Method Article

التزاوج وتحديد مرحلة البويضات: طريقة لتوليد الأجنة وفرزها حسب مرحلة النمو

April 30th, 2023

In This Article

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

المصدر: Hostelley T.L., et al. إعداد العينة وتحليلها لبيانات التعبير الجيني المستندة إلى RNASeq من أسماك الزرد. J. Vis. Exp. (2017)

تصف المقالة بروتوكولا لتوليد أجنة الزرد من خلال التزاوج الطبيعي وفرز مراحل نموها. يتم استخدام البروتوكول بشكل أكبر لتحليل خلايا البنكرياس β باستخدام الأسماك المعدلة وراثيا.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
< p class = "jove_title" >1. توليد الأجنة من خلال التزاوج الطبيعي

  1. زراعة الأجنة حتى عمر 3 أشهر ، والنضج الإنجابي.
  2. افصل الأسماك البالغة من الذكور والإناث عن السلالة المرغوبة إلى أحواض تزاوج مقسمة في المساء السابق لجمع الأجنة ، وأضف 2 ذكور و 3 إناث إلى كل حوض.
    ملاحظة: سمح استخدام سلالة الأنسولين المعدل وراثيا 2a: mCherry بتحليل خلايا β البنكرياس.
  3. انقل الأسماك إلى خزان التزاوج بمياه النظام العذبة وقم بإزالة المقسم فور إضاءة الأضواء في صباح اليوم التالي.
  4. اسمح للأسماك بالتزاوج بشكل طبيعي حتى يتم ملاحظة الأجنة في الخزان السفلي. اجمع الأجنة على فترات 30 دقيقة حتى يتم جمع الكمية المطلوبة. قم ب....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article Name Company Catalog Number Comments ins2a: mCherry زيرك ZL1483 خزانات التزاوج 1.0 لتر مجموعة خزان العبور أكوانيرينغ ZHCT100 تشريح المجهر زييس

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Zebrafish EmbryosMating TankEmbryo CollectionDevelopmental StagingSomite NumberTransgenic FishDissecting MicroscopeEmbryo MediumNatural MatingEgg Sorting

Related Articles