يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

أخذ عينات من أنسجة سرطان البروستاتا للبنوك الحيوية: تقنية مستهدفة موجهة بالرنين المغناطيسي لإزالة لكمات الخزعة من أنسجة الورم الطازجة

3.2K مشاهدات

أبريل 30, 2023

في هذه المقالة

الملخص

المصدر: Heavey، S. et al. استخدام التصوير بالرنين المغناطيسي وبيانات الخزعة لتوجيه إجراءات أخذ العينات للبنك الحيوي لسرطان البروستاتا. J. Vis. Exp. (2019)

يوضح هذا الفيديو تقنية قائمة على بيانات التصوير بالرنين المغناطيسي لاستهداف مناطق معينة تحتوي على ورم في أنسجة البروستاتا لأخذ العينات. يمكن تخزين عينات الخزعة التي تم جمعها لأغراض البنوك الحيوية أو استخدامها في التحليل اللاحق

.

البروتوكول

تم تنفيذ جميع الإجراءات التي تشمل مشاركين بشريين وفقا للمبادئ التوجيهية المؤسسية والوطنية والدولية لرفاهية الإنسان وتمت مراجعتها من قبل مجلس المراجعة المؤسسية المحلي.

< p class = "jove_title" >1. جهاز تقطيع البروستاتا

  1. شراء جهاز تقطيع البروستاتا (جدول المواد). بدلا من ذلك، اطبع مقبض شفرة باستخدام طابعة ثلاثية الأبعاد.
< p class = "jove_title" >2. استهداف الورم

  1. راجع الملاحظات السريرية لتحديد آفة الفهرس كما هو موضح في الخزعة التشخيصية ، على سبيل المثال ، الخلف الأيسر.
  2. راجع صور التصوير بالرنين المغناطيسي لقياس موقع الورم أعلاه.
    1. أوجد التسلسل الذي يكون فيه الورم أكثر وضوحا في المستوى المحوري ، على سبيل المثال ، T2 مرجح.
    2. قم بالتمرير عبر الصور المحورية للعثور على الصورة التي يكون فيها الورم هو الأكبر واطبع الصورة للرجوع إليها.
    3. في الصورة الإكليلية المقابلة ، قم بقياس المسافة من قاعدة البروستاتا إلى الموضع المحوري المحدد ، والطول الكامل للبروستاتا من القمة إلى القاعدة (مم) ، واطبعها كمرجع.
فئة < ص = "jove_title" >3. مجموعة البروستاتا

  1. تحقق من ملاحظات المريض للتأكد من الحصول على الموافقة المستنيرة المناسبة لهذا الإجراء وأي تطبيقات بحثية نهائية.
  2. بعد استئصال البروستاتا الجذري ، اجمع البروستاتا في وعاء جاف. تأكد من عدم إضافة الفورمالين أو أي مثبت آخر إلى البروستاتا.
  3. نقل إلى مكان معقم مناسب لأخذ العينات ، على سبيل المثال ، غطاء التدفق الصفحي في مختبر علم الأمراض.
  4. انتقل إلى أخذ العينات في أسرع وقت ممكن إذا كانت هناك حاجة إلى أنسجة جديدة.
    ملاحظة: بالنسبة لبعض التطبيقات (على سبيل المثال ، تقييم الحمض النووي ، الذي لا ينبغي أن يتحلل بالسرعة التي يتحلل بها الحمض النووي الريبي) ، قد يكون من المناسب تبريد العينة وأخذ عينات في اليوم التالي.
< p class = "jove_title" >4. تحضير العينة

  1. قم بإعداد غطاء التدفق الصفحي وجهاز تقطيع البروستاتا وفقا لإجراءات إزالة التلوث المحلية ، باستخدام تقنيات معقمة. هنا ، رش 70٪ من الإيثانول وامسحه على جميع الأسطح. استخدم إبر ومشارط معقمة للاستخدام مرة واحدة. استخدم شفرات التقطيع حتى ثلاث مرات ؛ يغسل بعد كل استخدام بالماء الساخن والصابون ، ثم يرش ويمسح ب 70٪ إيثانول.
  2. وزن البروستاتا (g) باستخدام ميزان قياسي.
  3. حبر البروستاتا. قم بطلاء الجانب الأيسر بالحبر الأزرق والجانب الأيمن بالحبر الأسود. قم بتغطية الكبسولة الكاملة والحويصلات المنوية بالحبر للإشارة لاحقا إلى الهوامش الجراحية.
    ملاحظة: قد تختلف إجراءات الكتابة بالحبر محليا ويمكن تعديلها وفقا لذلك.

