هذا الفيديو يبين كيف للحث على تمدد الأوعية الدموية الأبهري البطني (AAA) في الفئران عن طريق التسريب داخل اللمعة عابر إيلاستاز البنكرياس الخنازير في الجزء infrarenal من الشريان الأورطي البطني. نموذج لديه القدرة على رؤية واسعة إضافة إلى البيولوجيا المرضية من AAA نظرا لظهور العديد من الفئران المعدلة وراثيا خروج المغلوب الجينات.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
خلق الفئران التجريبية تمدد الأوعية الدموية الأبهري البطني مع إيلاستاز
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
التسريب داخل اللمعة عابر إيلاستاز البنكرياس الخنازير في الجزء infrarenal من الشريان الأورطي البطني هو النموذج الحيواني الأكثر استخداما على نطاق واسع من الأبهر البطني (AAA) منذ ذلك الحين وصفت لأول مرة في الفئران عن طريق Anidjar والزملاء ، واستند (1) الأساس المنطقي لتنميتها على طبيعة متقطعة من الإيلاستين التي لوحظت في AAAS. وقد تم تعديل هذا النموذج الفئران لانتاج AAAS في المنطقة الأبهر infrarenal من الفئران. (2) نموذج لديه القدرة على رؤية واسعة إضافة إلى البيولوجيا المرضية من AAA نظرا لظهور العديد من الفئران المعدلة وراثيا خروج المغلوب الجينات. وعلاوة على ذلك ، بل هو منصة قابلة للاختبار وكلاء العلاجية المحتملة لAAA. في هذا الفيديو ، ونحن لشرح إجراءات ضخ إيلاستاز AAA المستخدمة في المختبر لدينا.
يتم تخدير الفئران باستخدام 2.5 ٪ isoflurane ، ويتم تنفيذ عملية فتح البطن تحت ظروف معقمة. وaortais البطن المعزولة بمساعدة من stereomicroscope التشغيل (لايكا). بعد وضع الحروف المركبة مؤقتة حول الشريان الأورطي القريبة والبعيدة ، يتم إنشاء بضع الأبهر في التشعب مع غيض من إبرة عيار 30. وقدم قطعة للحرارة مدبب من أنابيب البولي اثيلين PE - 10 خلال بضع الأبهر والمضمون. هو perfused لاحقا لمعة الأبهر 5-15 دقائق في 100 ملم زئبق مع المياه المالحة التي تحتوي على نوع الأول الخنزيري إيلاستاز البنكرياس (4.5 U / مل ؛ سيغما كيميكال). بعد إزالة القسطرة التروية ، يتم إصلاح بضع الأبهر دون انقباض في التجويف.
البروتوكول
- الفئران هي تخدير مع استنشاق isoflurane L. / 2.0 - 3.0ml
- وحلق البطن و تنظيفها بالكحول وbetadine.
- يتم وضع الماوس مستلق على الحقل المنطوق.
- يتم ارتداء قفازات معقمة من قبل الجراح ، وجرى تعقيم الأدوات المستخدمة معقمة مع حبة الساخنة.
- يتم إجراء شق البطن طويلة خط الوسط. وتراجع محتويات البطن خارج البطن مع شاش معقم لفضح الشريان الأورطي البطني.
- يتم عزل الشريان الأورطي ال....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
وقد لاحظت دراسات سابقة هامة الكثير الكثير إلى التباين في التنمية من مختلف التحضيرات AAA إيلاستاز التجاري 3. وبالتالي ، فمن الأهمية بمكان رصد الكثير الإنتاج ، فضلا عن أن جماعات المراقبة المناسبة بغية توثيق القدرة على إعداد للحث على AAAS.
ومن المثير للاهتمام ، وقابلية للتنمية AAA في هذا النموذج يعتمد على سلالة تستخدم الماوس 3. الماوس المستخدمة في الفيديو الحالي هو من سلالة C57Bl / 6 الذي وضع ث.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
ليس لدى المؤلفين أي تضاربات مصالح للإفصاح عنها.
شكر وتقدير
وأيد هذا العمل منحة SCCOR "مرض AAA : آليات ، الطبقات ، والمعالجة" (P50 HL083800 - 03) من المعاهد الوطنية للصحة
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات | |
|---|---|---|---|---|
| إيلاستاز البنكرياس الخنزيري من النوع I | كاشف | Sigma-Aldrich | E1250 | |
| أنابيب البولي إيثيلين (PE-10) | BD Biosciences | 427400 | ||
| CHANGE-A-TIP | Bovie Medical Corporation | 18010-00 (FST) | سكين كي | |
| LEICA MZ6 | Leica Microsystems | مجهر ستيريو | ||
| LEICA DFC290HD | Leica Microsystems | كاميرا USB | ||
| Image Pro Express الإصدار 6.0 | Media Cybernetics Inc. | برنامج |
المراجع
- Anidjar, S., Salzmann, J. L., Gentric, D. Elastase-induced experimental aneurysms in rats. Circulation. 82 (3), 973-973 (1990).
- Pyo, R., Lee, J. K., Shipley, J. M. Targeted gene disruption of matrix metalloproteinase-9 (gelatinase ....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
