مقالة منهجية

متاهة المياه مع نقل المنصة: طريقة لتقييم الذاكرة العاملة

أبريل 30, 2023

في هذه المقالة

الملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

المصدر: Hausser، N.، et al. الكشف عن العجز السلوكي في الفئران بعد إصابة الدماغ الرضحية.J. Vis. إكسب (2018).

في هذا الفيديو ، نصف اختبار متاهة موريس المائية مع نقل المنصة ، وهي مهمة ملاحية تستخدم لدراسة الذاكرة العاملة في القوارض.

البروتوكول

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تمت مراجعة جميع الإجراءات التي تنطوي على نماذج حيوانية من قبل لجنة رعاية المؤسسية المحلية ومجلس المراجعة البيطرية JoVE.

< p class = "jove_title" >1. متاهة مياه الذاكرة العاملة

  1. معدات
    1. استخدم خزانا مملوءا بالماء على ارتفاع 28 سم ويتم الحفاظ عليه عند 26 ± 1 درجة مئوية.
    2. استخدم منصة زجاجية أكريليك شفافة قطرها 10 سم على حامل بارتفاع 26 سم.
      ملاحظه: يجب أن يكون السطح العلوي للمنصة مغطى بالسيليكون على شكل دائرة مع X عبرها. هذا يسمح للفئران بالصعود إلى المنصة ويمنحها قوة الجر حتى لا تنزلق.
    3. اجمع ساعة توقيت ، ومصباح حراري ، ومناشف يمكن التخلص منها ، ووسادات ماصة ، وأقفاص إضافية ، وشبكة أسماك صغيرة ذات مقبض طويل. استخدم نظام تتبع فيديو محوسب متصل بكاميرا فيديو لتسجيل سباحة الفئران وإرسال البيانات إلى الكمبيوتر. احفظ الفيديو والبيانات على الكمبيوتر لتحليلها لاحقا.
  2. اختبار متاهة ماء الذاكرة العاملة
    1. امنح الفئران أربعة أزواج من التجارب كل يوم لمدة خمسة أيام متتالية ، ضع المنصة في كل من الأرباع الأربعة وابدأ الفئران من كل نقطة من نقاط البداية الأربع (N ، S ، E ، W) كما هو موضح أدناه.
    2. أولا، حدد أزواج موقع البداية والنظام الأساسي لاستخدامها خلال التجربة.
      ملاحظة: يجب أن يكون ترتيب الأرباع حيث توجد المنصة ونقطة البداية المستخدمة بترتيب مختلف لكل يوم من أيام السباحة الخمسة ، ولكن هو نفسه لكل فأر.
      1. استخدم أربع نقاط انطلاق (N أو S أو E أو W) وأربعة مواقع للمنصة (الأرباع 1 أو 2 أو 3 أو 4 ؛ الشكل 1). على سبيل المثال ، (N ، 2 ؛ ه, 4; [س], 1; دبليو ، 3 ؛ انظر الشكل 1). خطط لترتيب متوازن (ليس عشوائيا) لتجنب نقاط البداية القريبة جدا من المنصات (لا توجد نقطة بداية هي نفس ربع موقع النظام الأساسي). قم بإعداد ورقة بيانات باستخدام أرباع النظام الأساسي وأربع نقاط بداية.
      2. اكتب بروتوكولا لبرنامج تتبع الفيديو لاستخدامه من أجل تصوير الفئران وهي تسبح وجمع بيانات محددة (على سبيل المثال ، مدة السباحة والسرعة والمسافة المقطوعة قبل العثور على المنصة).
        ملاحظه: سيتوقف برنامج التتبع تلقائيا عن التسجيل بعد المدة المحددة. يجب أن يسمح البروتوكول بتحديد مكان وضع النظام الأساسي ، وعدد التجارب التي سيتم إجراؤها لكل ، وعدد التي سيتم اختبارها في كل جلسة ، وكذلك المدة القصوى المسموح بها (على سبيل المثال ، 120 ثانية).
      3. اختبر 4-6 فئران في كل جلسة.
        ملاحظه: يخلق أكثر من 6 فئران مشكلة في التوقيت بين الفئران ويمكن أن يؤدي إلى خطأ من قبل المعالج. كما تصبح صناديق التدفئة مزدحمة.
    3. التجربة 1
      1. افتح برنامج تتبع الفيديو وقم بتحميل البروتوكول الصحيح بما في ذلك خريطة متاهة المياه.
      2. ضع المنصة في الموقع المخصص (على سبيل المثال ، 2 ؛ الشكل 1) وتحقق من تطابقه مع الخريطة في البرنامج. قم بإعداد برنامج التتبع للبدء عندما يدخل الجرذ في مجال رؤية كاميرا الفيديو.
      3. ضع الجرذ في الخزان المواجه للجدار في الموقع المحدد (على سبيل المثال ، N ؛ الشكل 1) وابدأ المؤقت على الفور.
      4. اسمح للفأر 120 ثانية بالعثور على المنصة. عندما يجد الجرذ النظام الأساسي ، أوقف المؤقت وسجل الوقت في ورقة العمل. إذا فشل الجرذ في العثور على المنصة ، فقم بتوجيهه إلى المنصة يدويا وسجل 120 ثانية. اسمح للفأر 15 ثانية بالبقاء على المنصة.
    4. التجربة 2
      1. تحقق من أن البرنامج جاهز للإصدار التجريبي 2. ضع الجرذ مرة أخرى في الخزان في نفس وضع البداية (N). كرر الخطوة 1.2.3.4.
    5. بعد التجربة 2 ، ضع الجرذ في العلبة الساخنة لمدة 4 دقائق. الشكل 1) ، وتحقق من تطابقه مع الخريطة في البرنامج.
    6. كرر الإجراءات التجريبية 1 و2 (الخطوات 1.2.3-1.2.4) حتى يتم الانتهاء من جميع أزواج موقع البداية/النظام الأساسي الأربعة.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

