Abstract
Hücre Sinyal Teknolojisi (CST) PTMScan ® Teknolojisi kantitatif gibi fosforilasyon gibi post-translasyonel modifikasyonlar (PTMS) (PhosphoScan ®) Profil sıvı kromatografi-tandem kütle spektrometresi (LC-MS/MS) ile antikor bazlı peptid zenginleştirme için özel yöntemler birleştirir ubikuitinasyon (UbiScan ®) ve asetilasyon (AcetylScan ®).
PTMScan ® Teknolojisi CST istihdam ™ Motif Antikorlar sindirilir hücre özleri değiştirilmemiş peptidler sonrası translationally değiştirilmiş peptidler önceden tanımlanmış gruplara ayırmak için. Bu immünoafinite arıtma tekniği modifiye peptid bolluk içinde değişiklikleri belirlemek ve ölçmek için LC-MS/MS ile kombine edilmiştir. Motif antikorlar hücrenin fosforilasyon, asetilasyon, ya da ubikuitinasyon durumunun kantitatif bir profil sağlayan, özellikle fosfor (Tyr, Ser, Pr)-peptidler, asetillenmiş peptidler, veya ubikuitin etiketli peptidler bağlamak için mevcuttur.
MAPK, mTOR ve PI3K/Akt yollar anahtar sinyalizasyon downstream onkojenik tirozin kinaz (RTKs) aktive yollardır. Bütün bu yolların AGC kinaz protein substratlar RxRxxS / T motifi fosforile Akt, RSK ve p70 S6 kinazlar da dahil olmak üzere aile üyeleri, etkinleştirin.
300'ü aşkın bilim adamları CST (Sci. Sinyal (2010) 24, 3 (136): ra64) tarafından hazırlanan, son phosphoproteomic çalışmada, bu AGC aile kinazlar için varsayılan substratlar, her biri, her iki EGFR tarafından yönlendirilen üç hücre hatları belirlendi c-Met, ya da DPBFR. Deneysel bir yaklaşım PhosphoScan ® Teknolojisi Akt, RSK ve p70 S6 kinazlar fosforile substratlar seçici immunoprecipitate için bir yakınlık reaktif olarak RxRxxS / T Motif Antikor kullanarak çalışmaktadır. Bu RTKs sinyalizasyon ağı downstream haritalama için izin verilen özel PI3K, mTOR ve MEK inhibitörleri ile hedeflenen kanser ilaçları kullanın. Substratlar, iskele, protein istikrar, metabolizma, insan kaçakçılığı ve hareketliliğinde de dahil olmak üzere pek çok hücresel fonksiyonları yer proteinler, dahildir.
