مقالة منهجية

مقايسة الجرعة الحمامية الدنيا: طريقة لقياس حساسية الأشعة فوق البنفسجية في نماذج الفئران

أبريل 30, 2023

في هذه المقالة

الملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
< p class = "jove_content" >المصدر: Amaro-Ortiz ، A. et al. الحث الدوائي للميلانين في البشرة والحماية من حروق الشمس في نموذج الفأر المتوافق مع البشر. J. Vis. Exp. (2013)

يصف هذا الفيديو طريقة لقياس حساسية الأشعة فوق البنفسجية في نموذج فأر متوافق مع البشر - نموذج فأر يحاكي جلد الإنسان. نحدد الحد الأدنى من الجرعة الحمامية (MED) من الأشعة فوق البنفسجية التي يمكن أن تسبب حمامي أو وذمة على الجلد. يمكن أن تساعد هذه الطريقة في معرفة فعالية الأدوية المستخدمة لتقليل حساسية الأشعة فوق البنفسجية.

البروتوكول

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تمت مراجعة جميع الإجراءات المتعلقة بالحيوانات من قبل اللجنة المؤسسية المحلية لرعاية ومجلس المراجعة البيطرية JoVE.

< p class = "jove_title" > تحديد حساسية الأشعة فوق البنفسجية عن طريق حساب "الحد الأدنى من الجرعة الحمامية" (MED)

  1. استخدام التي تم التعامل معها مسبقا مع مركبة أو فورسكولين. تخدير بالحقن داخل الصفاق لمزيج قياسي من الكيتامين والزيلازين.
  2. قم بإعداد قطعة من شريط انسداد الأشعة فوق البنفسجية لاختبار MED. لإنشاء ثقوب في الشريط ، استخدم ثقب ثقب شديد التحمل مع قطع دائري بحجم 1 سم مربع (الشكلان 1 أ و ب). يسهل وجود ثقوب ذات حجم محدد وترتيب متماثل في الشريط التعرف على تغيرات الجلد بعد التشعيع. فوق كل ثقب في الشريط ، ضع قطعة صغيرة من الشريط يمكن إزالتها بسهولة ويمكن إزالتها في أوقات محددة أثناء التعرض للأشعة فوق البنفسجية للسماح بإعطاء جرعات مختلفة من الأشعة فوق البنفسجية.
  3. بمجرد تخدير بشكل كاف ، ضع الشريط على السطح الظهري. يجب دائما استخدام زيوت تشحيم العين تحت التخدير.
  4. قم بتشغيل مصدر الأشعة فوق البنفسجية الذي يتكون من مصباحين من Westinghouse F15T8UV-B بذروة إنتاج 313 نانومتر ونطاق 280-370 نانومتر. اسمح للمصباح بالتوازن مع خرج ثابت للأشعة فوق البنفسجية كما تم قياسه بواسطة مقياس ضوئي للأشعة فوق البنفسجية مع مستشعر UVB (يستغرق عموما بضع دقائق حتى تسخن المصابيح).
  5. بناء على معدل انتقال الأشعة فوق البنفسجية كما تم قياسه بواسطة مقياس الأشعة فوق البنفسجية ، احسب وقت التعرض للأشعة فوق البنفسجية لكل جرعة مطلوبة. على سبيل المثال ، يبلغ خرج الأشعة فوق البنفسجية لمصباحنا 2.4 ميجاوات / سم2. لذلك ، لإدارة 5 كيلو جول / م² ، يجب أن يتعرض الجلد ل 208 ثانية (أي 3 دقائق و 28 ثانية) من الأشعة فوق البنفسجية ، كما هو محسوب:
    figure-protocol-1
  6. ضع المخدرة (كل منها بشريط انسداد في مكانه) على السطح البطني لأسفل لضمان التعرض المتساوي للأشعة فوق البنفسجية. لإدارة الجرعات المختارة من الأشعة فوق البنفسجية ، قم بإزالة الأشرطة الانسدادية الصغيرة التي تغطي الثقوب بالتتابع لتعريض مناطق 1 سم2 من الجلد للجرعات الصحيحة من الإشعاع. لذلك ، باستخدام المثال أعلاه ، إذا كانت 40 كيلو جول /م 2 هي أكبر جرعة في التجربة ، فسيكون تحت المصباح لمدة 27 دقيقة و 47 ثانية إجمالا ولن يكون للجلد في حالة 40 كيلو جول /م 2 شريط مغطى طوال الوقت. ومع ذلك ، ستتم إزالة الشريط الذي يغطي حالة 5 كيلو جول /م 2 عندما يكون هناك 208 ثوان متبقية في التعريض الضوئي. يجب أن يكون توقيت إزالة الشريط بحيث تنتهي كل حالة في وقت واحد.
  7. بعد التعرض للأشعة فوق البنفسجية ، انزع الشريط من الجلد الظهري بعناية ، مع الحرص على عدم تمزيق الجلد بحركات مفاجئة أو شديدة القوة. ضع في مكان دافئ وهادئ للسماح بالتعافي من التخدير.
  8. راقب الفئران لمدة 24-48 ساعة للبحث عن مناطق سرية من الحمامي (الاحمرار) أو الوذمة (التورم) المقابلة للمواقع التشريحية المعرضة لجرعة محددة من الأشعة فوق البنفسجية. توثيق نتائج الجلد فوتوغرافيا.
  9. تتوافق قيمة MED مع الحد الأدنى من جرعة الأشعة فوق البنفسجية التي تسبب الالتهاب كما هو محدد بواسطة الحمامي و / أو الوذمة في دائرة الجلد المكشوفة بأكملها. لاحظ أن تصبغ الجلد يمكن أن يتحدى تحديد MED ، ومع ذلك ، لا يزال من الممكن تقييم الحمامي والوذمة بدقة بشكل عام ، ويرجع الفضل في ذلك جزئيا إلى الشكل المحدد للفتحات في الشريط أثناء التعرض للأشعة فوق البنفسجية.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

