استئصال الثدي الجذري: الاستئصال الجراحي للغدة الثديية بأكملها من الفأر لدراسة تطور السرطان

الملخص

المصدر: Katsuta، E.، et al. إنشاء نموذج سرطان الثدي النقيلي لتقويم العظام الفأر وإجراء استئصال الثدي الجذري للفئران. J. Vis. إكسب (2018).

يصف هذا الفيديو تقنية استئصال الثدي الجذري ، والتي تستخدم للاستئصال الجراحي للغدة الثديية بأكملها من الفأر لدراسة تطور السرطان.

البروتوكول

< p class = "jove_title" >1. استئصال الثدي

ملاحظة: توقيت استئصال الثدي مهم جدا. إذا تم إجراؤه في وقت مبكر جدا ، فلن يحدث ورم خبيث في الرئة. إذا تم ذلك بعد فوات الأوان ، فإن الورم الأساسي قد غزا الأوعية الدموية الرئيسية ، مما يجعل استئصال الأورام الكامل أمرا صعبا. وبالتالي ، تم اختبار نقاط زمنية متعددة لاستئصال الثدي لتحديد النقطة الزمنية التي أنتجت التوازن المناسب في انتظار ورم خبيث قبل أن يصبح الاستئصال صعبا للغاية. بعد القيام بذلك في أكثر من 50 تجربة للفأر ، ثبت أن استئصال الثدي بعد 8 أيام من تلقيح الخلايا السرطانية (أو عندما يصل حجم الورم إلى 5 مم) كان النقطة الزمنية المثالية لتحقيق هذا التوازن.

1. قم بتخدير الفأر بتدفق الأكسجين بنسبة 2-4٪ من الأيزوفلوران و 0.2 لتر / دقيقة حتى تتنفس الفئران بهدوء (2-3 دقائق) وحقن 0.05 مجم / كجم من البوبرينورفين في كتفه تحت الجلد.
2. كبح أطراف الفأر باستخدام شريط المختبر وتعقيم جلده باستخدام الكلورهيكسيدين واليود والإيثانول بنسبة 75٪ باستخدام مسحات قطنية.
3. قم بعمل شق جلدي 5 مم 2 مم إلى اليسار من الندبة الجراحية التي تم إجراؤها في التلقيح الأولي للخلايا السرطانية باستخدام مقص التشريح المجهري. قم بتمديد الشق باتجاه جذر الطرف الأمامي لإزالة الورم والجلد بما في ذلك الندبة الجراحية والآفة الملامسة للورم ، وكذلك حوض العقدة الليمفاوية الإبطية التي لا توجد فيها عقدة ليمفاوية مرئية في معظم الأحيان في وقت استئصال الثدي. تأكد من عدم إتلاف الوريد الإبطي.
4. أغلق عيوب الجلد عن طريق الخياطة باستخدام خيوط معقمة 5-0 غير قابلة للامتصاص على شكل حرف "Y".
5. أعد الفأر إلى قفص نظيف وراقبه حتى يتعافى ويتحرك بحرية (بعد ~ 1-2 دقيقة). إذا لم يبد بصحة جيدة في غضون 24 ساعة من الجراحة، فقم بإعطاء البوبرينورفين (0.2 ملغم/كجم).
6. قم بإزالة الغرز تحت التخدير (مع 2-4٪ إيزوفلوران و 0.2 لتر / دقيقة تدفق الأكسجين) بعد 7 أيام من الجراحة.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة الاسم الشركة رقم فهرسي التعليقات مقص التشريح الجزئي روبوز RS-5983 لتلقيح الخلايا السرطانية واستئصال الثدي ملقط Adson روبوز RS-5233 لتلقيح الخلايا السرطانية واستئصال الثدي حامل إبرة روبوز RS-7830 لتلقيح الخلايا السرطانية واستئصال الثدي 5-0 خيوط حريرية رأى 774 ب لتلقيح الخلايا السرطانية واستئصال الثدي معقم جاف (Germinator 500) برينتري العلمية جي إي آر 5287-120 فولت لتلقيح الخلايا السرطانية واستئصال الثدي المقص وال 9908-717 لتلقيح الخلايا السرطانية واستئصال الثدي