التنوع الميكروبي والفطري

المفاهيمتحضير المدرّسبروتوكول الطالب
0 مشاهدة05:06 دقيقة
Print Procedure Steps
  1. فحص هياكل المستعمرات الميكروبية
    • للبدء، اجمع لوحات الاستزراع المخصصة لك ثم قم بإزالة البارافيلم والغطاء من إحداها.
    • ضع اللوحة المكشوفة تحت مجهر تشريح ثم راقب المجتمعات الفردية داخل كل ربع من اللوحة.
    • عند تحديد المستعمرات ، املأ خصائص المستعمرة المرصودة في العمود المناسب في الجدول. انقر هنا لتنزيل الجدول 1
    • ثم كرر الملاحظات لكل نوع من النوعين البكتيريين الآخرين.
    • لإجراء تلطيخ الجرام لأنواعك البكتيرية الثلاثة ، قم أولا بتسمية نهايات ثلاث شرائح مجهرية بالأحرف الأولى من كل نوع من أنواع البكتيريا والأحرف الأولى من اسمك والتاريخ. الفرضيات: في هذه التجربة ، قد تكون الفرضية التجريبية هي أنه من الممكن توضيح أنواع وأشكال بكتيرية مختلفة باستخدام تلطيخ الجرام ، وأن البكتيريا موجبة الجرام ستلطخ اللون الأرجواني بالبنفسجي البلوري بينما ستظهر البكتيريا سالبة الجرام باللون الوردي بسبب صبغة السافرانين. قد تكون الفرضية الصفرية هي أن جميع أنواع البكتيريا ستحتفظ بكلتا البقعتين على قدم المساواة ، ولن يساعد التلوين في توضيح أنواعها أو شكلها.
    • لبدء البقعة الأولى ، قم بإرفاق مقطع بالشريحة لسهولة التعامل معها. لكل مسحة بكتيرية ، تذكر التأكد من استخدام حلقة تلقيح نظيفة ومعقمة باللهب.
    • ضع حلقتين من الماء المقطر المعقم في وسط الشريحة.
    • بعد تعقيم الحلقة مرة أخرى ، قم بتبريد الحلقة عن طريق لمس جزء غير ملقح من الأجار عدة مرات.
    • بعد ذلك ، قم بإزالة كمية صغيرة من الثقافة من مستعمرة معزولة واخلطها مع الماء الموجود على الشريحة.
    • اترك الشريحة تجف في درجة حرارة الغرفة وقم بإصلاح اللطاخة بالحرارة عن طريق تمريرها بسرعة عبر اللهب.
    • بمجرد أن تجف ، ضع الماصة عدة قطرات من البنفسج الكريستالي على الشريحة واتركها لمدة دقيقتين إلى ثلاث دقائق.
    • اشطف الشريحة بعناية بالماء المقطر عن طريق توجيه التدفق المباشر نحو الجزء العلوي من الشريحة، مما يسمح للماء بالتدفق برفق لأسفل. لا توجه تدفق المياه مباشرة إلى اللطاخة.
    • بعد ذلك ، قم بتغطية الشريحة باليود غرام ، واتركها تجلس مرة أخرى لمدة دقيقتين ، ثم اشطفها برفق بالماء المقطر.
    • قم بإزالة لون الشريحة بنسبة 95٪ من الإيثانول حتى تختفي البقعة.
    • على الفور ، اشطف الشريحة بالماء المقطر. سيؤدي ذلك إلى الحد من الإفراط في إزالة اللون.
    • ثم أضيفي عدة قطرات من سافرانين ونتركه لمدة 30 ثانية. سيؤدي ذلك إلى تلطيخ أي خلايا سالبة الجرام موجودة.
    • اشطف الشريحة برفق بالماء المقطر وجففها بورق ماص.
    • بعد تلطيخ الشريحتين الأخريين بنفس الطريقة (الخطوات 6-17) ، راقب كل منهما بالمجهر.
