اكتشاف إشارة الحمض النووي الريبي CISH: تقنية للكشف عن الإشارات الكروموجينيكية أثناء تهجين الحمض النووي الريبي في الموقع في عينات الأنسجة السليمة

الملخص

المصدر: Outh-Gauer ، S. et al. التهجين الموضعي الكروموجينيك كأداة لتشخيص سرطان الرأس والرقبة المرتبط بفيروس الورم الحليمي البشري. J. Vis. Exp. (2019)

يقدم هذا الفيديو بروتوكول الكشف عن الإشارة أثناء تهجين الحمض النووي الريبي الكروموجيني في الموقع. يمكن استخدام هذه التقنية لتشخيص عدوى الأورام النشطة بصريا في عينة الأنسجة السليمة.

البروتوكول

< p class = "jove_title" >1. تحضير الكواشف المضادة للتلطيخ

1. تحضير 50٪ هيماتوكسيلين.
   1. في غطاء الدخان ، أضف 100 مل من هيماتوكسيلين جيل الأول (انظر جدول المواد) إلى 100 مل من الماء المقطر في طبق تلطيخ.
      ملاحظه: يمكن إعادة استخدام محلول تلطيخ الهيماتوكسيلين بنسبة 50٪ لمدة تصل إلى أسبوع واحد.
2. تحضير 0.02٪ (وزن / حجم) ماء الأمونيا (كاشف أزرق).
3. في غطاء الدخان ، أضف 1.43 مل من هيدروكسيد الأمونيوم 1 نيوتن إلى 250 مل من الماء المقطر في أسطوانة متدرجة أو حاوية أخرى. ختم الاسطوانة بغشاء البارافين. امزج محتوياته جيدا لمدة 3x-5x.
   ملاحظه: لقياس كمية الفحص ، من الأهمية....

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة الاسم الشركة رقم فهرسي التعليقات محلول الهيماتوكسيلين ، الخياشوم رقم 1 ميرك جي إتش إس 132 RNAscope 2.5 كواشف الكشف عالي الدقة - براون شركة تشخيص الخلايا المتقدمة هاتف: 322310 تتضمن هذه المجموعة كواشف التضخيم AMP1 و AMP2 و AMP3 و AMP4 و AMP5 و AMP6 وكواشف الكشف DAB-A و DAB-B مسبار RNAscope - HPV16 / 18 شركة تشخيص الخلايا المتقدمة 311121 رف منزلق HybEZ شركة تشخيص الخلايا المتقدمة 300104 ImmEdge قلم حاجز مسعور شركة تشخيص الخلايا المتقدمة 310018