التحول من الحمض النووي البلازميد في كولاي استخدام أسلوب الصدمة الحرارية

الملخص

التحول من الحمض النووي البلازميد في كولاي باستخدام أسلوب الصدمة الحرارية هي تقنية البيولوجيا الجزيئية الأساسية. وهو يتألف من إدخال المنتج الأجنبي أو ربط البلازميد في البكتيريا. هذا البروتوكول الفيديو يصف الطريقة التقليدية في التحول باستخدام البكتيريا المختصة متاحة تجاريا كيميائيا من Genlantis. بعد حضانة قصيرة في الجليد ، ويتم وضع خليط من البكتيريا كيميائيا المختصة والحمض النووي في 42 درجة مئوية لمدة 45 ثانية (الصدمة الحرارية) ، ثم توضع مرة أخرى في الجليد. يضاف SOC وسائل الإعلام ويتم تحضين الخلايا تحولت عند 37 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة مع الانفعالات. وأكد أن عزل المستعمرات بغض النظر عن كفاءة التحول ، مطلي كميتين من البكتيريا المتحولة. ويمكن استخدام هذا البروتوكول التقليدية بنجاح لتحويل معظم البكتيريا المختصة متاحة تجاريا. يمكن أيضا أن turbocells Genlantis من أن تستخدم في بروتوكول رواية التحول 3 دقائق ، والمبينة في دليل التعليمات.