مقالة منهجية

إزالة البارافينات وإعادة ترطيب أقسام الأنسجة: إجراء من خطوتين لإزالة شمع البارافين من شرائح أنسجة FFPE متبوعا بتجفيف الأنسجة

أبريل 30, 2023

في هذه المقالة

الملخص

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

المصدر: Sugimoto, K. et al. تحليل على مستوى الجينوم لمثيلة الحمض النووي في سرطان الجهاز الهضمي. J. Vis. Exp. (2020)

في هذا الفيديو ، نوضح معالجة FFPE أو أقسام البارافين الثابتة بالفورمالين التي تم الحصول عليها من أنسجة ورم الجهاز الهضمي. تسمح خطوات إزالة البارافين وإعادة الجفاف بمعالجة عينة الأنسجة للتطبيقات التحليلية اللاحقة.

البروتوكول

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تم تنفيذ جميع الإجراءات التي تشمل مشاركين بشريين وفقا للمبادئ التوجيهية المؤسسية والوطنية والدولية لرفاه الإنسان وتم استعراضها من قبل مجلس المراجعة المؤسسية المحلي.

< p class = "jove_title" >1. غسل الشرائح

  1. قم بإعداد 10 ميكرومتر من أقسام البارافين المثبتة بالفورمالين (FFPE) غير الملوثة.
  2. ضع الشرائح في حامل شرائح زجاجي: استخدم حوالي 3-5 أكبر شرائح مقطعية ما لم تكن الأنسجة ضئيلة ، وهناك حاجة إلى المزيد من الشرائح.
  3. املأ حامل الشريحة بالزيلين ، وتأكد من غمر جميع الأنسجة الموجودة على الشريحة. اتركيه لمدة 15 دقيقة.
  4. بعد 15 دقيقة ، اسكب الزيلين مع الشرائح المثبتة بطرف ماصة حتى لا تسقط الشرائح.
  5. صب المزيد من الزيلين إلى نفس المستوى كما كان من قبل. اتركيه لمدة 15 دقيقة أخرى.
  6. بعد 15 دقيقة ، اسكب الزيلين مرة أخرى.
  7. املأ حامل الشريحة بالإيثانول بنسبة 100٪ (EtOH) ، وتأكد من غمر جميع الأنسجة الموجودة على الشريحة بالكامل. اتركيه لمدة 3 دقائق.
  8. اسكب EtOH مع الإمساك بالشرائح بعناية. أعد التعبئة إلى نفس المستوى بمزيد من EtOH. اتركيه لمدة 2 دقيقة.
  9. اسكب EtOH مرة أخرى وقم بإزالة الشريحة. ضعها بعناية على منشفة ورقية نظيفة حتى تجف. اتركيه لمدة 10 دقائق.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
لم يتم الإعلان عن أي تضارب في المصالح.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة الاسم الشركة رقم فهرسي التعليقات الزيلين سيجما ألدريتش 214736 100٪ إيثانول سيجما ألدريتش هاتف: 24194

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

Xylene TreatmentEthanol GradientTissue SectioningHistological PreparationParaffin RemovalTissue ProcessingSlide Holder

مقالات ذات صلة