$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
تمت مراجعة جميع الإجراءات التي تنطوي على نماذج حيوانية من قبل لجنة رعاية المؤسسية المحلية ومجلس المراجعة البيطرية JoVE.
< p class = "jove_title" >
1. التخدير
- استخدم نظام تخدير منضدي لتخدير بالأيزوفلوران. قم بتشغيل خزان O2 واضبط مقياس تدفق الأكسجين على 1 لتر / دقيقة.
- ضع أنثى C57BL / 6J فأرة بالغة في غرفة الحث. قم بتشغيل واضبط مبخر الأيزوفلوران على 3٪ للحث. يجب أن يكون الفأر في حالة تخدير في غضون دقيقتين ، قم بإعطاء مسكن البوبرينورفين (0.1 مجم / كغ) تحت الجلد عند إخراج الفأر من غرفة الحث للتسكين الوقائي.
ملاحظه: في هذا البروتوكول ، يتم استخدام إناث الفئران ، حيث يسهل التعامل معها أثناء قسطرة مجرى البول. يعمل البروتوكول أيضا مع ذكور الفئران ، ولكن هناك حاجة إلى مزيد من الحذر.
- ضع مرهم العين على عيون لمنع الجفاف. ضع الفأر المخدر متجها لأعلى على وسادة تدفئة مع وضع أنفه في مخروط الأنف. أدر مفتاح دائرة الهواء للسماح للأيزوفلوران بالمرور عبر مخروط الأنف.
- كبح جماح الرأس ومخروط الأنف بشريط لاصق. اضبط مبخر الأيزوفلوران على 2٪ للصيانة.
- كبح الأطراف بشريط لاصق. قم بإجراء اختبارات قرصة إصبع القدم للتأكد من أن في تخدير عميق ثم حلق منطقة البطن.
< p class = "jove_title" >
2. استنفاد البول وشطف المثانة
- ضع مادة التشحيم على القسطرة (24 جم ، طول 2.11 سم ، القطر الخارجي 0.045 سم) وتأكد من تغطية سطحها الخارجي بالكامل.
- أدخل القسطرة في فتحة مجرى البول وادفعها ببطء حتى تصل إلى المثانة ، وفي ذلك الوقت يجب أن يتدفق البول عبر القسطرة. اضغط برفق على البطن للمساعدة في استنفاد البول.
- تحقق مما إذا كانت القسطرة قد تم إدخالها بشكل صحيح في المثانة من خلال مراقبة تدفق البول التلقائي. تجنب ثقب مجرى البول وجدار المثانة واستخدم مادة التشحيم عدة مرات إذا لزم الأمر.
- تخلص من البول بماصة في دورق نفايات.
- الماصة 80 ميكرولتر من المحلول الملحي المخزن بالفوسفات (PBS) في الطرف الخارجي للقسطرة ، مع بقاء الطرف الآخر في المثانة. قم بتوصيل حقنة 1 مل بعناية بالقسطرة. ادفع المحقنة برفق لحقن PBS في المثانة. اترك بعض PBS في القسطرة لتجنب تكوين فقاعات هواء في المثانة.
- قم بإزالة المحقنة. انتظر حتى يتم تصريف PBS من المثانة. اضغط برفق على البطن لإخلاء PBS.
- تخلص من PBS في القسطرة باستخدام ماصة في دورق النفايات.
- كرر غسل PBS (الخطوات من 2.4 إلى 2.6) مرتين أخريين.
ملاحظه: من الضروري العمل برفق أثناء خطوات الغسيل هذه. عادة ما يشير الدم في القسطرة أو فشل التدفق التلقائي للسائل إلى ثقب مجرى البول