تكميم المعدة العمودي للفئران: إجراء جراحي لتقليص حجم المعدة في نماذج الفئران التجريبية

الملخص

المصدر: Garibay ، D. ، Cummings ، B. P. نموذج الفئران لاستئصال المعدة العمودي. J. Vis. Exp. (2017)

في هذا الفيديو ، يتم إجراء عملية تكميم المعدة العمودي على نموذج فأر تجريبي. يساعد هذا الإجراء على إزالة جزء كبير من المعدة على طول انحناءها الأكبر.

البروتوكول

تمت مراجعة جميع الإجراءات التي تنطوي على نماذج حيوانية من قبل لجنة رعاية المؤسسية المحلية ومجلس المراجعة البيطرية JoVE.

< p class = "jove_title" >1. تكميم المعدة العمودي وإجراءات الشام

1. في يوم الجراحة ، قم بوزن الفئران للحصول على قياس الوزن الأساسي.
2. تجهيز غرفة الجراحة بنظام تخدير وحمام مائي ساخن ووسادة تدفئة. اضبط الحمام المائي على 37 درجة مئوية واستخدمه لتسخين محلول ملحي بنسبة 0.9٪ للري. نظف المجال الجراحي بنسبة 70٪ من الإيثانول واستخدم تقنية معقمة لفتح عبوة وأدوات الجراحة المعقمة.
   ملاحظه: تستخدم وسادة التدفئة للحفاظ على دفء أثناء الجراحة والتعافي من التخدير.
3. باستخدام غرفة الحث ، قم بتخدير الفأر بمعدل تدفق 5٪ من الأيزوفلوران و O₂ بمعدل تدفق 1 لتر / دقيقة. تأكد من أن الفأر في مستوى التخدير المناسب عن طريق إجراء قرصة إصبع القدم. حافظ على الماوس بنسبة 1-3٪ من الأيزوفلوران ومعدل تدفق O₂ يبلغ 0.6 لتر / دقيقة بمجرد تحقيق مستوى متسق من التخدير.
4. بمجرد تخدير الفأر ، ضع مرهم العين (انظر جدول المواد) على عينيه للحفاظ على رطوبتها أثناء الجراحة. في هذا الوقت، يجب أيضا إعطاء مسكن مثل ميلوكسيكام (2 ملغم/كغ تحت الجلد). قص الشعر من السرة إلى الإبط مع إمساك الجلد برفق لتوفير التوتر.
   1. نظرا لأن جلد الفأر رقيق وحساس ، احرص على عدم التسبب في آفات جلدية عند قص الشعر. نظف البشرة بالبوفيدون واليود والكحول.
   2. ارتد قفازات معقمة وقم بإعداد المجال والأدوات الجراحية المعقمة. قم بتنفيذ بقية الإجراء باستخدام تقنية معقمة. قم بإعداد مجال جراحي معقم عن طريق وضع ستائر جراحية معقمة على جانبي الماوس. استخدم رقائق القصدير المعقمة لإنشاء ستارة جراحية للماوس.
   3. اقطع ثقبا صغيرا في رقائق القصدير للسماح بالوصول إلى بطن الفأر.
5. قم بعمل شق في الجلد من منتصف البطن (السرة) إلى مستوى الغضروف الخنجري باستخدام مقص القزحية. حدد الخط ألبا واستخدم مقص القزحية لقطع جدار الجسم على طول الخط الآلبا. استخدم CTAs لرفع المعدة برفق من البطن ثم تشريح الثرب الأكبر بصراحة من الانحناء الأكبر للمعدة
6. اربط الشريان المعدي القصير الذي يمتد بين قاع المعدة والطحال عن طريق وضع ربطين باستخدام خياطة قابلة للامتصاص أحادية الشعيرات 7-0. استخدم مقص زنبركي للقطع بين الرباطين. بمجرد أن يتم نقل الشريان ، قم بإخراج المعدة بالكامل من تجويف البطن. ضع الشاش تحت المعدة وبلل بالمحلول الملحي للحفاظ على رطوبة الأنسجة.
7. بالنسبة لإجراء VSG ، قم بربط الفروع البارزة للشريان المعدي والوريد بخيطة قابلة للامتصاص أحادية الشعيرات 7-0 بإبرة مستدقة باستخدام 3 رميات لكل عقدة. ضع الأربطة أسفل (أي باتجاه الانحناء الأصغر للمعدة) الخط المقصود للقطع.
   ملاحظه: يبدأ الخط المقصود للقطع عند ~ 2 مم أعلاه (بمعنى نحو انحناء أكبر للمعدة) الشق القلبي للمعدة وعلى الأقل 2 مم أسفل margo pilcatus ويمتد إلى الطرف القريب من الفص الأيمن للبنكرياس. عادة ، هناك 4 أوعية لكل جدار معدي تحتاج إلى ربط. ومع ذلك ، قد يختلف هذا بين الفئران.
   1. لمنع انسكاب محتويات المعدة أثناء استئصال المعدة ، ضع خطا بسيطا مستمرا من الخيط يمر عبر جداري المعدة أسفل خط القطع المقصود مباشرة باستخدام خياطة قابلة للامتصاص 6-0 أحادية الشعيرات بإبرة مستدقة. ابدأ خط الخياطة على يمين المريء وأسفل مارجو بيلكاتوس وانتهي فوق البنكرياس مباشرة.