5. تقطيع البروستاتا

  1. قم بتجميع جهاز التقطيع عن طريق إدخال الجدران بشكل عمودي في قاعدة الحامل (الشكل 1 أ).
  2. ضع البروستاتا بحيث تواجه القاعدة والقمة جدرانا متقابلة ، بحيث يكون الجانب الخلفي لأسفل والأمامي لأعلى. ضع دبابيس ذهبية حول البروستاتا. ادفع البروستاتا إلى الداخل قليلا إذا لزم الأمر للحصول على نوبة دافئة ، مما يدعم البروستاتا أثناء التقطيع.
  3. قم بقياس طول البروستاتا من القاعدة إلى القمة باستخدام المسطرة ومقارنتها بطول البروستاتا كما تم قياسه بواسطة التصوير بالرنين المغناطيسي. إذا تقلصت البروستاتا ، فقم بتطبيق تصحيح مخصص على المسافة المتوقعة من القاعدة إلى الشريحة المستعرضة المستهدفة. على سبيل المثال ، إذا كان الطول الكامل للبروستاتا في صورة التصوير بالرنين المغناطيسي 50 مم ، ولكن عند قياسه باستخدام المسطرة في هذه المرحلة ، فإنه يظهر أنها تقلصت إلى 45 مم ، ثم قلل موضع التقطيع المتوقع بنسبة 10٪.
  4. قم بالقياس من القاعدة إلى الشريحة العرضية المطلوبة. اختر الدبوس الأقرب إلى هذا القياس لتقطيعه.
  5. ارتداء قفازات chainmail لمنع الإصابة ، أمسك جهاز التقطيع (الشكل 1 ب) ، ضع الشفرات على جانبي الدبوس المحدد ، واستخدم الفاصل لإبقاء الشفرات متباعدة بمقدار 5 مم. خذ شريحة عن طريق تحريك الشفرات ببطء وثبات لأسفل وللأمام والخلف بضربات طويلة (الشكل 1C). تأكد من فصل شريحة كاملة قبل تفكيك الجهاز.
  6. قم بإزالة الجدران والدبابيس وأخرج الشريحة بحذر على لوح معقم من لوح الفلين باستخدام القفازات.
< p class = "jove_title" >6. أخذ عينات الأنسجة

  1. افحص الشريحة المستعرضة بصريا وقارنها بصورة التصوير بالرنين المغناطيسي المحورية. في بعض الحالات، قد تبدو منطقة الورم شاحبة من الأنسجة المحيطة.
  2. جس الشريحة المستعرضة برفق. في بعض الحالات، قد يشعر الورم بمزيد من التماسك من الأنسجة المحيطة.
  3. باستخدام صورة التصوير بالرنين المغناطيسي المحوري كدليل، حدد منطقة واحدة أو أكثر لأخذ العينات.
  4. خذ لكمات الخزعة من المنطقة المرغوبة من الأنسجة.
    1. باستخدام لكمة 6 مم ، اضغط لأسفل على المنطقة المرغوبة من الأنسجة.
    2. قم بلف ثقب المناديل على الفور ولأسفل على الفلين لضمان الفصل الكامل واستخدم مشرطا حادا للفصل إذا لزم الأمر.
    3. قم بإزالة الثقب وضعه في أنابيب / قوالب حسب الضرورة عن طريق الإخراج باستخدام المكبس.
    4. كرر ذلك لمزيد من العينات من الورم والعينات الحميدة حسب الحاجة، مع لكمات خزعة معقمة منفصلة. حبر الثقوب التي تم فيها أخذ اللكمات باللون الأحمر.
    5. لاحظ موقع كل لكمة مع وزن البروستاتا وأي ملاحظات على لون / صلابة الأنسجة.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

p class = "jove_content" fo: keep-together.within-page = "1" >figure-results-1
الشكل 1: جهاز تقطيع البروستاتا.(أ) يتم إدخال الجدران بشكل عمودي على القاعدة ، ويتم إدخال دبابيس ذهبية في القاعدة المحيطة بالبروستاتا (البروستاتا غير مصورة). (ب) يتم إدخال الشفرات المتوازية القابلة للاستبدال في مقبض الشفرة. (ج) تمر الشفرات بين المسامير الذهبية لتقطيع قسم 5 مم من البروستاتا

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

لم يتم الإعلان عن أي تضارب في المصالح.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة الاسم الشركة رقم فهرسي التعليقات لكمة خزعة 6 مم فيشر ساينتيك 13404607 لكمات خزعة يمكن التخلص منها لإزالة عينات الأنسجة 6 مم الحبر الأسود لايكا بيوأنظمة 3801753 علامات الأنسجة وصبغة الهامش الحبر الأزرق لايكا بيوأنظمة 3801751 علامات الأنسجة وصبغة الهامش قفاز يد Chainmail اركو 1456803 قفازات Chainmail لحماية اليد أثناء التقطيع لوح الفلين فيشر ساينتيك 12396447 لوح الفلين لتثبيت البروستاتا على اتباع إجراء أخذ العينات ابر SLS (مستلزمات المختبرات العلمية) SYR6112 إبر معقمة لاستخدامها لتثبيت الأنسجة على لوح الفلين بعد أخذ العينات تقطيع البروستاتا aparatus معهد أبحاث السرطان ، لندن NA - يجب الحصول عليها بموجب MTA مجموعة تحتوي على مقبض القطاعة والشفرات والمباعدة والقاعدة والجدران والدبابيس

الوسوم