الدماغ المصرفي وأخذ العينات من المواد البيولوجية المنهجي يوفر الأساس لالتجسيم غير منحازة ويزيد من إمكانية الحصول على بيانات من كل عينة.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
الخدمات المصرفية للدماغ : جعل معظم العينات بحوث الخاص
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
التجسيم هو أسلوب غير متحيز لبدقة وكفاءة تقدير عدد الخلايا العصبية الكلي (أو غيرها من نوع من الخلايا) في مجال معين من مجالات الاهتمام
البروتوكول
الجزء 1 : قبل معالجة الأنسجة
- وينبغي أن الأنسجة perfused جيدا مع بارافورمالدهيد ، غلوتارالدهيد ، أو الفورمالين. ويمكن تحقيق ذلك من خلال نضح transcardial القياسية المستخدمة عادة لحصاد الأجهزة الأخرى. في هذه الدراسة كان مخدرا بعمق هذا الموضوع مع هيدروكلوريد الكيتامين (10 ملغم / كغم ، IM) ، الموت الرحيم مع جرعة زائدة من (الرابع 25 ملغ / كلغ ،) والصوديوم بنتوباربيتال perfused transcardially مع PBS 0،1 M حتى exsanguinated تماما. ويعقب ذلك من خلال حل بارافورمالدهيد 4 ٪ في برنامج تلفزيوني لمدة 5 دقائق (~ 1 ليتر).
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
العينة المنتظمة وسيلة غير مكلفة تهدف إلى تحقيق أقصى قدر من المواد البحثية. تم تصميم هذه الاستراتيجية أخذ العينات للامتثال لقواعد التجسيم غير متحيزة التي تتطلب أخذ عينات منتظمة في جميع أنحاء المنطقة. فمن الأهمية بمكان أن يتم الحفاظ على نظام الفروع لكل السلسلة. في المختبر لدينا استخدمنا بنجاح هذا الأسلوب على حد سواء للأعمال المصرفية الهامستر وغير البشرية أقسام الدماغ الرئيسيات. حتى الآن ، وقد جمعنا أجزاء الدماغ على مقربة من 20000 قرد الفرفت (Chlorocebus aethiops sabeus) وأد.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
ليس لدى المؤلفين أي تضارب في المصالح للإفصاح عنه.
شكر وتقدير
فإن الكتاب أود أن أشكر Ikiel Ptito لدعمه الفني المستمر.
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| إيثيلين جليكول | Fisher Scientific | E178-4 | |
| بولي فينيل بيروليدون | Fisher Scientific | BP431-500 | |
| وسط التضمين Thermal Scientific | Fisher Scientific |
المراجع
- West, M., Slomianka, L., Gundersen, H. Unbiased stereological estimation of the total number of neurons in the subdivisions of the rat hippocampus using the optical fractionator. Aat Rec. 231, 482-497 (1991).
- Burke, M. W., Zangenehpour, S., Boire, D., Ptito, M.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