   2. ضع المرقئ ذو الرؤوس الرفيعة فوق خط الخياطة واستخدم مقص زنبركي للقطع بين خط الخياطة والمرقئ. إزالة أنسجة المعدة المنقولة من المجال الجراحي المعقم. استخدم CTAs لتنظيف الدم وهضمه من المعدة.
   3. تعزيز وضع جدران المعدة باستخدام خياطة قابلة للامتصاص أحادية 6-0 بإبرة تفتق باستخدام نمط متقطع بسيط.
      ملاحظه: يوصى باستخدام نمط خياطة بسيط متقطع لأن هذا يوفر إغلاقا أكثر أمانا من نمط الخياطة المستمر البسيط.
   4. اغسل بقايا المعدة بالمحلول الملحي طوال العملية للحفاظ على رطوبة الأنسجة ونظافتها. استخدم إبرة تزقيم 20 جم متصلة بحقنة سعة 20 مل لإجراء غسل المعدة بالمحلول الملحي. استخدم هذا الحجم لضمان توفير الضغط الكافي دون المخاطرة بتلف أنسجة المعدة من الضغط المفرط أو تلف أنسجة المعدة العرضي من استخدام إبرة مدببة عادية.
   5. استخدم ما لا يقل عن 20 عقدة لإغلاق المعدة بشكل آمن ؛ انتبه إلى الإغلاق على طول جانب المريء ، حيث يصعب الوصول إلى هذا الجانب وبالتالي غالبا ما يكون موقعا للتفكك.
   6. تأكد من عدم وجود تسرب عن طريق الضغط برفق على المعدة باستخدام CTAs. إذا تم تحديد التسريبات ، فضع عقدة متقطعة بسيطة إضافية على مناطق التسرب ثم اختبار التسرب مرة أخرى. اختبار التسرب حتى لا يتم الكشف عن التسرب.
   7. قم بغسل المعدة بشكل نهائي باستخدام 60 مل على الأقل من المحلول الملحي لضمان عدم ترك أي جسيمات معدية.
8. ضع المعدة مرة أخرى في تجويف البطن تحت الكبد باستخدام CTA. ضع CTAs على طول الجانب الظهري من تجويف البطن لامتصاص كل السوائل الزائدة. باستخدام إبرة حادة 18 جم ، قم بحقن محلول Ringer المرضع (LRS) مع أو بدون مضادات حيوية (0.5 مل LRS +/- 20 مجم / كجم Enrofloxacin) مباشرة في تجويف البطن ، قبل الإغلاق مباشرة.
   ملاحظه: يحل هذا محل فقدان السوائل أثناء الجراحة ويوفر طريقة للتطبيق المباشر للمضادات الحيوية في موقع الجراحة للمساعدة في الشفاء.
9. أغلق طبقة عضلات البطن باستخدام خياطة قابلة للامتصاص أحادية الشعيرات 6-0 بإبرة مستدقة بنمط متقطع بسيط. بعد ذلك ، أغلق طبقة الجلد بخيط قابل للامتصاص 6-0 أحادي الشعيرات بنمط مستمر بسيط.
10. ضع لاصقا للأنسجة على الجلد وقم بطي الجلد فوق خط الخياطة لدفن الخيط حتى لا يعطل الفأر إغلاق الجرح بعد الجراحة.
11. قم بإيقاف تشغيل الأيزوفلوران واترك الماوس يتعافى على وسادة التدفئة لمدة 10-15 دقيقة قبل إعادته إلى قفص منزله. لا تترك دون رقابة حتى يستعيد وعيه ويصبح قادرا على الحركة.
12. احتفظ بالحيوانات منفردة حتى تتعافى تماما من الجراحة.
    ملاحظه: إذا تم الحصول على قياسات دقيقة لتناول الطعام طوال الدراسة ، فيجب الاستمرار في إيواء الفئران منفردة طوال الدراسة. هناك خطر انسداد الأجسام الغريبة من أكل فراش القفص المنزلي. يجب إيواء في أقفاص خالية من الفراش باستثناء مواد التعشيش لتوفير التخصيب (انظر جدول المواد).

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة الاسم الشركة رقم فهرسي التعليقات 6-0 خياطة إيثيكون Z432 monofilamentامتصاص / تفتق 7-0 خياطة كوفيديان 8866127-01 monofilamentامتصاص / تفتق مسحات القطن فيشربراند 23-400-118 صغير مسحات القطن فيشربراند 233-400-101 كبير فَشَّلَ مختلف ستارة الجراحة مختلف محلول ملحي 0.9٪ مختلف سائق الإبرة الدقيقة أدوات العلوم الدقيقة 12075-14 مقص الربيع أدوات العلوم الدقيقة 15396-00 كحول مختلف مرهم العين Paralube®مرهم بيطري هاتف: 17033-211-38 ميلوكسيكام (ميتاكام) بوهرنجر إنجلهايم 141-213 5 ملغ/مل مرقئ رفيع الرؤوس أدوات العلوم الدقيقة 13021-12 حقنة 20 مل مختلف إنروفلوكساسين بيتريل 08713254-186599 22.7 ملغ/مل