نموذج الفئران أحادي الجانب لانسداد الحالب : إجراء جراحي لعرقلة تدفق البول من الكلى في نماذج الفئران

الملخص

المصدر: Yanai ، K. et al. التقييم الكمي في الوقت الفعلي لتعبيرات microRNA في الكلى الفأرية مع انسداد الحالب أحادي الجانب. J. Vis. Exp. (2020)

يوضح هذا الفيديو الإجراء لإنشاء نموذج فأر انسداد الحالب أحادي الجانب. يتضمن الإجراء قطع أحد حالب الفأر لعرقلة تدفق البول.

البروتوكول

تمت مراجعة جميع الإجراءات التي تنطوي على نماذج حيوانية من قبل لجنة رعاية المؤسسية المحلية ومجلس المراجعة البيطرية JoVE.

< p class = "jove_title" >1. جراحة UUO

1. قم بإعداد العناصر التالية: الأيزوفلوران ، ورقة الفلين ، كريم إزالة الشعر ، مناديل المختبر ، طبق بتري مع PBS ، 4-0 حرير ، 4-0 نايلون ، حقنة 2.5 مل ، مسحات قطنية ، ملاقط ، مقص جراحي ، وفئران ذكور C57BL / 6 عمرها 8 أسابيع.
2. تخدير الفأر بنسبة 1.5٪ من الأيزوفلوران والحفاظ على 1.5٪. ثم ضعي كريم إزالة الشعر على بطن الفأر. بعد بضع دقائق ، امسحي كريم إزالة الشعر بمنديل مختبر مبلل ب PBS.
3. حقن 70٪ إيثانول في بطن الفأر وضع الفأر في وضع ضعيف على ورقة الفلين.
4. باستخدام المقص الجراحي والملاقط ، قم بعمل شق في الجلد عند البطن وقطع العضلات والغشاء البريتوني من المثانة إلى الحافة السفلية اليسرى للأضلاع.
5. ضع المحقنة سعة 2.5 مل أسفل الماوس. خذ قطعتين من القطن ورطبهما باستخدام PBS. اسحب الأمعاء بعناية إلى الجانب باستخدام الملقط وضع المسحات المبللة بشكل مناسب لتحديد الحالب الأيسر. باستخدام الملقط ، ارفع الكلية اليسرى.
6. استخدم الحرير 4-0 لربط الحالب الأيسر في مكانين يفصل بينهما حوالي 1 سم. اقطع الحالب عند النقطة المركزية للربطين ثم استخدم 4-0 خيوط نايلون لإغلاق الغشاء البريتوني والشق.