DCE-MRI للطعوم الغريبة لورم البنكرياس التقويمي: طريقة لتقييم الأوعية الدموية الدقيقة في أنسجة الورم المستهدفة

الملخص

المصدر: Kim، H. et al. التباين الديناميكي المعزز للتصوير بالرنين المغناطيسي لنموذج فأر سرطان البنكرياس التقويمي. J. Vis. Exp. (2015).

يصف هذا الفيديو تقنية DCE-MRI للطعوم الغريبة لورم البنكرياس المتعامد في الفئران. DCE-MRI هي طريقة غير جراحية لتحليل الأوعية الدموية الدقيقة في الأنسجة المستهدفة ، وهي مفيدة لتقييم استجابة الأوعية الدموية في الورم بعد علاج جديد. ستساعد هذه الطريقة الباحثين على تطبيق DCE-MRI لنماذج الفئران لسرطان الجهاز الهضمي لتقويم العظام.

البروتوكول

تمت مراجعة جميع الإجراءات التي تنطوي على نماذج حيوانية من قبل لجنة رعاية المؤسسية المحلية ومجلس المراجعة البيطرية JoVE.

فئة

1. التصوير بالرنين المغناطيسي

1. قم بتطبيق التصوير بالرنين المغناطيسي عندما يكون حجم الورم حوالي 5-7 مم في القطر عادة 2 ~ 4 أسابيع بعد زرع الخلية. استخدم ماسح التصوير بالرنين المغناطيسي مخصصا لتصوير الصغيرة أو ماسح ضوئي بالرنين المغناطيسي السريري مزود بملف متخصص لتصوير الصغيرة.
   ملاحظه: استخدمنا ماسحا ضوئيا بالرنين المغناطيسي للحيوانات الصغيرة 9.4T مع مزيج من مرنان / جهاز إرسال بحجم ¹H وجهاز استقبال ملف سطحي (قطره 30 مم) (Bruker BioSpin Corp. ، Billerica ، MA). يوفر الملف السطحي نسبة إشارة إلى ضوضاء أفضل (SNR).
2. قم بإعداد عامل تباين بالرنين المغناطيسي القائم على الجادولينيوم لحقن ~ 0.1 - 0.2 مليمول / كجم لكل في ~ 0.1 - 0.2 مل PBS (محلول ملحي مخزن بالفوسفات).
   ملاحظه: استخدمنا الجادوتريدول، وحقننا 0.2 ملليمول/كغ في 0.15 مل من PBS على مدى 15 ثانية (0.1 مل/ثانية).
3. قم بإعداد أنبوب دقيق البولي إيثيلين (الطول: 7.62 مم ، القطر الداخلي: 0.28 مم ، القطر الخارجي: 0.64 مم). أدخل إبرة 30 جم (طول 12.7 مم) في أحد طرفي الأنبوب ، وإبرة طرف حادة 30 جم (طول 9.5 مم) في الطرف الآخر. قم بتوصيل حقنة سعة 1 مل تحتوي على عامل تباين MR بإبرة الطرف الحاد ، وادفع المحقنة ببطء لملء الأنبوب بالكامل بعامل تباين MR.
4. تخدير باستخدام التهوية مع ~1 - 2٪ من الأيزوفلوران الممزوج بالأكسجين (2 لتر / دقيقة) طوال فترة التحضير والتصوير. تأكد من عمق التخدير عن طريق منعكس قرصة إصبع القدم. ضع مرهم بيطري للعيون على العينين لمنع الجفاف أثناء التخدير. قم بتوسيع الوريد الخلفي باستخدام مصباح حراري قبل إدخال الإبرة. أمسك منتصف الإبرة 30 جم باستخدام ملقط كيلي ، وأدخلها في وريد الذيل. قم بلصق كل من الذيل والأنبوب على قطعة من البلاستيك أو الورق المقوى (عرض 10 مم × طول 100 مم) للحفاظ على الذيل مستقيما.
5. ضع في وضع ضعيف في فراش مجهز بالماء الدافئ المتداول (أو الهواء الدافئ) لتنظيم درجة حرارة الجسم أثناء التصوير. اضبط درجة الحرارة على السرير على 37 درجة مئوية. أدخل مسبار درجة حرارة المستقيم لمراقبة درجة حرارة الجسم أثناء التصوير.
6. ضع لوحا بلاستيكيا منحنيا متعامدا في منطقة البطن. تأكد من وجود الورم خلف الطرف العلوي من اللوحة ، ثم اسحب اللوح لأسفل قليلا (~ 2 مم) لضمان التقاط الورم بواسطة اللوحة. قم بلصق اللوح على سرير بإحكام.
