parallel aan de luchtpijp.
Voorzichtig los weefsel van kraakbeen.
Een gelijkspel is geplaatst onder de luchtpijp.
Voorzichtig omhoog te trekken stropdas en steek naald in de luchtpijp worden blootgesteld.
Verwijder de naald en soepel plaats de buis, maar toch snel, totdat het gevoel lichte weerstand.
Pipet cellen (tot 50 microliter volume) direct in de katheter.
Onmiddellijk te verwijderen buis en stropdas, terwijl de bevrijding van de muis uit operationele apparatuur.
Indien nodig voorzichtig rechtop Houd de muis (verticaal) op zich vastklampen zijn voorste poten en bewegen zachtjes.
Sluit de wond met een hechting of antibiotica lijm.
Post-operatieve
Houd de muis warm.
Buprenorfine (0,05 mg / kg) moet worden gegeven als post-operatieve analgesie elke 12 uur gedurende de eerste 24 uur na deze procedure.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
I appreciate the elegant work, the suture idea of stabilizing the head of the animal and post-incision glue are fantastic ideas.
Murat Kaynar, MD
University of Pittsburgh, School of Medicine
You must be signed in to post a comment. Please sign in or create an account.
I am concerned that the anaesthesia was not done properly. Some anaesthetics do cause sporadic twitching, but in this case the mouse reacted immediately to the incision and the blunt dissection under the trachea. I suggest that any live animal experiments published as model procedures be reviewed by an experienced laboratory animal veterinarian before posting.
Susan Schwab, PhD
University of California, San Francisco
You must be signed in to post a comment. Please sign in or create an account.
I agree with the previous comments about the anesthesia. This is one of the first videos I have watched on JOVE and I think the idea of video journalling is great, but there seems to be potentially dangerous animal care issues for the journal and authors since the use of animals is plainly visible as opposed to written descriptions...
Also this technique should really be performed through intubation with no surgery.
Murat Kaynar, MD
University of Pittsburgh, School of Medicine
1
ReplyPosted by: AnonymousMarch 7, 2007, 9:43 AM