مقالة منهجية

استخراج العضلات الهيكلية الخلفية للأطراف: إجراء لاستئصال عضلات الهيكل العظمي للأطراف الخلفية من نموذج الفئران

8.7K مشاهدات

أبريل 30, 2023

في هذه المقالة

الملخص

المصدر: Bonetto, A. et al. الفأر الحامل لورم سرطان القولون 26 كنموذج لدراسة دنف السرطان. J. Vis. Exp. (2016)

في هذا الفيديو ، نصف إجراء استئصال عضلات الهيكل العظمي للأطراف الخلفية من نموذج الفأر. يمكن تخزين العضلات المستئصولة في درجات حرارة منخفضة حتى مزيد من التحليل النهائي.

البروتوكول

تمت مراجعة جميع الإجراءات التي تنطوي على نماذج حيوانية من قبل لجنة رعاية المؤسسية المحلية ومجلس المراجعة البيطرية JoVE.

< p class = "jove_title" >1. استئصال الأنسجة والأعضاء

ملاحظة: لاستخدام الأنسجة في فحوصات البيولوجيا الكيميائية الحيوية أو الجزيئية ، خطط لوزن كل عضو وأنسجة ووضع جزء على الفور في أنابيب التبريد المسماة. قم بالتجميد في النيتروجين السائل وتخزينه في درجة حرارة -80 درجة مئوية.

  1. من أجل تجنب تلوث عينات الأنسجة بالفراء ، رش 70٪ من الإيثانول على الجسم بالكامل.
  2. ضع الفأر على سرير تشريح في وضع ضعيف ومد طرفه عموديا عن طريق ربط القدم بمشبك سحاحة مرتفع.
  3. أمسك جلد الطرف السفلي باستخدام ملقط دومون ، واستخدم المقص الدقيق المنحني لإزالة الجلد واللفافة برفق ، مما يؤدي إلى تعريض بطون العضلات الأساسية للطرف السفلي.
  4. التعرف على عضلة المعدة في الطرف السفلي الخلفي من خلال أصلها في اللقمة الجانبية والإنسية على عظم الفخذ الخلفي وإدخالها في العقبي عبر الوتر العقبي.
    1. المضي قدما في قطع وتر المعدة العقبي. أمسك الطرف البعيد من المعدة باستخدام ملقط دومون واسحب بطن العضلات نحو أصلها. باستخدام المقص ، قم بقطع العضلات في الأصل في أقرب وقت ممكن من عظم الفخذ. ضع العضلات في طبق. قم بوزنه على الفور وقم بتجميده في أنبوب من النيتروجين السائل.
      ملاحظه: تأكد من عدم استئصال العضلة الوحيدة مع المعدة إذا حدث ذلك ، فقم بإزالة النعل بعناية عن طريق سحبه برفق باستخدام الملقط.
  5. المضي قدما في تحديد واستئصال العضلة الأمامية الظنبوب من أصلها في السطح الأمامي الوحشي للظنبوب وإدخالها في الكتابة المسمارية الإنسية عبر الوتر البعيد.
    1. من أجل الحصول على رافعة مالية ، امسك القدم عن طريق الإمساك بالأرقام بإصبع السبابة والإبهام. أدخل طرف ملقط دومون مباشرة تحت الوتر البعيد السطحي للظنبوب وحرك الملقط بحيث يمكن استخدام الجانب الحاد لفصل بطن عضلة الظنبوب عن النسيج الضام الأساسي.
    2. اقطع الوتر البعيد باستخدام المقص المنحني الناعم ثم اقطع العضلة في الأصل في أقرب وقت ممكن من الساق.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

لم يتم الإعلان عن أي تضارب في المصالح.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة الاسم الشركة رقم فهرسي التعليقات الفئران CD2F1 هارلان 60 جهاز التخدير EZ-التخدير EZ-7000 اكتوبر الأنسجة تيك 4583 كرايوستات لايكا سم 1850 أقراص الفلين علوم المجهر الإلكتروني 63305 ميكروتينر دينار بحريني 365873 شرائح زجاجية Superfrost plus VWR 48311-703 الستربتومايسين البنسلين سيلجرو 30-002-CI

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

Gastrocnemius Tibialis Anterior

مقالات ذات صلة