$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
فئة
1. تصنيع الناقل الدقيق المشتق من ECM عن طريق الرش الكهربائي
ملاحظة: تظهر نظرة عامة على إعداد الرش الكهربائي في الشكل 1.
- احتضان نظام تعليق ECM المبرد المعد مسبقا عند 37 درجة مئوية مع تحريك مستمر عند 100 دورة في الدقيقة O / N.
ملاحظه: يتم استخدام ECM المطحون بالتبريد لتصنيع الناقلات الدقيقة المشتقة من ECM لضمان قدر أكبر من التوحيد في التعليق ومنع الانسداد أثناء الرش الكهربائي.
- قم بتحميل 3 مل من نظام التعليق ECM في حقنة Luer-Lock سعة 3 مل وقم بتوصيل مجموعة التسريب المجنح على تجويف المحقنة.
ملاحظه: يمكن استخدام مجموعة من مقاييس الإبرة ، مع الاعتراف بأن الاختيار قد يؤثر على حجم وشكل الناقلات الدقيقة الناتجة. لتصنيع الناقلات الدقيقة DAT و DDT و DLV ، استخدم إبرة 25G.
- قم بتأمين المحقنة داخل مضخة المحقنة. اربط الإبرة بحامل معوج وضع طرف الإبرة عموديا على مسافة 4-6 سم من أعلى قارورة ديوار منخفضة الشكل (يوصى بنطاق حجم 250-500 مل).
- قم بتوصيل قطب مشبك التمساح بطرف الإبرة وقم بتوصيله بالطرف الموجب لمصدر الطاقة عالي الجهد.
- قم بطي شريط من رقائق الألومنيوم (12 × 5 سم) على حافة قارورة التفريغ.
- قم بتوصيل قطب مشبك تمساح ثان بالحافة الخارجية للرقائق وقم بتوصيله بطرف المصدر الأرضي لمصدر الطاقة.
- املأ قارورة ديوار بالنيتروجين السائل على بعد حوالي 1 سم من الأعلى بحيث يتم غمر 3/4 من الرقاقة. < / >
ملاحظه: من المهم إبقاء قارورة ديوار مليئة بالنيتروجين السائل. يجب ألا يقل سطح النيتروجين السائل عن 2 سم من أعلى القارورة أثناء عملية الرش الكهربائي. مطلوب إعادة تعبئة مستمرة للنيتروجين السائل للحفاظ على مستوى ثابت أثناء الرش الكهربائي.
- اضبط مضخة الحقنة على معدل تسريب 30 مل / ساعة.
ملاحظه: يمكن أن يؤدي تغيير معدل التسريب إلى تغيير شكل الناقل الدقيق وقطره ، لكن النطاق الموصى به هو 25-35 مل / ساعة. في حين أنه يعتمد بشكل كبير على لزوجة التعليق ، فإن معدلات التدفق التي تقل عن 25 مل / ساعة قد تؤدي إلى توليد ناقلات دقيقة أكبر. عند معدلات تدفق منخفضة جدا ، قد يصبح حجم وشكل الناقلات الدقيقة أقل تجانسا. عند معدلات التسريب التي تزيد عن 35 مل / ساعة ، قد يتعطل توحيد القطرات المتولدة عن طريق الرش الكهربائي ، مما يؤدي إلى ناقلات دقيقة غير كروية ذات توزيع حجم أوسع.
- قم بتطبيق جهد 20 كيلو فولت وقم بتشغيل مضخة المحقنة لبدء الرش الكهربائي.
ملاحظه: قد يختلف الجهد لضبط حجم الناقلات الدقيقة ويميل إلى أن يكون له تأثير أكبر على القطر من معدل التسريب. نطاق الجهد الموصى به هو 15-25 كيلو فولت. من المتوقع حدوث انخفاض في قطر الموجة الحاملة الدقيقة مع زيادة الجهد.
- بمجرد اكتمال التسريب ، اسكب النيتروجين السائل الزائد بعناية من Dewar ، تاركا الناقلات الدقيقة معلقة في ~ 25 مل من النيتروجين السائل لضمان بقائها مجمدة.
- انقل الناقلات الدقيقة على الفور مع النيتروجين السائل إلى أنبوب طرد مركزي سعة 50 مل عن طريق الصب بحركة واحدة سلسة. اجمع أي ناقلات صغيرة مجمدة متبقية في ديوار باستخدام مغرفة وأضفها إلى أنبوب الطرد المركزي. < / >
ملاحظه: اعتمادا على حجم Dewar ، يمكن سكب الناقلات الدقيقة في النيتروجين السائل في البداية في وعاء متوسط الحجم ثم نقلها على الفور إلى أنبوب الطرد المركزي سعة 50 مل.
- قم بتغطية أنبوب الطرد المركزي الذي يحتوي على الناقلات الدقيقة في النيتروجين السائل بورق الألمنيوم المثقوب بثقوب صغيرة استعدادا للتجميد بالتجميد.
- ضع أنابيب الطرد المركزي المغطاة في قارورة مجففة. قم بتوصيل القارورة على الفور بالمجفف بالمجفف وجفف العينات O / N.
ملاحظه: من المهم جدا إبقاء الناقلات الدقيقة معلقة في النيتروجين السائل للتأكد من عدم ذوبان الجليد قبل هذه الخطوة ، حيث قد يؤدي الذوبان إلى الانهيار و / أو التجميع. عادة ما يكون للناقلات الدقيقة DAT و DDT و DLV المصنعة بتركيز 35 مجم / مل باستخدام ظروف الرش الكهربائي الموضحة أعلاه قطر رطب يتراوح بين 350-500 ميكرومتر في الحجم. قد يختلف توزيع الحجم حسب مصدر ECM.
- قم بتخزين الناقلات الدقيقة المجففة بالتجميد في مجفف لحين الحاجة.
