استخراج الفص الفردي من البروستاتا: تقنية لحصاد فصوص البروستاتا الفردية من البروستاتا الفأرية

الملخص

المصدر: Nath، D. et al. تحديد التعريف والتوصيف النسيجي وتشريح فصوص البروستاتا في الفأر لنماذج الثقافة الكروية ثلاثية الأبعاد في المختبر. J. Vis. Exp. (2018)

يصف هذا الفيديو تقنية لحصاد الفصوص الفردية من غدة البروستاتا في نموذج الفأر. يمكن بعد ذلك استخدام الفصوص الفردية للتحليل النسيجي وأبحاث السرطان.

البروتوكول

تمت مراجعة جميع الإجراءات المتعلقة بالحيوانات من قبل اللجنة المؤسسية المحلية لرعاية ومجلس المراجعة البيطرية JoVE.

1. التشريح الإجمالي للبروستاتا والتشريح المجهري للفص الفردي

< p class = "jove_content" >ملاحظة: هذا موضح في الشكلين 1 (i-n) والشكل 2

1. اقلب الأنسجة بزوج من الملقط الحاد بحيث يكون الجانب الظهري متجها لأعلى ، مما يظهر الفصوص الظهرية التي تشبه أجنحة الفراشة.
2. اجمع الفصوص الظهرية عن طريق إمساك الفص بالملقط وقص القاعدة بالمقص (الشكل 1 ي).
3. اقلب الأنسجة المتبقية إلى الجانب البطني.
4. اجمع الفصوص الجانبية ، وهي صغيرة وعادة ما تلف مجرى البول على الجانب ، والتي يتم تثبيتها بين الفصوص الأمامية والبطنية والظهرية (الشكل 1 ك).
5. بعد ذلك ، اجمع الفصوص البطنية ، وهي أكبر من الفصوص الجانبية وتقع على مجرى البول بطنيا (الشكل 1l).
6. أخيرا ، احصد الفصوص الأمامية ، الأكبر من بين الأربعة ، عن طريق قطع مجرى البول والتخلص منه (الشكل 1 م).
7. معالجة قطع المناديل وفقا للاحتياجات التجريبية.

النتائج

الشكل 1: تشريح البروستاتا في الفأر. صور خطوة بخطوة لتشريح البروستاتا الفأرية من UGS: (أ) إزالة الدهون ، (ب) إزالة المثانة البولية ، (ج) إزالة الأسهر ، (د) الرؤية البطنية للبروستاتا مع مجرى البول ، (ه) المنظر الظهري للبروستاتا مع مجرى البول ، (f-h) إزالة الحويصلات المنوية ، (ط) منظر ب...

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة الاسم الشركة رقم فهرسي التعليقات الأدوات الجراحية للفأر (مجموعة تشريح الفأر) أدوات الدقة العالمية موسكيت مجهر تشريح RPMI متوسط ثيرموفيشر العلمي 11875093 وسيط التشريح (DMEM + 10٪ FBS) ثيرموفيشر العلمي 11965-084 مصل الأبقار الجنينية ثيرموفيشر العلمي 10438018 PBS (محلول ملحي مخزن بالفوسفات) ثيرموفيشر العلمي 10010031 كولاجيناز ثيرموفيشر العلمي 17018029 اصنع 10x مخزون (10 مجم / مل) في RPMI ، وقم بتعقيمه ، وتخزينه عند -20 درجة مئوية المحاقن والإبر فيشر ساينتيك