figure-results-1
الشكل 1. يحمي الميلانيزنس الناجم عن فورسكولين ضد الالتهاب بوساطة الأشعة فوق البنفسجية كما هو محدد من خلال الحد الأدنى من الجرعة الحمامية (MED) اختبار. (أ ، ب) وضع شريط انسداد الأشعة فوق البنفسجية وجرعات الأشعة فوق البنفسجية للحيوانات التي تم علاجها مرتين يوميا لمدة 5 أيام (أ ، ج) أو مرة واحدة يوميا لمدة 15 يوما (ب ، د ، ه) إما بالسيارة أو فورسكولين. تم تطبيق آخر علاج...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
لم يتم الإعلان عن أي تضارب في المصالح.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة الاسم الشركة رقم فهرسي التعليقات زيلازين حقن Anased LA04612 شيناندواه ، أيوا ، الولايات المتحدة الأمريكية الكيتامين حمض الهيدروكلوريك ، USP بوتني NDC 26637-411-01 سانت جوزيف ، ميزوري ، الولايات المتحدة الأمريكية ايثانول مختبرات ديكون. 2705 [م] كريم مزيل الشعر ، ناير كنيسة دوايت JF-11 4381322 برايتون ، نيوجيرسي مصباح زئبق مبيد للجراثيم UV-B ويستنغهاوس F15T8UV-ب مقياس الإشعاع الضوئي الضوء الدولي 1LT400A بيبودي ، ماساتشوستس ، الولايات المتحدة الأمريكية Isothesia ، Isoflurane ، USP بتلر شاين المرض غير الساري 11695-6776-1 دبلن ، أوهايو ، الولايات المتحدة الأمريكية كرومامتر كونيكا مينولتا CR-400 رامزي ، نيوجيرسي ، الولايات المتحدة الأمريكية معالج البيانات لمقياس اللوناء CR-400 كونيكا مينولتا DR-400 رامزي ، نيوجيرسي ، الولايات المتحدة الأمريكية

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

UV Sensitivity AssayMouse ModelUV Radiation ExposureErythema MeasurementEdema DetectionHumanized MouseUVB LampsUV PhotometerSkin Erythema

مقالات ذات صلة