تخطيط صدى القلب بالفئران: تقنية غير جراحية لتقييم مورفولوجيا القلب

الملخص

المصدر: Baudouy، D.، et al. تخطيط صدى القلب والفحص النسيجي لمورفولوجيا القلب في الفأر. J. Vis. Exp. (2017).

يصف هذا الفيديو بروتوكولا لإجراء تخطيط صدى القلب على فأر المختبر.

البروتوكول

تمت مراجعة جميع الإجراءات التي تنطوي على نماذج حيوانية من قبل لجنة رعاية المؤسسية المحلية ومجلس المراجعة البيطرية JoVE.

< ص الفئة = "jove_title" >1. تخطيط صدى القلب

1. حدد وزن جسم الماوس باستخدام ميزان مختبر قياسي مع إمساكه برفق من الذيل لضمان الوضع المناسب.
2. تخدير عن طريق الحقن داخل الصفاق (IP) بمقدار 50 مجم / كجم بنتوباربيتال.
   ملاحظه: يمكن استخدام أي نوع آخر من التخدير إذا تم استخدام نفس البروتوكول طوال الدراسة. ستتم مناقشة المزايا والعيوب أدناه.
3. أعد الماوس إلى قفصه الخاص وانتظر حتى لا يستجيب ، ويظهر تنفسا ثابتا ، وردود أفعال القدم الخلفية غائبة. لاختبار ذلك ، اضغط على القدم قليلا ولاحظ ما إذا كانت الساق لا تزال تتراجع.
4. احلق الجانب الأيسر من الصدر والإبط الأيسر باستخدام ماكينة حلاقة القوارض التجارية.
   ملاحظه: يسمح استخدام ماكينة حلاقة القوارض المخصصة بالإزالة الكاملة لشعر الفأر الناعم لتجنب التداخل في قياس تخطيط صدى القلب. يجب تجنب كريمات أو محاليل إزالة الشعر التجارية ، لأنها عادة ما تكون معطرة ، مما يزعج بعد استيقاظه. تجنب الحلاقة المفرطة لأنها تزيد من فقدان الحرارة.
5. ضع النائم على وسادة دافئة مضبوطة على 40-42 درجة مئوية في وضع ضحل على الجانب الأيسر، بحيث يكون الرأس عند موضع الساعة 12 والذيل عند موضع الساعة 6. ثبت الذراع اليسرى والساق اليسرى والذيل بشريط لاصق.
6. ضع جل تخطيط صدى القلب الدافئ مسبقا على الصدر المحلوق ورأس محول الطاقة.
7. ضع محول الطاقة parasternal-left ، وتوجيهه إلى الجانب الأيمن من الرقبة للحصول على عرض ثنائي الأبعاد (2D) للمحور الطويل على مستوى العضلة الحليمية. أدر محول الطاقة بزاوية 90 درجة في اتجاه عقارب الساعة للحصول على عرض قصير المحور على مستوى العضلات الحليمية. استخدم إعداد الحد الأدنى من العمق والتكبير/التصغير لزيادة جودة الصورة ومعدل الإطارات. اضبط سرعة المسح على الحد الأقصى.
   1. للحصول على هذه الإعدادات، يمكن استخدام خيارات مختلفة لإعداد التكبير/التصغير والعمق، اعتمادا على الجهاز والبرنامج. سجل صور الوضع M الموجهة ثنائية الأبعاد في عرض قصير المحور. راجع الشكل 1 أ و B.
      ملاحظه: احرص على تجنب الضغط المفرط على الصدر ، فقد يسبب ذلك بطء القلب.
8. سجل ما لا يقل عن 3 سلاسل من 3 حلقات سينمائية لنبضات القلب لكل.
   ملاحظه: بالنسبة لبرنامج تخطيط صدى القلب المستخدم في هذه الدراسة ، اضغط على زر "الحصول / الحفظ" مرة واحدة فقط. هذه المنهجية خاصة بمخطط صدى القلب باستخدام هذا البرنامج المعين. يمكن استخدام حزم برامج أخرى مع أجهزة مختلفة.
9. بعد التسجيلات الناجحة ، امسح جل تخطيط صدى القلب من صدر الماوس ووسادة التسخين ومحول الطاقة. قم بإزالة الشريط من الأطراف والذيل.
10. اترك الماوس تحت الملاحظة على وسادة التدفئة ، مغطى بالمناديل الورقية لتجنب التعرض غير الضروري للضوء وفقدان الحرارة ، حتى يستيقظ.
11. أعد إلى قفصه.