p class = "jove_content" fo: keep-together.within-page = "1" >figure-results-1
الشكل 1. رسم تخطيطي لمتاهة المياه.يوضح هذا الرسم البياني مواقع المنصة المحتملة (1 ، 2 ، 3 ، 4) ونقاط البداية (N ، S ، E ، W) لمتاهة موريس المائية للذاكرة العاملة. يسمح للفئران بتجربتين من كل موقع بدء / إقران منصة. هناك فاصل زمني بين المحاكمات 15 ثانية و 4 دقائق من الراحة في غرفة الاحترار بين أزواج من التجارب ليصبح المجموع أربعة أزواج من التجارب لكل جلسة يومية.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
لم يتم الإعلان عن أي تضارب في المصالح.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة الاسم الشركة رقم فهرسي التعليقات فئران سبراج داولي < td >مختبرات تشارلز ريفرز CD-IGS رمز سلالة الفئران 001 ذكر ألبينو 300-350 جم عند الوصول < td > بركة الألياف الزجاجية الشركة المصنعة غير معروفة 72 بوصة قطر × 30 بوصة عمق (~ 500 جالون) < td > منصة زجاج شبكي مصنوع يدويا من ماجي البقدونس قطر 10 سم 26 بوصة مع سيليكون مطبق على سطح المنصة لتوفير سطح إمساك < td > صناديق زجاجية مع أغطية متجر ماكينات UTMB 2 صندوق 10 بوصة عرض × 16 بوصة طول × 9 بوصة ارتفاع < td > أضواء موضعية / مصابيح حرارية هوم ديبوت 3 حول حمام السباحة 2 فوق صناديق لتجفيف < td >AnyMaze سان دييغو انسترومنتس 9001 http://www.sandiegoinstruments.com/any-maze-video-tracking/

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

مقالات ذات صلة