نهج الخزانة التجسيمية للتسليم العلاجي في نموذج الفأر

الملخص

المصدر: Joshi، K.، et al. النهج الجراحي التجسيمي للحقن الدقيق لجذع الدماغ الذيلي والحبل الشوكي العنقي العلوي عبر Cisterna Magna في الفئران. J. Vis. Exp. (2022)

يوضح هذا الفيديو نهج التجسيم الصهريجي للتوصيل المستهدف إلى جذع الدماغ والحبل الشوكي العلوي. من خلال الوصول إلى صهريج الماغنا المملوء بالسائل النخاعي ، يتيح هذا النهج الحقن الدقيق في المناطق التي يصعب الوصول إليها باستخدام الطرق التجسيمية القياسية.

البروتوكول

تمت مراجعة جميع الإجراءات التي تنطوي على نماذج حيوانية من قبل اللجنة المؤسسية المحلية لرعاية ومجلس المراجعة البيطرية JoVE.

1. فتح الغشاء الصهريجي

1. استخدم ملقط دومون الزاوي للاستيلاء على الجافية ، والتي تمتد من العظم القذالي إلى الأطلس. أمسك الجافية بالقرب من العظم القذالي واستخدم مقص الزنبرك لعمل فتحة صغيرة (~ 0.5 إلى 1.5 مم) في الجافية.
   ملاحظة: في هذا الموقع المنقاري ، تكون المسافة بين جذع الدماغ والجافية العلوية أوسع ، مما يوفر مساحة واسعة للتلاعب الآمن بالجافية.
2. استخدم مقص الزنبرك لرفع الجافية وفتح الجافية أكثر. حجم النافذة يعتمد على الهدف.
   ملاحظة: ستكون هناك حاجة إلى نافذة أكبر عند إجراء حقن طولية متعددة أو حقن ثنائية. ستكون نافذة صغيرة كافية عند إجراء حقن أحادي الجانب أو
خط وسط.
3. بمجرد فتح الجافية ، قم بتصريف السائل الدماغي النخاعي الزائد بطرف إشارة معقم.

2. تحديد المعالم ونقطة الصفر

1. عرض السطح الظهري لجذع الدماغ مع المعالم التفصيلية من خلال الجافية المفتوحة. الobex ، النقطة التي تفتح فيها القناة المركزية في البطين الوريدي ، هي نقطة الصفر الأمامية الخلفية والمتوسطة الجانبية.

3. حقن الهدف

1. اخفض الماصة أو المحقنة إلى الهدف باستخدام الذراع التجسيمية وحقن المحلول كما هو الحال بالنسبة للأساليب التجسيمية القياسية. اتركيه في مكانه لمدة 1-5 دقائق بعد الحقن لتجنب مسار الإبرة عند استخدام أحجام تتراوح بين 3-50 نانولتر. بعد ذلك، ارفع الماصة أو المحقنة باستخدام الذراع التجسيمي.
2. كرر الخطوة 3.1. لأهداف متعددة.

المواد

<فئة الشكل = 'الجدول'><فئة الجدول = 'ck-table-resize'> قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة الاسم الشركة رقم فهرسي التعليقات ملقط بزاوية ، Dumont 5/45FST11251-35فقط للاستيلاء على مقص سبرينغ جاه، Vannas 2.5 مم مع الصندوق المصاحبFST15002-08مقص فقط لفتح الجافية ، صندوق لرفع الجسممناور دقيق تجسيميKopf1760-61متصل بحامل القطب الكهربائي لضبط الموضع بناء على الإحداثياتمجموعة الإطار التجسيمي "U" ولوحة القاعدة داخل الخلاياKopf1730-B ، 1711إطار للجراحةأدوات تطبيق قطنية معقمة ذات رؤوسPuritan25-806 10WCامتصاص الدم من المجال الجراحي