تمت مراجعة جميع الإجراءات التي تنطوي على نماذج حيوانية من قبل لجنة رعاية المؤسسية المحلية ومجلس المراجعة البيطرية JoVE.
فئة
1.FMT
التصوير
ملاحظة: وفقا للهدف التجريبي ، يمكن مراقبة خلايا الورم الأرومي الدبقي الموسومة بعلامة iRFP في الجسم الحي قبل العلاج أو أثناءه أو بعده. لغرض التصوير ، قم بتخدير باستخدام غرفة تحريض الأيزوفلوران ، والاحتفاظ بها في كاسيت التصوير أثناء المسح ، والصورة في محطة الإرساء الخاصة بجهاز تصوير FMT.
- أخرج من القفص وضعه في غرفة تحريض الأيزوفلوران. أغلق الغرفة وقم بتشغيل تدفق الأكسجين والمبخر إلى 3-5٪.
- راقب حتى يتم تخديره تماما ، عادة في غضون 1-2 دقيقة. يجب ألا تستجيب الفاقدة للوعي للمنبهات الخارجية.
- أخرج المخدر من الغرفة وضع في كاسيت التصوير عن طريق وضع محول الرأس أولا ، متبوعا بوضع متجها لأسفل. تأكد من أن الرأس يقع في وسط الكاسيت.
- ضع اللوحة العلوية للكاسيت في الأعلى وشد مقابض الضبط حتى 17 مم.
- بمجرد أن يصبح آمنا في كاسيت التصوير ، انتقل إلى التصوير عن طريق إدخال الكاسيت في محطة الإرساء الداخلية لجهاز تصوير FMT ، حيث يتم ضخ الأيزوفلوران للحفاظ على تخدير.
- قم بتشغيل برنامج التصوير والمحلل بالنقر المزدوج فوق رمز البرنامج.
- في نافذة "علامة التبويب التجريبية"، حدد "قاعدة البيانات" و"مجموعة الدراسات".
- انتقل إلى نافذة "علامة التبويب مسح" وحدد الموضوع للصورة بالنقر فوق "تحديد الموضوع". حدد أيضا قناة الليزر في لوحة "قناة الليزر". بالنسبة للخلايا التي تحمل علامة FP635 ، حدد "قناة الليزر 635 نانومتر" ، وبالنسبة للخلايا المسماة FP720 ، حدد "قناة الليزر 680 نانومتر".
- احصل على صورة بالنقر فوق خيار "التقاط" في نافذة "علامة التبويب مسح". بعد ذلك ، اضبط حقل المسح عن طريق النقر فوق حقل المسح الضوئي في الصورة الملتقطة وسحبه إلى عدد محدد من مواقع المصدر ، عادة ضمن 20-25 مصدرا للجانب المماثل.
- حدد خيار "إضافة إلى قائمة انتظار إعادة البناء" واضغط على "مسح" في نافذة "مسح ضوئي".
- انتظر حتى يكتمل المسح ثم قم بإزالة علبة التصوير من قاعدة الجهاز المحمول.
- قم بإزالة اللوحة العلوية من الكاسيت وضع مرة أخرى في القفص.
- كرر الخطوات 1.1-1.12 لبقية.
< p class = "jove_title" >
2. تحليل الصور
- من برنامج التصوير والمحلل ، حدد نافذة "علامة التبويب التحليل".
- قم بتحميل مجموعة البيانات والموضوع المراد تحليله بالنقر فوق الزر "+" في لوحة "اختيار مجموعة البيانات" في نافذة "علامة تبويب التحليل".
- بمجرد تحميل الصورة في نافذة "علامة تبويب التحليل" ، قم بإجراء تحليل منطقة الاهتمام (ROI) عن طريق تحديد رمز الإهليلجي الموجود في الزاوية العلوية اليسرى من نافذة "علامة تبويب التحليل".
- اضبط الحد إلى الصفر في لوحة "البيانات الإحصائية" بالنقر بزر الماوس الأيمن فوق عمود "الحد" في نافذة "علامة تبويب التحليل".
تمثل - القيمة الإجمالية في لوحة "البيانات الإحصائية" الإشارة من خلايا الورم الأرومي الدبقي الموسومة بالفلورسنت المزروعة في دماغ الفأر.
- كرر الخطوات 2.2-2.4 لبقية. قم بتحميل موضوع جديد أو إزالته بالنقر فوق الزر "+" أو "-" ، على التوالي ، في لوحة "تحديد مجموعة البيانات" في نافذة "علامة التبويب التحليل".
