$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
تمت مراجعة جميع الإجراءات التي تنطوي على نماذج حيوانية من قبل لجنة رعاية المؤسسية المحلية ومجلس المراجعة البيطرية JoVE.
< p class = "jove_title" >
1. حصاد النخاع الشوكي
- قتل الماوس باستخدام غرفة ثاني أكسيد الكربون2. تجنب خلع عنق الرحم لأنه قد يتسبب في تلف جذور العقدة بسبب قوى القص. من الآن فصاعدا ، قم بتنفيذ جميع الخطوات في ظل ظروف معقمة.
- نقع مع 70 ٪ الإيثانول. هذه الخطوة مهمة للتعقيم ومنع الشعر من السحب عبر الأعضاء الداخلية.
- اترك الماوس ليجف من الإيثانول. منع أي ملامسة للإيثانول مع الأعضاء الداخلية بسبب السمية العصبية.
- بعد تجفيف الماوس ، ضعه باستخدام المسامير في وضع الانبطاح (وجهه لأسفل). ضع المسامير على كل طرف خلفي وطرف أمامي.
- باستخدام الملقط ، قم بعمل شق خط الوسط يمتد قحفي ذيليا من الرقبة الخلفية إلى العمود الفقري القطني. بعد ذلك ، ارفع اللوحات الجلدية بشكل ثنائي باستخدام الملقط وكشف الأنسجة تحت الجلد.
- جمجمة الفأر حتى تصل إلى التقاطع القحفي العنقي. باستخدام مقص عمودي على ، قم بقطع عضلات عنق الرحم والعمود الفقري عند التقاطع القحفي العنقي (فقراتعنق الرحم 7) ، باستخدام ملقط ثقيل. قم بتشريح العمود الفقري ذيليا واستئصال العمود الفقري باستخدام ملقط ثقيل حتى الوصول إلى مستوى أسفل الظهر (مستوى الأطراف الخلفية).
- قم بإجراء قطع ذيلية كاملة على مستوى العمود الفقري القطني (الفقرات القطنية 5) باستخدام ملقط ثقيل.
- قم بتدوير الماوس (وجهه لأعلى). ليست هناك حاجة لتغطية الشق لأن DRG يتم استخراجه من مستويات الفقر السفلية وليس من عنق الرحم.
- اقطع عند خط الوسط من الرقبة إلى البطن ، وسحب الجلد بشكل جانبي ثم اقطعه لفتح الصفاق.
- إزالة الأعضاء الداخلية داخل الصفاق (الكبد, الطحال, البنكرياس, المعدة, والأمعاء) في كتلة. بعد ذلك ، قم بإزالة الأعضاء خلف الصفاق (أي الكلى والبنكرياس). في الجمجمة ، افتح جدار الصدر.
- باستخدام ملقط وشفرة جراحية ، قم بقطع الأضلاع ، وترك 5 مم من الأضلاع بعيدا عن العمود الفقري. في هذه المرحلة ، يتم فصل العمود الفقري عن بقية الجسم.
- اغسل العمود الفقري من الدم بمحلول ملحي طازج مخزن بالفوسفات (PBS) مرتين (4 درجات مئوية).