    • استخدم هدفا منخفض الطاقة أولا لإجراء تعديلات خشنة. عندما تجد قسما مثاليا ، انتقل إلى التكبيرات الأعلى.
    • بعد مزيد من التصوير وضبط اللطاخة بهدف طاقة متوسطة ، أضف زيت الغمر مباشرة إلى اللطاخة. ملاحظة: الزيت ضروري لأهداف الطاقة العالية التي ستوفر أفضل الصور المجهرية.
    • الآن ، استخدم أقلام الرصاص الملونة لرسم البكتيريا المرصودة في دوائر التكبير المناسبة وملء الخصائص المرصودة في العمود المناسب ، مع ملاحظة شكل البكتيريا وما إذا كانت موجبة الجرام ، أو تم تحديدها من خلال تلطيخ أرجواني داكن ، أو سالبة الجرام ، المحددة بالتلوين الوردي. انقر هنا لتنزيل الجدول 2
    • أخيرا ، كرر الملاحظة والرسم والتوصيف للشريحتين البكتيريتين الملطختين الأخريين.
  2. فحص الهياكل الفطرية
    • قم بإزالة صفيحة S. cerevisiae من الحاضنة وضع قطرة ماء على شريحة مجهرية.
    • باستخدام حلقة تلقيح معقمة ، قم بتلطيخ طبقة من الخميرة في قطرة الماء وضع غطاء فوق الشريحة.
    • ضع الشريحة تحت المجهر بأقل تكبير ، مما يزيد من التكبير إلى إعداد الغمر بالزيت لرؤية خلايا الخميرة الفردية.
    • راقب الشكل العام للخميرة وهيكلها وحدد أي خلايا تخضع للتكاثر اللاجنسي عن طريق التبرعم.
    • الآن ، ارسم الخلايا في دوائر التكبير المناسبة.
    • عند الانتهاء من مراقبة الخميرة ، استبدل شريحة S. cerevisiae بشريحة Ascomycetes apothecium معدة واضبط المجهر على أقل تكبير.
    • باستخدام أقلام الرصاص الملونة ، ارسم الهياكل بتكبير منخفض وعالي ، بما في ذلك الأسكي والأبواغ الأسكوية.
    • أخيرا ، ضع فطر زر ، Agaricus bisporus ، تحت مجهر التشريح وارسم الميزات ، بما في ذلك البوائل ، أو الغطاء ، والخياشيم ، والبقع ، أو الساق.
  3. النتائج
    • باستخدام تلوين البكتيريا المسجلة في الجدول ، حدد الأنواع موجبة الجرام وأيها سالبة الجرام.
    • بعد ذلك ، انظر إلى الأشكال المسجلة في الجدول لتحديد الأنواع البكتيرية هي العصيات أو المكورات أو اللولبية.
    • بعد ذلك ، قارن الرسوم التوضيحية لخلايا الخميرة بالرسوم التوضيحية للخلايا البكتيرية. ملاحظة: يمكن أن تتكاثر الخميرة من شعبة الفطريات الفطرية ، مثل S. cerevisiae ، بشكل لاجنسي ، والتي يمكن ملاحظتها من خلال تبرعم الخلايا تحت المجهر.
    • سجل أي ملاحظات لخلايا الخميرة التي تتبرعم. ملاحظة: يمكن أن تتكاثر الفطريات الفطرية أيضا جنسيا عن طريق الانقسام وتكوين الأبواغ أحادية الصيغة الصبغية.
    • سجل أي ملاحظات لتكوين الأبواغ أو البوغ الذي لاحظته في الجدول.
    • ملاحظة: تظهر الفطريات من شعبة Basidiomycota خياشيم يمكن ملاحظتها بوضوح تحت الوقاي.
    • سجل أي أنواع فطرية أظهرت خياشيم تحت البوائق.

Browse More Videos

التنوع الميكروبي