JoVE   
You do not have subscription access to articles in this section. Learn more about access.

  JoVE Biology

  
You do not have subscription access to articles in this section. Learn more about access.

  JoVE Neuroscience

  
You do not have subscription access to articles in this section. Learn more about access.

  JoVE Immunology and Infection

  
You do not have subscription access to articles in this section. Learn more about access.

  JoVE Clinical and Translational Medicine

  
You do not have subscription access to articles in this section. Learn more about access.

  JoVE Bioengineering

  
You do not have subscription access to articles in this section. Learn more about access.

  JoVE Applied Physics

  
You do not have subscription access to articles in this section. Learn more about access.

  JoVE Chemistry

  
You do not have subscription access to articles in this section. Learn more about access.

  JoVE Behavior

  
You do not have subscription access to articles in this section. Learn more about access.

  JoVE Environment

|   

JoVE Science Education

General Laboratory Techniques

You do not have subscription access to videos in this collection. Learn more about access.

Basic Methods in Cellular and Molecular Biology

You do not have subscription access to videos in this collection. Learn more about access.

Model Organisms I

You do not have subscription access to videos in this collection. Learn more about access.

Model Organisms II

You do not have subscription access to videos in this collection. Learn more about access.

Essentials of
Neuroscience

You do not have subscription access to videos in this collection. Learn more about access.

Automatic Translation

This translation into Hebrew was automatically generated through Google Translate.
English Version | Other Languages

 JoVE Biology

Micro-דיסקציה של מוח החולדה עבור הפקת RNA או חלבון מן אזור מסוים במוח

1, 1, 1, 1, 1

1Laboratory of Neurodegenerative Diseases, Department of Anatomy, LKS Faculty of Medicine, The University of Hong Kong - HKU

Article
    Downloads Comments Metrics

    You must be subscribed to JoVE to access this content.

    This article is a part of   JoVE Biology. If you think this article would be useful for your research, please recommend JoVE to your institution's librarian.

    Recommend JoVE to Your Librarian

    Current Access Through Your IP Address

    You do not have access to any JoVE content through your current IP address.

    IP: 54.237.184.242, User IP: 54.237.184.242, User IP Hex: 921549042

    Current Access Through Your Registered Email Address

    You aren't signed into JoVE. If your institution subscribes to JoVE, please or create an account with your institutional email address to access this content.

     

    Summary

    Micro-לנתיחה במוח חולדה לתוך אזורים שונים מאוד חשוב לחקר מחלות ניווניות שונות. וידאו זה מדגים דיסקציה מיקרו ארבעה אזורים במוח העיקריים כוללים נורת חוש הריח, הקורטקס פרונטלי, היפוקמפוס ו בסטריאטום ברקמת מוח החולדה טרי. עצות שימושיות עבור סילוק מהיר של האזורים השונים, כדי למנוע פירוק חלבונים ו-RNA של הרקמה מקבלים.

    Date Published: 8/30/2007, Issue 7; doi: 10.3791/269

    Cite this Article

    Chiu, K., Lau, W. M., Lau, H. T., So, K., Chang, R. C. Micro-dissection of Rat Brain for RNA or Protein Extraction from Specific Brain Region. J. Vis. Exp. (7), e269, doi:10.3791/269 (2007).

    Abstract

    Micro-לנתיחה במוח חולדה לתוך אזורים שונים מאוד חשוב לחקר מחלות ניווניות שונות. וידאו זה מדגים דיסקציה מיקרו ארבעה אזורים במוח העיקריים כוללים נורת חוש הריח, הקורטקס פרונטלי, היפוקמפוס ו בסטריאטום ברקמת מוח החולדה טרי. עצות שימושיות עבור סילוק מהיר של האזורים השונים, כדי למנוע פירוק חלבונים ו-RNA של הרקמה מקבלים.

    Protocol

    שלב 1

    הקורבן חולדה על פי פרוטוקולים הוקמה. הסר את המוח מהגולגולת ולשטוף אותו קרח קר DEPC טיפול במים מילי Q כדי להסיר כל משטח דם.

    שלב 2

    מניחים על צלחת מתכת קר. חותכים את המוח דו וחצי לתוך הכדור ימינה ושמאלה.

    269_Figure-01

    באיור 1. עמדות חיתוך מהעין המדיאלי של האונה עכברוש

    שלב 3

    אסוף את הנורה חוש הריח מיד לאחר לחתוך הראשונה. פלאש להקפיא את הדגימה בחנקן נוזלי חנות ב -80 ° C.

