تطعيم جزر البنكرياس: طريقة لزرع جزر البنكرياس في الغرفة الأمامية لعين الفأر للتصوير في الجسم الحي

الملخص

< p class = "jove_content" >المصدر: Nilsson، J.et. al. تصوير طولي في الجسم الحي وتقدير كمية لتطعيم جزيرة البنكرياس البشرية والمساهمة في الخلايا المضيفة في غرفة العين الأمامية. J. Vis. Exp. (2020).

يصف هذا الفيديو بروتوكول تطعيم جزر البنكرياس البشرية في الغرفة الأمامية لعين الفأر لمراقبة إعادة توعية الطعوم الجزرية البشرية في الجسم الحي. كما أنه يساعد على فهم مساهمة الخلايا المتلقية مقابل الخلايا المانحة في تعزيز تغليف والأوعية الدموية للطعم.

البروتوكول

تمت مراجعة جميع الإجراءات التي تنطوي على نماذج حيوانية من قبل لجنة رعاية المؤسسية المحلية ومجلس المراجعة البيطرية في Jove

< p class = "jove_title" >1. تحضير معدات الزرع وجدول الجراحة

ملاحظة: يجب تعقيم جميع الأدوات الجراحية ، وتطهير طاولة الجراحة والأدوات بالكحول بنسبة 70٪.

1. قم بتوصيل حامل الرأس التجسيمي بالتخدير عبر قناع الأنف وقم بتشغيل وسادة التدفئة.
2. قم بتوصيل حقنة هاميلتون محكمة الغلق بأنابيب البولي إيثيلين وقنية العين ذات النهاية الحادة.
   ملاحظه: يوصى بملء جميع الأجزاء ب PBS قبل التجميع. تحقق من وجود فقاعات هواء محتجزة وقم بإزالتها إذا كانت موجودة.....

النتائج

الشكل 1: زرع جزر البنكرياس في الغرفة الأمامية للعين.< / > (أ) إعداد الزرع يظهر الفأر المخدر المثبت في حامل الرأس التجسيمي والعين المكشوفة (الداخلية) بجوار حقنة هاميلتون المعدة المثبتة على الطاولة والمجهر المجسم جاهز لالتقاط جزر الفأر (ب) أو الجزر البشرية (ج). (د) وضع انتظار قنية العين المحملة بالجزر الصغيرة. (ه) عملية الزرع قيد التنفيذ ، و (و) الرسم التخطيطي لش.......

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة الاسم الشركة رقم فهرسي التعليقات معطف مقعد نظيف وسادة التدفئة اضبط على 37 درجة مئوية جهاز تصوير Ivis Lumina ll Bioluminescent الفرجار تشمل أنظمة التصوير البديلة للإضاءة الحيوية In vivo F PRO (Carestream) و Photon Imager (Biospace Lab) تشريح مقص ملقط القزحية (مسننة) حامل إبرة 27 جم 0.3 مل حقنة أنسولين تيرومو T35525M2913