تحفيز عالي التردد لتعزيز تنشيط الخلايا العصبية وتكوين الخلايا العصبية في التلفيف المسنن للفأر

الملخص

المصدر: Zhao, Z. et al. طريقة غازية لتنشيط التلفيف المسنن للفأر عن طريق التحفيز عالي التردد. J. Vis. Exp. (2018)

يوضح هذا الفيديو بروتوكول توصيل التحفيز العميق للدماغ عالي التردد إلى التلفيف المسنن في الحصين ، مع توضيح آثاره على تنشيط الخلايا العصبية ، واللدونة المشبكية ، وتكوين الخلايا العصبية.

البروتوكول

تمت مراجعة جميع الإجراءات التي تنطوي على نماذج حيوانية من قبل اللجنة المؤسسية المحلية لرعاية ومجلس المراجعة البيطرية JoVE.

1. توصيل التحفيز عالي التردد
   1. قم بتوصيل القطب المزروع في دماغ الفأر بمحفز قابل للبرمجة عبر الخيوط المحتملة. قم بإعداد واجهة البرنامج كما هو موضح في الشكل 1. اضبط معلمات التحفيز عالي التردد (HFS) على أنها 6 سلاسل من 6 قطارات من 6 نبضات عند 400 هرتز (الشكل 2 ب ، 100 مللي ثانية بين القطارات ، 20 ثانية بين السلسلة). اضبط شدة التحفيز على 200 ميكرو أمبير.
   2. قم بتسليم HFS للفترة الزمنية المطلوبة عند إعدادها. قدم التحفيز مرتين يوميا في الساعة 8:00 صباحا والساعة 8:00 مساء.
   3. بالنسبة للمجموعة الضابطة ، قم بزرع أقطاب كهربائية في الفئران ولا تقوم بالتحفيز.
   4. لتلوين c-fos ، حفز الفئران التجريبية بشكل حاد (2x في اليوم). بالنسبة لوضع العلامات على برومودوكسيوريدين (BrdU) ، قسم الفئران التجريبية إلى مجموعة تحفيز حاد (تطبق 2x في اليوم) ومجموعة تحفيز مزمن (تطبق 10x في 5 أيام ، 2x في اليوم). أثناء التحفيز ، تأكد من أن الفأر مستيقظ. تذكر التأكد من عدم التواء الخيوط
      ملاحظة: في اليوم الأخير من الإجراء ، تم تحفيز الفئران في مجموعة التحفيز الحاد في وقت واحد.
   5. عند الانتهاء من التحفيز ، افصل دبوس القطب بعناية عن حامل القطب وموصل نظام التسجيل.

النتائج

فئة الشكل = 'الصورة image_resized image-style-align-center' style='display: table؛ margin-left: auto؛ margin-right: auto ؛ width: 75٪ ؛ '>

الشكل 1. واجهة ومعلمات المحفز المتعدد. تم توصيل المحفز بمحول رقمي تناظري وتم تنشيطه بواسطة برنامج احتكاري. كان نوع التحفيز للتحفيز عالي التردد (HFS) أحادي الطور.

<فئة الشكل = 'الصورة image_resized image-style-...

المواد

<فئة الشكل = 'الجدول'><فئة الجدول = 'ck-table-ressize'>قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة الاسم الشركة رقم فهرسي التعليقات StimulatorA-MSystems Model 3800MultiStim 8-Channel Programmable محفزDigidata 1550 DigitizerMolecular DevicesAXON 1550الحصول على بيانات عالية الدقة