Method Article

نمذجة الطعم الغريب المشتق من المريض: تقنية لتوليد نماذج فأر الورم الميلانيني

April 30th, 2023

In This Article

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

المصدر: Min Xiao et al. نموذج Xenograft مشتق من الورم الميلانيني المشتق من المريض. J. Vis. Exp. (2018)

في هذا الفيديو ، يتم زرع خلايا الورم الميلانيني المشتقة من الإنسان تحت الجلد في منطقة الجناح لفأر يعاني من نقص المناعة. يسمح نموذج PDX بالتحقيق قبل السريري لخلايا الورم الميلانيني التي تلخص بشكل أفضل عدم تجانس الورم وعدوانية الورم الميلانيني التي لوحظت في ظروف الجسم الحي.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تمت مراجعة جميع الإجراءات التي تنطوي على نماذج حيوانية من قبل لجنة رعاية المؤسسية المحلية ومجلس المراجعة البيطرية JoVE.

< p class = "jove_title" >1. معالجة أنسجة الورم لزرع الفأر

  1. الاستئصال الجراحي أو معالجة أنسجة الخزعة الجراحية
    1. انقل الأنسجة إلى طبق بتري معقم وافصل أنسجة الورم عن الأنسجة الطبيعية المحيطة قدر الإمكان.
    2. قم بإزالة الأنسجة الميتة (التي تعرف عادة على أنها أنسجة بيضاء شاحبة تقع مركزيا داخل الورم) من الورم المتبقي قدر الإمكان.
    3. استخدم مشرطا لتقسيم قطعة الورم الأولية إلى قطع متساوية تقريبا (~ 3 مم × 3 مم) لزرع الفأر الجراحي (الشكل 1).
    4. اختياريا ، إذا كان هناك ما ي....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

figure-results-1
الشكل 1: طرق الزرع البديلة.(أ) يمكن معالجة الأورام إما إلى قطع أو تعليق الملاط أو كمعلق أحادي الخلية. (ب) ستسمح الطرق الثلاث بنمو الأورام في الجسم الحي. تظهر هنا الفئران المزروعة تحت الجلد مع الورم وتم تصويرها بعد 12 يوما من الزرع. (ج) تظهر منحنيات نمو الورم للفئران التي تم حقنها بإحدى طرق الزرع الثلاث. N = 5 لكل ذراع ؛ أشرطة الخطأ هي خطأ قياسي.

....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
لم يتم الإعلان عن أي تضارب في المصالح.

Materials

List of materials used in this article Name Company Catalog Number Comments 1 م هيبس شركة سيجما ألدريتش القط # H0887-100ML 100x PenStrep إنفيتروجين القط # 15140163 1x HBSS-/- (بدون Ca ++ أو Mg ++) ميد قطة # MT21-023-CV 2.5٪ تريبسين شركة سيجما ألدريتش قطة # T4549-100ML 10 مل من الحصص المخزنة عند -20 درجة مئوية جيش صرب البوسنه شركة سيجما ألدريتش قطة # A9418-500G الكلورهيكسيدين فيشر ساينتيك القط # 50-118-0313 الكولاجيناز الرابع (2,000 وحدة / مل) ورثينجتون قطة # 4189 المكياج في HBSS - /- من مخزون مسحوق Collagenase IV (Worthington # 4189 ، u / mg المشار إليه على الزجاجة ويختلف باختلاف كل دفعة) ؛ تجميد 1 DMSO شركة سيجما ألدريتش القط # C6295-50ML DNase شركة سيجما ألدريتش قطة # D4527 EGTA (الإيثيلين جلايكول مكرر (2-أمينوإيثيل الأثير) -N ، N ، N'N '- حمض رباعي الأسيتيك) ميرك قطة # 324626.25 FBS تقنيات INVITROGEN LIFE قطة # 16000-044 Fungizone تقنيات INVITROGEN LIFE قطة # 15290-018 الجنتاميسين فيشر ساينستيف القط # BW17518Z إيزوفلوران هنري شاين لصحة القط # 050031 وسائط Leibovitz L15 إنفيتروجين القط # 21083027 ماتريجيل كورنينج قطة # 354230 مصفوفة اصطناعية خارج الخلية ميلوكسيكام هنري شاين صحة # ::هنري شاين القط # 025115 1-5 مجم / كجم كمسكن للألم الفئران الفارغة لمستقبلات NOD / SCID / IL2 (NSG) معهد ويستار ، منشأة للحيوانات تربيه PVA (كحول البولي فينيل) شركة سيجما ألدريتش قطة # P8136-250G RPMI 1640 متوسط (Mod.) 1X مع L-Glutamine فيشر ساينتيك القط # MT10041CM مشرط ريشة قطة # 2976-22 مقاطع الجرح ميكرون القط # 427631

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Patient derived XenograftMelanoma Mouse ModelsSubcutaneous ImplantationImmunodeficient MouseTumor Tissue HarvestSurgical Pocket CreationArtificial Extracellular MatrixWound Closure TechniqueTumor Growth MonitoringNSG Mouse Model

Related Articles