حصاد مستودعات الدهون الصفاقية: تقنية لدراسة استعمار سرطان المبيض للأنسجة الدهنية البريتونية في نماذج الفئران

الملخص

المصدر: Krishnan، V. et al. In Vivo وخارج الجسم الحي لدراسة الاستعمار النقيلي لسرطان المبيض لهياكل البقع اللبنية في الدهون الصفاقية. J. Vis. إكسب. (2015)

في هذا الفيديو ، نستخدم نموذج فأر أنثى مقتل رحيم يحمل سرطان المبيض. ثم نصف بروتوكولا لتحديد واستخراج مستودعات الدهون أو الأنسجة الدهنية المرتبطة بالأعضاء البريتونية الأولية الخمسة لدراسة استعمار الخلايا السرطانية النقيلية.

البروتوكول

تمت مراجعة جميع الإجراءات التي تنطوي على نماذج حيوانية من قبل لجنة رعاية المؤسسية المحلية ومجلس المراجعة البيطرية JoVE.

< p class = "jove_title" >1. تحضير للدراسات التجريبية

1. السماح للحيوانات بالتأقلم مع السكن والبيئة الجديدة ، للتعافي من الآثار الفسيولوجية المحتملة للنقل والمناولة.
   ملاحظه: تنطبق التقنية التالية على جميع سلالات الفئران المتاحة تجاريا. يعتمد عدد التي سيتم استخدامها في التجربة على تصميم الدراسة ويجب أن يتم ذلك بالتشاور مع إحصائي.

< p class = "jove_title" >2. تحديد وعزل مستودعات الدهون البريتونية

1. القتل الرحيم للحيوانات عن طريق جرعة زائدة من ثاني أكسيد الكربون₂ وطريقة فيزيائية ثانوية لتأكيد الوفاة.
2. نظرا لأن حصاد مستودعات الدهون البريتونية يشكل إزالة داخلية للأعضاء (الطريقة الثانوية) ، فقم بعمل شق خط الوسط بالقرب من الحليمات الأربية من خلال الجدار البريتوني لفضح الأعضاء الداخلية (الشكل 1 أ).
3. بالنسبة للدهون العقلية (OM) ، قم بكشف المركب العقلي / البنكرياس عن طريق تمديد الطحال من التجويف البريتوني بالملقط (الشكل 1 ج). حرر الثرب من البنكرياس والطحال عن طريق تقليم جميع وصلات الأنسجة عن كثب. تأكد من استئصال أي أنسجة بنكرياس متبقية.
4. بالنسبة لدهون الغدد التناسلية (GF) ، استخدم الملقط لرفع دهون الغدد التناسلية المحيطة بالمبايض والاستئصال عن طريق قطع وصلات الأنسجة (الشكل 1 أ أعلى اليمين).
5. بالنسبة لدهون الرحم (UF) ، استخدم الملقط لرفع دهون الرحم المحيطة بقرون الرحم والاستئصال عن طريق قطع وصلات الأنسجة (الشكل 1 أ أسفل اليمين).
6. بالنسبة للدهون المساريقية (MF) ، قم بقطع التقاطع بين الأمعاء الدقيقة والبواب. استخدم الملقط لإمساك الطرف الحر للأمعاء الدقيقة بإحكام ، و "تقشيره" ببطء بعيدا عن دهون المساريق. حرر دهون المساريقية من جذر المساريقي باستخدام مقص تشريح (الشكل 1 أ أسفل اليسار).
7. بالنسبة للدهون الطحالية (SF) ، ارفع الطرف البعيد من الطحال باستخدام ملقط لكشف الشريط الدهني الرفيع للأنسجة التي تربط نقير الطحال بالبنكرياس. استئصال دهون الطحال عن طريق إطلاقها أولا من البنكرياس ثم تشريحها بعناية من الطحال (الشكل 1 ب).

النتائج

الشكل 1. المواقع والهياكل النسبية لمستودعات الدهون البريتونية الرئيسية. (أ)يوضح التشريح التشريحي الإجمالي الموقع النسبي لأربعة من المصادر الأولية الخمسة للدهون البريتونية. يظهر الثرب (OM ؛ محدد) ، ودهون الغدد التناسلية (GF) ، ودهون الرحم (UF) ، والمساريق (MY) ، والمبيض (ov) ، وقرون الرحم (uh) ، والأمعاء الدقيقة (si). (B) دهون Splenoportal (SP ؛ الخطوط العريضة) المكشوف...

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة الاسم الشركة رقم فهرسي التعليقات أدوات التشريح أدوات العلوم الدقيقة غير أ برنامج تلفزيوني كورنينج 21-040-السيرة الذاتية بدون كالسيوم ومغنيسيوم