للبدء، اجمع لوحات الاستزراع المخصصة لك ثم قم بإزالة البارافيلم والغطاء من إحداها.
ضع اللوحة المكشوفة تحت مجهر تشريح ثم راقب المجتمعات الفردية داخل كل ربع من اللوحة.
ثم كرر الملاحظات لكل نوع من النوعين البكتيريين الآخرين.
لإجراء تلطيخ الجرام لأنواعك البكتيرية الثلاثة ، قم أولا بتسمية نهايات ثلاث شرائح مجهرية بالأحرف الأولى من كل نوع من أنواع البكتيريا والأحرف الأولى من اسمك والتاريخ. الفرضيات: في هذه التجربة ، قد تكون الفرضية التجريبية هي أنه من الممكن توضيح أنواع وأشكال بكتيرية مختلفة باستخدام تلطيخ الجرام ، وأن البكتيريا موجبة الجرام ستلطخ اللون الأرجواني بالبنفسجي البلوري بينما ستظهر البكتيريا سالبة الجرام باللون الوردي بسبب صبغة السافرانين. قد تكون الفرضية الصفرية هي أن جميع أنواع البكتيريا ستحتفظ بكلتا البقعتين على قدم المساواة ، ولن يساعد التلوين في توضيح أنواعها أو شكلها.
لبدء البقعة الأولى ، قم بإرفاق مقطع بالشريحة لسهولة التعامل معها. لكل مسحة بكتيرية ، تذكر التأكد من استخدام حلقة تلقيح نظيفة ومعقمة باللهب.
ضع حلقتين من الماء المقطر المعقم في وسط الشريحة.
بعد تعقيم الحلقة مرة أخرى ، قم بتبريد الحلقة عن طريق لمس جزء غير ملقح من الأجار عدة مرات.
بعد ذلك ، قم بإزالة كمية صغيرة من الثقافة من مستعمرة معزولة واخلطها مع الماء الموجود على الشريحة.
اترك الشريحة تجف في درجة حرارة الغرفة وقم بإصلاح اللطاخة بالحرارة عن طريق تمريرها بسرعة عبر اللهب.
بمجرد أن تجف ، ضع الماصة عدة قطرات من البنفسج الكريستالي على الشريحة واتركها لمدة دقيقتين إلى ثلاث دقائق.
اشطف الشريحة بعناية بالماء المقطر عن طريق توجيه التدفق المباشر نحو الجزء العلوي من الشريحة، مما يسمح للماء بالتدفق برفق لأسفل. لا توجه تدفق المياه مباشرة إلى اللطاخة.
بعد ذلك ، قم بتغطية الشريحة باليود غرام ، واتركها تجلس مرة أخرى لمدة دقيقتين ، ثم اشطفها برفق بالماء المقطر.
قم بإزالة لون الشريحة بنسبة 95٪ من الإيثانول حتى تختفي البقعة.
على الفور ، اشطف الشريحة بالماء المقطر. سيؤدي ذلك إلى الحد من الإفراط في إزالة اللون.
ثم أضيفي عدة قطرات من سافرانين ونتركه لمدة 30 ثانية. سيؤدي ذلك إلى تلطيخ أي خلايا سالبة الجرام موجودة.
اشطف الشريحة برفق بالماء المقطر وجففها بورق ماص.
بعد تلطيخ الشريحتين الأخريين بنفس الطريقة (الخطوات 6-17) ، راقب كل منهما بالمجهر.
استخدم هدفا منخفض الطاقة أولا لإجراء تعديلات خشنة. عندما تجد قسما مثاليا ، انتقل إلى التكبيرات الأعلى.
بعد مزيد من التصوير وضبط اللطاخة بهدف طاقة متوسطة ، أضف زيت الغمر مباشرة إلى اللطاخة. ملاحظة: الزيت ضروري لأهداف الطاقة العالية التي ستوفر أفضل الصور المجهرية.
الآن ، استخدم أقلام الرصاص الملونة لرسم البكتيريا المرصودة في دوائر التكبير المناسبة وملء الخصائص المرصودة في العمود المناسب ، مع ملاحظة شكل البكتيريا وما إذا كانت موجبة الجرام ، أو تم تحديدها من خلال تلطيخ أرجواني داكن ، أو سالبة الجرام ، المحددة بالتلوين الوردي.
انقر هنا لتنزيل الجدول 2
أخيرا ، كرر الملاحظة والرسم والتوصيف للشريحتين البكتيريتين الملطختين الأخريين.