    269_Figure-02

    איור 2. הנורה חוש הריח לנתיחה

    שלב 4

    איסוף קליפת המוח הקדמית הימנית לאחר לחתוך את השני, באמצעות להב מס '5 דומון מלקחיים. פלאש להקפיא את הדגימה בחנקן נוזלי חנות ב -80 ° C.

    269_Figure-03

    איור 3. דיסקציה הקורטקס פרונטלי

    שלב 5

    אסוף את הסטריאטום (גרעין caudate) מיד לאחר לחתוך השלישית בעזרת שני מלקחיים דומון No.5. פלאש להקפיא את הדגימה בחנקן נוזלי חנות ב -80 ° C.

    269_Figure-04

    איור 4. הסטריאטום (caudate גרעין) דיסקציה

    שלב 6

    כדי לאסוף את ההיפוקמפוס, לשים בצד הגחוני של המוח ולאחר מכן להסיר את המוח התיכון לחשוף את ההיפוקמפוס. מנתחים את ההיפוקמפוס מהקורטקס באמצעות שני דומון מלקחיים No.5. פלאש להקפיא את הדגימה בחנקן נוזלי חנות ב -80 ° C.

    269_Figure-05

    איור 5. ההיפוקמפוס לנתיחה

    Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

    Discussion

    אזורי מוח שונים לקשר עם מחלות ניווניות שונות. לדוגמה, קליפת המוח הקדמית ואת בסטריאטום קשורות עם מחלת פרקינסון בזמן של ההיפוקמפוס קשור עם מחלת אלצהיימר. דיסקציה מיקרו מדויק של המוח מאפשר לנו לזהות את ה-mRNA וחלבון שינויים באזור הפגוע באופן מדויק יותר.

    Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

    Disclosures

    החיות טופלו לפי פרוטוקול לשימוש בבעלי חיים במחקר שאושר על ידי הוועדה על השימוש בבעלי חיים בהוראה ומחקר (CULATR) באוניברסיטת הונג קונג על פי המכון הלאומי לבריאות הנחיות לשימוש בבעלי חיים.

    Materials

    Name Company Catalog Number Comments
    Microscope Olympus Corporation
    Dissection tools Metal plate, forceps, blade, etc. Individually wrapped with aluminum foil and heated at 180oC for eight hours to eliminate RNase. Made ice cold before use.

    References

    1. Palkovits, M., 1998. Maps and guide to micro-dissection of the rat brain. New York: Elsevier, c.1988.

    2. Swanson, L.W., 2004. Brain maps: structure of the rat brain. 3rd revised edition. Elsevier Academic Press.

    Comments

    9 Comments

    thank u very much. good protocol
    Reply

    Posted by: AnonymousJanuary 8, 2009, 4:37 AM

    very nice and great
    Reply

    Posted by: AnonymousFebruary 11, 2009, 1:27 PM

    Approximately how much time/rat from sacrifice to remove the frontal cortex and the hippocampus?  Thank you.
    Reply

    Posted by: AnonymousFebruary 16, 2009, 10:59 AM

    Hi, can be done within 3 minutes. When you practice more, ² minutes will be enough.
    Reply

    Posted by: kin c.March 28, 2012, 9:28 PM

    Great, Thanks for your sharing̀²; maybe it's better to have more brain regions to dissect  
    Reply

    Posted by: AnonymousApril 1, 2009, 8:47 AM

    How dŒs this protocol change if we were to attempting to dissect the striatum of embryonic rats or mice for culture?
    Reply

    Posted by: AnonymousJuly 14, 2010, 1:59 PM

    Yeah nicely done. Although I am using mice this seems to work just fine for me as well.
    Reply

    Posted by: AnonymousMarch 28, 2012, 6:23 AM

    Thanks. I think this is just a demostration that we can dissect the brain into regions. When we deal with different parts, normally we go back to the atlas first (you can use the atlas listed in the reference). Then we try to identify the region in the brain samples.
    Reply

    Posted by: kin c.March 28, 2012, 9:26 PM

    Thanks. If we want to isolate some specific nuclei from brain to study them under microscope how we must do that?
    Reply

    Posted by: Jamal E.May 8, 2012, 2:10 PM

    Post a Question / Comment / Request

    You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

    Metrics

    Waiting
    simple hit counter