مقالة منهجية

تقسيم الكرويات للزراعة الفرعية والشحن: إجراء لتكاثر ونقل الكرويات من ورم الغدد الصم العصبية في الأمعاء الدقيقة

أبريل 30, 2023

في هذه المقالة

الملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

المصدر: Ear ، P. H. et al. إنشاء وتوصيف الورم العصبي الصماوي في الأمعاء الدقيقة (2019)

يوضح هذا الفيديو استراتيجية لتقسيم ونشر الكرات الكروية التي تم تطويرها من خلايا ورم الغدد الصم العصبية في الأمعاء الدقيقة. تحتوي هذه الكرات على علامات ورم الغدد الصم العصبية في الأمعاء الدقيقة ويمكن نشرها واستخدامها أيضا لاختبار الأدوية المضادة للسرطان.

البروتوكول

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. تقسيم SBNET Spheroids

ملاحظة: يتم ذلك للتوسع والمشاركة مع الباحثين الآخرين.

  1. استخدم ماصة P1000 لكسر ECM ميكانيكيا وشفط ECM باستخدام كرويات SBNET إلى أنبوب معقم سعة 1.5 مل.
  2. جهاز طرد مركزي عند 1,000 × جم عند 4 درجات مئوية ، قم بإزالة كل المادة الطافية وضع الأنبوب على الجليد.
  3. أضف 2-4 أضعاف حجم ECM الجديد إلى الحبيبات. امزج ECM الجديد مع كرويات ECM و SBNET القديمة عن طريق سحب العينات لأعلى ولأسفل 10 أضعاف ، وتجنب إدخال فقاعات الهواء.
  4. انقل 5-20 ميكرولتر من خليط ECM و SBNET الكروي إلى لوحة جديدة واسمح ل ECM بالتصلب.
  5. قم بتغطيتها بوسيط SBNET جديد ونقلها إلى الحاضنة. معدل التعافي حوالي 95٪ إلى 100٪.
  6. لشحن كرويات SBNET إلى مختبر آخر ، قم بنقل كرويات SBNET مع ECM جديد إلى قارورة T25 واسمح ل ECM بالتصلب.
  7. املأ قارورة T25 بوسط كروي SBNET ، وقم بربط الغطاء بإحكام ، وقم بإعداد حزمة الشحن.
  8. عند تلقي مزرعة كروية SBNET ، قم بإزالة وسيط الثقافة وقم بتنفيذ الخطوات من 1.1 إلى 1.5 لإعادة كرويات SBNET إلى الثقافة.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
لم يتم الإعلان عن أي تضارب في المصالح.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة الاسم الشركة رقم فهرسي التعليقات DMEM جيبكو 11965-092 وسط لتحضير الأنسجة DMEM / F-12 جيبكو هاتف: 11320-033 وسيط للثقافات العضوية FBS جيبكو 16000044 كاشف لوسائط الثقافة الجلوتامين جيبكو A2916801 كاشف لوسائط الثقافة إنسولين سيغما I0516 كاشف لوسائط الثقافة ماتريجيل كورنينج 356235 مصفوفة لتضمين وتثبيت
العضيات نيكوتيناميد سيغما 72340 كاشف لوسائط الثقافة القلم / البكتيريا جيبكو 15140-122 كاشف لوسائط الثقافة

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

مقالات ذات صلة