Abstract
PTMScan ®从细胞信号转导技术委员会(科技)技术结合专有的抗体为基础的肽浓缩的方法用液相色谱 - 串联质谱(LC-MS/MS)定量简介翻译后修饰,如磷酸化(PTMS)(PhosphoScan ®) (UbiScan ®),泛素化和乙酰化(AcetylScan ®)。
PTMScan ®技术采用科技委™Motif的抗体分开预定义组的翻译后修饰肽在消化细胞提取物未修改的肽。这种免疫净化技术结合的LC-MS/MS确定和量化改性肽的丰度的变化。 Motif的抗体特异性结合(酪氨酸,丝氨酸,苏氨酸)的磷酸化肽,乙酰肽,或泛素标记肽,使细胞的磷酸化,乙酰化,泛素化状态的定量分析。
MAPK,mTOR和PI3K/Akt信号通路关键的信号通路的激活下游致癌受体酪氨酸激酶(RTK的)。所有这些通路的激活AGC激酶家族成员,包括AKT,RSK的,和P70中六激酶,其蛋白磷酸化底物的RxRxxS / T图案。
假定这些AGC家族激酶基板超过300 phosphoproteomic由科学家们在科技委(Sci.信号(2010)24 3(136):ra64)创作在最近的研究,确定了三个细胞系,无论是表皮生长因子受体驱动, c - Met的,或PDGFR。聘用PhosphoScan ®技术使用RxRxxS / T Motif的抗体亲和试剂的选择性免疫沉淀,使Akt,RSK的P70中六激酶的磷酸化底物的实验方法。这些RTK的信令网下游的映射允许特定的PI3K,mTOR的,和MEK抑制剂的使用有针对性的治疗癌症的药物。基板包括参与许多细胞功能的蛋白质,包括棚架,蛋白质的稳定性,代谢,贩运和活力。