Method Article

اكتشاف إشارة الحمض النووي الريبي CISH: تقنية للكشف عن الإشارات الكروموجينيكية أثناء تهجين الحمض النووي الريبي في الموقع في عينات الأنسجة السليمة

April 30th, 2023

In This Article

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

المصدر: Outh-Gauer ، S. et al. التهجين الموضعي الكروموجينيك كأداة لتشخيص سرطان الرأس والرقبة المرتبط بفيروس الورم الحليمي البشري. J. Vis. Exp. (2019)

يقدم هذا الفيديو بروتوكول الكشف عن الإشارة أثناء تهجين الحمض النووي الريبي الكروموجيني في الموقع. يمكن استخدام هذه التقنية لتشخيص عدوى الأورام النشطة بصريا في عينة الأنسجة السليمة.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
< p class = "jove_title" >1. تحضير الكواشف المضادة للتلطيخ

  1. تحضير 50٪ هيماتوكسيلين.
    1. في غطاء الدخان ، أضف 100 مل من هيماتوكسيلين جيل الأول (انظر جدول المواد) إلى 100 مل من الماء المقطر في طبق تلطيخ.
      ملاحظه: يمكن إعادة استخدام محلول تلطيخ الهيماتوكسيلين بنسبة 50٪ لمدة تصل إلى أسبوع واحد.
  2. تحضير 0.02٪ (وزن / حجم) ماء الأمونيا (كاشف أزرق).
  3. في غطاء الدخان ، أضف 1.43 مل من هيدروكسيد الأمونيوم 1 نيوتن إلى 250 مل من الماء المقطر في أسطوانة متدرجة أو حاوية أخرى. ختم الاسطوانة بغشاء البارافين. امزج محتوياته جيدا لمدة 3x-5x.
    ملاحظه: لقياس كمية الفحص ، من الأهمية....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
لم يتم الإعلان عن أي تضارب في المصالح.

Materials

List of materials used in this article Name Company Catalog Number Comments محلول الهيماتوكسيلين ، الخياشوم رقم 1 ميرك جي إتش إس 132 RNAscope 2.5 كواشف الكشف عالي الدقة - براون شركة تشخيص الخلايا المتقدمة هاتف: 322310 تتضمن هذه المجموعة كواشف التضخيم AMP1 و AMP2 و AMP3 و AMP4 و AMP5 و AMP6 وكواشف الكشف DAB-A و DAB-B مسبار RNAscope - HPV16 / 18 شركة تشخيص الخلايا المتقدمة 311121 رف منزلق HybEZ شركة تشخيص الخلايا المتقدمة 300104 ImmEdge قلم حاجز مسعور شركة تشخيص الخلايا المتقدمة 310018

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

RNA In Situ HybridizationChromogenic Signal DetectionDAB Substrate IncubationHorseradish Peroxidase ProbeHematoxylin CounterstainingTissue Section DehydrationLight Microscopy VisualizationBrown Precipitate FormationMounting Solution ApplicationOptical Microscope Evaluation

Related Articles