7. قم بلصق محول وسادة التنفس (SA Instrument، Inc. ، Stony Brook ، NY) على منطقة الصدر لمراقبة تنفس أثناء التصوير. ضع ملفا سطحيا في الجزء العلوي من منطقة الورم ، وقم بلصقه على فراش بإحكام. ادفع فراش إلى الماسح الضوئي بالرنين المغناطيسي لوضع منطقة الورم في وسط ملف الحجم (القطر الداخلي: 72 مم).
8. قم بإجراء المطابقة والضبط لكل من جهاز الاستقبال وجهاز الإرسال ، متبوعا باللمع.
9. ابدأ بتسلسل التصوير بالرنين المغناطيسي التشريحي لتحديد موقع الورم. استخدم تسلسل صدى الدوران التوربيني T2 المرجح (T2W) للحصول على صور محورية مع معلمات الاستحواذ التالية. وقت التكرار (TR) / وقت الصدى (TE) = 3,000/34 مللي ثانية ، مصفوفة 128 × 128 ، مجال رؤية 30 × 30 مم ، عدد المتوسطات = 1 ، طول قطار الصدى = 4 ، و 20 شريحة متجاورة بسمك 1 مم في وضع متشابك لتغطية منطقة الورم بأكملها (إجمالي وقت المسح: 1.6 دقيقة).
   ملاحظه: نظرا لأن أورام البنكرياس تقويم العظام أكثر صعوبة من أورام البنكرياس تحت الجلد ، فقد لا تكون صور المترجم التقليدية ذات الدقة المنخفضة مفيدة.
10. احصل على صور مرجحة T1 (T1W) بزوايا قلب مختلفة لاسترداد خريطة T1. لهذا الغرض ، استخدم نهج زاوية صدى متعدد التدرج مع المعلمات التالية: وقت التكرار (TR) / وقت الصدى (TE) = 115/3 مللي ثانية ، مصفوفة 128 × 128 ، مجال رؤية 30 × 30 مم ، عدد المتوسطات = 4 ، ~ 5 - 7 شرائح متجاورة بسمك 1 مم في وضع متشابك لتغطية منطقة الورم ، وسبع زوايا قلب من 10 ، 20 و30 و40 و50 و60 و70 (إجمالي وقت المسح الضوئي لكل زاوية قلب: 1 دقيقة).
    ملاحظه: ومع ذلك ، فإن نهج الزاوية متعددة الوجه فعال فقط عندما يكون تجانس المجال B1 مرتفعا. إذا لم يكن الأمر كذلك ، فيمكن الحصول على خرائط T1 باستخدام نهج TR متعدد بدلا من ذلك.
11. الحصول على صور T1W قبل وبعد حقن التباين بالرنين المغناطيسي القائم على الجادولينيوم. استخدم نفس معلمات الاستحواذ والهندسة لرسم خرائط T1 ولكن بزاوية قلب ثابتة تبلغ 30. استخدم الترميز الخطي لضمان حالة ثابتة عند الحصول على مركز k-space ، خاصة عند استخدام TR قصير وزاوية قلب بدرجة منخفضة. احصل على 5 صور أساسية قبل حقن التباين. ثم احصل على 40 صورة بعد حقن التباين (إجمالي وقت المسح: 45 دقيقة). استخدم مضخة حقنة لحقن عامل التباين بمعدل ثابت (0.01 مل / ثانية).
12. راقب تنفس باستمرار ، واضبط تركيز الأيزوفلوران للحفاظ على معدل التنفس من 50 إلى 100 نفس في الدقيقة. راقب درجة حرارة جسم طوال التصوير.
13. بعد الانتهاء من التصوير بالرنين المغناطيسي DCE، اخلع الإبرة والمجسات الأخرى، وضع في قفص فارغ مغطى بمناشف ورقية. قم بتدليك منطقة أسفل البطن برفق. يجب وضع القفص نصف تحت مصباح حراري للسماح للحيوان بالتحرك داخل وخارج التدرج الحراري أثناء تعافيه. لا تترك دون رقابة حتى يستعيد وعيه الكافي للحفاظ على الاستلقاء القصي.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة الاسم الشركة رقم فهرسي التعليقات 9.4T MR الماسح الضوئي شركة بروكر بيوسبين BioSpec 94/20 USR جادوتريدول شركة براكو للتشخيص NDC 0270-1111-03 أنبوب البولي إيثيلين الصغير التطبيقات الاستراتيجية، Inc #PE-10-25 30 جرام إبرة طرف حادة التطبيقات الاستراتيجية، Inc 89134-194 نظام المراقبة والبوابات SA Instruments, Inc نموذج 1030 هذا نظام متوافق مع التصوير بالرنين المغناطيسي لقياس تصنيف الجهاز التنفسي ودرجة حرارة الجسم للحيوانات الصغيرة في نفس الوقت. مضخة حقنة شركة New Era Pump Systems، Inc. NE-1600