12. قم بتحليل صور الوضع M المسجلة من عرض المحور القصير شبه القصي لتحديد أبعاد البطين الأيسر (LV) ووظيفته. قم بقياس سمك الجدار الأمامي LV في الانقباض والانبساط (LVAWs و LVAWd) ، والأقطار الانقباضية الداخلية LV والانبساطي النهائي (LVIDs و LVIDd) ، وسمك الجدار الخلفي LV (LVPW) في الانقباض والانبساط (LVPWs و LVPWd) باستخدام تحديد واجهة الأنسجة والدم على الصور المخزنة.
13. قم بقياس الأبعاد الانبساطي في وقت الأبعاد الانبساطي القصوى الظاهرة LV والأبعاد الانقباضية الطرفية LV في وقت الرحلة الانقباضية الأمامية للجدار الخلفي LV. اضغط على شاشة اللمس على أيقونة "تحليل" ثم على أيقونة "LVAWd". ضع الفرجار الإلكتروني على الواجهة بين تجويف البطين الأيمن والجدار الأمامي LV في الانبساط.
14. ضع الفرجار الإلكتروني على الواجهة بين الجدار الأمامي LV وتجويف الجهد المنخفض للحصول على سمك الجدار الأمامي الانبساطي LV ؛ سيتحول البرنامج مباشرة إلى القياس الانبساطي الداخلي LV.
15. ضع الفرجار على الواجهة بين تجويف الجهد المنخفض والجدار الخلفي للجهد المنخفض للحصول على القطر الانبساطي الداخلي للجهد المنخفض؛ سيتحول البرنامج إلى قياس سمك الجدار الخلفي للجهد المنخفض
.
16. ضع الفرجار على الواجهة بين الجدار الخلفي LV والتامور للحصول على سمك الجدار الخلفي الانبساطي LV. بالنسبة للأبعاد الانقباضية LV ، انقر فوق شاشة اللمس على أيقونة "LVAWs" وضع الفرجار الإلكتروني على الواجهة بين تجويف البطين الأيمن والجدار الأمامي LV في الانقباض.
17. ضع الفرجار الإلكتروني على الواجهة بين الجدار الأمامي LV وتجويف LV للحصول على سمك الجدار الأمامي الانقباضي LV. كرر العملية كما هو موضح أعلاه للقطر الانقباضي الداخلي LV وسمك الجدار الخلفي الانقباضي LV. استخدم الاتفاقية الرائدة التي اعتمدتها الجمعية الأمريكية لتخطيط صدى القلب لتتبع حدود الشغاف والنخابي.
    ملاحظه: سيتم حساب معلمات وظيفة الانقباض LV تلقائيا باستخدام القياسات السابقة. يتم تعريف التقصير الجزئي LV (FS) على أنه FS (٪) = [(LVIDd - LVIDs) / LVIDd] × 100. يتم حساب كسر طرد الجهد المنخفض (EF) باستخدام صيغة Teicholz المعدلة ، حيث EF (٪) = [(LVIDd³ - LVIDs³) / LVIDd³] × 100¹². راجع الشكل 1 أ ، ب.
18. قم بتخزين البيانات على أقراص مضغوطة أو شرائح ذاكرة USB وقم بعمل نسخ احتياطية.
19. استيراد البيانات وتحليلها وتصديرها باستخدام البرنامج المناسب.

النتائج

الشكل 1: تخطيط صدى القلب بدقة قياسية (>10 ميجاهرتز) لقياس الأبعاد الانقباضية والانبساطي LV ووظيفة القلب في الفئران المصابة بتضخم القلب الموسع بعد احتشاء عضلة القلب مقابل الضابطة. تسجيلات تخطيط صدى القلب التمثيلية من الفئران العادية والسليمة (A) التي تعاني من تمدد LV وانخفاض وظيفة LV بعد احتشاء عضلة القلب (Tie2-CreERT2; PPARβ / δ + فئران تاموكسيفين) (ب).

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة الاسم الشركة رقم فهرسي التعليقات هلام نقل الموجات فوق الصوتية ؛ جل أكواسونيك 100 < تي دي >باركر < تي دي > < تي دي > مسبار الموجات فوق الصوتية الخطي. L15-7io فيليبس للرعاية الصحية < td > تخطيط صدى القلب. IE33 xMATRIX فيليبس للرعاية الصحية < td >ماكينة حلاقة القوارض جهاز هارفارد 34-0243