يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

في الرحم وحقن داخل البطيني Electroporation من أجنة الفئران E15

28.2K مشاهدة

DOI:

10.3791/239

يوليو 19, 2007

في هذه المقالة

الملخص

داخل الرحم في الجسم الحي ، وحقن electroporation من القشرة المخية الحديثة الفأر الجنينية يوفر أداة قوية للتلاعب من أسلاف الفردية التي تبطن جدران البطين الجانبي. الآن هذه التقنية المستخدمة على نطاق واسع لدراسة العمليات التي ينطوي عليها corticogenesis بالإعراب عن الإفراط أو هدمت الجينات ومراقبة الآثار المترتبة على انتشار الخليوي ، والهجرة ، والتمايز. في مقارنة لاستراتيجيات خروج المغلوب التقليدية ، في الرحم ، electroporation يوفر وسيلة سريعة لمعالجة مجموعة من الخلايا خلال نافذة زمنية محددة. في هذا البروتوكول الفيديو نحن الخطوط العريضة لمنهجية تجريبية لاعداد الفئران للجراحة ، ويعرض من خلال أبواق الرحم laporatomy ، حقن الحمض النووي في البطينات الجانبية للجنين النامي ، electroporating أسلاف الحمض النووي في بطانة الجدار الجانبي ، ورعاية للحيوانات في مرحلة ما بعد الجراحة . مختبرنا يستخدم هذا البروتوكول لعملية جراحية في E13 - E16 الفئران ، ومع ذلك ، هو الأكثر شيوعا تنفيذ ذلك في E15 ، كما هو مبين في هذا الفيديو.

الإفصاحات

ليس لدى المؤلفين أي تضاربات في المصالح للإفصاح عنها.

إعادة الطباعة والأذونات

الوسوم

التثقيب الكهربائي في الرحمجراحة أجنة الفئرانالحقن في البطين الجانبيالحقن المجهري للحمض النووي DNAالقشرة الحديثة الجنينيةإيصال الحمض النووي البلازميدي DNAتقنية الخياطة الجراحيةإعطاء البوبرينورفينالتخدير بـ الإيزوفلوراننظام التثقيب الكهربائي BTX