مقايسة الاستجابة البصرية: طريقة لقياس حدة البصر في أسماك الزرد

الملخص

المصدر: كاميرون، دي جيه، وآخرون. الاستجابة البصرية كمقياس كمي لحدة البصر في الزرد. J. Vis. Exp.(2013)

يصف هذا الفيديو مقايسة الاستجابة البصرية في الزرد. يقيس الفيديو حركات العين الانعكاسية بناء على التحفيز المتحرك البصري ويحدد حدة البصر في الزرد.

البروتوكول

1.استجابة الحركة البصرية (OKR)

1. قم ببناء جهاز تسجيل OKR المخصص باستخدام أسطوانة دوارة قطرها 14.5 سم ، ومجهر استريو مع إعدادات شدة ضوء قابلة للتعديل (300-8,000 لوكس) وجهاز كمبيوتر (الشكل 1 أ).
   1. قم بتوصيل كاميرا بالمجهر والتي ستوفر تغذية حية على شاشة مجاورة وتسمح بالتقاط الصور وتسجيلها.
   2. تحكم في الأسطوانة الدوارة باستخدام متحكم دقيق متصل بجهاز كمبيوتر يستوعب اختيارات السرعة والاتجاهات المختلفة.
2. قم بتخدير السمك في 0.016٪ ثلاثاء لمدة 2-3 دقائق ثم ضع السمكة على منصة صغيرة مع تعليق العينين والخياشيم على الحافة.
3. ضع إسفنجة / منشفة رقيقة على جسم السمكة وقم بتثبيت 2-3 قطع من الرغوة ، على شكل استيعاب السمكة ، فوق السمكة لإبقائها ثابتة. وجد أن الحد من حركة ذيل السمكة هو جانب حاسم للشلل دون التسبب في إصابة الأسماك ، ومن الأفضل تحقيقه باستخدام قطعة مسطحة من الرغوة. (الشكل 1 ب)
4. ضع السمكة داخل خزان أسطواني مملوء بالماء ، يناسب الأسطوانة الدوارة لجهاز تسجيل OKR. استخدم المغناطيس على المنصة لوضع السمكة في وضع مستقيم ، مع وجود عينين على بعد حوالي 7.3 سم من حافة الأسطوانة. يجب أن تنتعش الأسماك من التخدير في غضون بضع دقائق - سيستأنف التنفس الطبيعي ويجب ملاحظة حركات العين العشوائية.
5. ضع شبكة أساسية من 0.07 دورة لكل درجة (cpd) في الأسطوانة الدوارة وقم بإشراك عناصر التحكم في الكمبيوتر لبدء الدوران والتقاط الفيديو (تم استخدام سرعة 12 دورة في الدقيقة لهذه الورقة ، ولكن يجب أن تعطي السرعات من 8 إلى 16 دورة في الدقيقة نتائج مماثلة).
6. بمجرد استخلاص OKR أولي بواسطة الشبكة الأساسية ، أوقف الدوران مؤقتا لفترة وجيزة ، واستبدل الشبكة بشبكة أصغر (تردد مكاني أعلى).
7. كرر هذه العملية حتى يتعذر استنباط OKR. أعد الاختبار باستخدام أصغر شبكة تسببت في OKR باتباع نهج الدرج المعدل ثم كرر استخدام الشبكة التي فشلت في الحصول على استجابة للتحقق من فقدان OKR. يمكن تكرار هذه العملية للتحقق من الاستجابة الحقيقية لأصغر صريف يمكن اكتشافه إذا تغيرت الشبكة النهائية بالنسبة لحدث الانقراض الأول.
8. احصل على قياسات حدة أحادية العين عن طريق وضع انسداد بلاستيكي أسود على الخطوط المجاورة للعين المقابلة. كرر الإجراء أعلاه (الخطوات 1.6-1.7).
9. احصل على حدة العين المعاكسة عن طريق تغيير موضع الانسداد وتكرار الخطوات 1.6-1.7 مرة أخرى.
10. لاحظ المسافة التي تكون فيها كل عين من الخطوط أثناء إجراء الاختبار باستخدام شريط القياس المرجعي أسفل حوض الأسماك بحيث يمكن حساب مقاييس الحدة الدقيقة في الخطوات التالية.

2. حساب حدة البصر

1. احصل على حدة البصر عن طريق حساب cpd: حيث a هي المسافة من مركز العدسة إلى الشبكة ، و h هو طول دورة واحدة من أصغر شبكة لوحظ فيها OKR (الشكل 1 ج).
2. لقياسات حدة البصر المجمعة ، يتم استخدام متوسط القيمة a من كل من العين اليسرى واليمنى.

النتائج

الشكل 1. تسجيل OKR. أ) يتكون جهاز OKR من أسطوانة دوارة بقطر 14.5 سم ومجهر مع إعدادات شدة ضوء قابلة للتعديل (300-8,000 لوكس). توفر الكاميرا تغذية مباشرة على شاشة مجاورة. تحتوي الأسطوانة الدوارة على إعدادات سرعة مختلفة في كل من اتجاهين في اتجاه عقارب الساعة وعكس اتجاه عقارب الساعة ويتم إدخال حواجز شبكية للتردد المكاني قابلة للتبديل وإزالتها حسب الحاجة. ب) يتم تأمين الأسماك ووضعها في وسط الأ...

المواد