تلطيخ الحمض الدوري أو PAS: طريقة لتقييم التشوهات الهيكلية للكبيبات

الملخص

المصدر: Stevens، M.، Oltean، S. تقييم وظائف الكلى في نماذج الفئران لمرض الكبيبات.J. Vis. Exp. (2018)

في هذا الفيديو ، نصف بروتوكول إجراء صبغة Schiff الحمضية الدورية (PAS) لتقييم التشوهات الهيكلية في كبيبات الكلى. تتيح طريقة تلطيخ PAS التقييم المناسب للفيزيولوجيا المرضية للكبيبات.

البروتوكول

< p class = "jove_title" >1. صبغة الحمض الدورية (PAS)

ملاحظة: ستسلط صبغة PAS الضوء على الأغشية القاعدية للحلقات الشعرية الكبيبية والظهارة الأنبوبية. إنه يتيح التصور التفصيلي للخلايا الكبيبية ، والمصفوفة المتوسطة والتوسع المحتمل ، والتغيرات المحتملة ل GBM (أي السماكة والمخالفات).

1. قم بتقسيم قشرة الكلى المثبتة بالبارافين باستخدام ميكروتوم بسمك 5 ميكرومتر على شرائح مطلية ب poly-L-lysine. يجف عند 37 درجة مئوية لمدة 1 ساعة. تأكد من أن القسم لا يحتوي على أي طيات أو ثقوب ، والتي يمكن أن تشوه التشكل تحت المجهر.
2. قم بإزالة الشرائح عن طريق احتضانها مرتين في الزيلين (تحذير ، مهيج ؛ استخدم في خزانة ا....

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة الاسم الشركة رقم فهرسي التعليقات نظام تلطيخ الأحماض الدورية (PAS) سيجما ألدريتش 395 ب -1 كيلو طن الهيماتوكسيلين سيجما ألدريتش إتش 3136 الزيلين ميرك ميليبور 108298 شرائح بولي الإعدادية سيجما ألدريتش P0425-72EA تصاعد متوسط ثيرموفيشر العلمي 8030 قلم مسعور أبكام أب 2601 مضحك ضوء الفلورسنت لايكا مايكروسيستمز برنامج تحليل الصورة J الصورة J