هذا المقال يدل على وضعها الداخلي كيلوبايت DeOme وآخرون. (1959) والإجراءات التي وضعتها تجنيب B بريل وآخرون. (2008) لتطهير الأربية الثديية 4 من الدهون وسادة ماوس محتلم استعدادا لزرع أجزاء الثدي ، الخلايا الظهارية الثدي ، أو الخلايا السرطانية الثديية.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
توضح هذه المقالة ويقارن إزالة الدهون سادة الداخلي التي وضعها آخرون DeOme بن كيلو بايت. (1) وتجنيب الداخلي التي وضعها بن بريل وآخرون ب 2 ، يليها إجراء عملية زرع الثدي الظهارية. ويستخدم على نطاق واسع من قبل إجراء زراعة ثدي الأحياء الثديية لأنه يستفيد من حقيقة أن تطور هام للظهارة الثديية لا يحدث إلا بعد البلوغ. في 3 أسابيع من العمر ، وينحصر نمو شجرة الثدي الظهارية في محيط الحلمة وسادة خالية من الدهون إلى حد كبير من ظهارة الثديية ، ولكن بنسبة 7 أسابيع من عمر شجرة الظهارية الأقنية تمتد في جميع أنحاء منصة الدهون بأكمله. ولذلك ، إذا كان هذا جزء صغير من لوحة تحتوي على الدهون ظهارة ، تتم إزالة المنطقة الواقعة بين الحلمة والعقدة الليمفاوية ، في 3 أسابيع من العمر ، وسوف ظهارة الذاتية أبدا ملء الوسادة الثديية الدهون ، ويوصف لوحة الدهون بأنه "تطهير ". في هذا الوقت ، يمكن زرع الثدي ظهارة من مصدر آخر في لوحة الدهون تطهيرها حيث لديه القدرة على تمديد أشجار الأقنية الثديية من خلال الخروج من لوحة الدهون. وقد استخدم هذا الإجراء في نماذج تجريبية كثيرة بما في ذلك دراسة النمط الظاهري ورم في الأنسجة الطلائية ثديية معدلة وراثيا من دون آثار الخلط الجيني للحيوان كامل على 3 ، في التعرف على الخلايا الجذعية الثديية عن طريق زرع الخلايا في تخفيف محدود 4،5 ، وتحديد إذا العقيدات المفرطة التصنع المضي قدما لأورام الثدي 6 ، وتقييم تأثير هرمون قبل التعرض على سلوك ظهارة 7،8 الثديية.
ثلاثة فئران الاسبوع المضيف القديمة تخدير ، وتنظيفها وقيدا على مسرح العمليات الجراحية. يتم إجراء شق في منتصف السهمي من خلال الجلد ، ولكن ليس في الغشاء البريتوني ، وتمتد من العانة إلى القص يتم إجراء تخفيضات المائل عن طريق الجلد من شق منتصف السهمي عبر الحوض تجاه كل ساق. يتم سحبها بعيدا عن الجلد البريتوني لفضح 4 الغدة الثديية الأربية. مسح لوحة الدهون عن طريق إزالة الأنسجة الدهنية لوحة سابقة لالعقدة الليمفاوية. يتم زرع أجزاء ظهارة أو الخلايا الظهارية في لوحة المتبقية من الدهون التي تم تطهيرها وإغلاق الماوس.
البروتوكول
1. إعداد زرع الطلائية
يمكن زرعها الطازجة أو المجمدة الأنسجة الطلائية المانحة إلى منصة الدهون تطهيرها ، ولكن إعداد مسبق من الجهات المانحة ظهارة المجمدة هو أكثر ملاءمة مع انخفاض الحد الأدنى من الكفاءة في زرع (> كفاءة 85 ٪). بروتوكول لإعداد ظهارة المانحة المجمدة على النحو التالي :
قبل إعداد المانحة ظهارة زرع ، وإعداد وسائل الاعلام عن تجميد ظهارة وقسامة حول 1ml الى cryovials. ويمكن تخزين هذا في 4 درجة مئوية لمدة تصل إلى 6 أشهر لحين الحاجة إليها. تجميد وسائل الاعلام وسائل الاعلام يتضمن DMEM/F12 مخزن....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
في هذا التقرير ، نقدم طريقتين بديل لإزالة الدهون وسادة الماوس الثدي في التحضير لعمليات زرع الثدي الظهارية. وقد تم إجراء القياسية في استخدام تطورها منذ عام 1959 من قبل DeOme آخرون 1 بينما أكثر الغازية ، والأسلوب القياسي هو الأسلوب المفضل لتدريب المبتدئين لأن يتم عرضها بسهولة على بنية وتوجه الغدة الثديية. ومع ذلك ، قد يكون من المفضل إجراء تجنيب قبل أكثر خبرة الجراح بسبب العديد من المزايا 2. الأهم من ذلك الإجراء هو تجنيب أقل الغازية ، ويتطلب وقتا أقل ، .......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المراجع
- DeOme, K. B., Faulkin, L. J. Jr, Bern, H. A., Blair, P. B. Development of mammary tumors from hyperplastic alveolar nodules transplanted into gland-free mammary fat pads of female C3H mice. Cancer Res. 19, 515-520 (1959).
- Brill, B., Boecher, N., Groner, B., Shemanko, C. S.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
