توليد نموذج الفئران لاحتشاء عضلة القلب: إجراء جراحي للربط الدائم للشريان التاجي الأمامي الأيسر الهابط في نموذج الفأر

الملخص

المصدر: Lugrin, J. et al. نموذج احتشاء عضلة القلب الفئران باستخدام الربط الدائم للشريان التاجي الأمامي الأيسر الهابط. J. Vis. Exp. (2019)

في هذا الفيديو ، نصف إجراء جراحيا لتوليد نموذج فأر لاحتشاء عضلة القلب عن طريق ربط الشريان التاجي الأمامي الأيسر الهابط بشكل دائم.

البروتوكول

تمت مراجعة جميع الإجراءات التي تنطوي على نماذج حيوانية من قبل لجنة رعاية المؤسسية المحلية ومجلس المراجعة البيطرية JoVE.

< ص الفئة = "jove_title" >1. التخدير وقنية القصبة الهوائية

1. قم بوزن الفأر لتحديد جرعة أدوية التخدير والأدوية المسكنة بعد الجراحة وحجم المد والجزر لجهاز التنفس الصناعي. قم بتسخين وسادة التسخين مسبقا عند 37 درجة مئوية. تم تصوير الإعداد الجراحي في الشكل 1.
2. حقن الفأر داخل الصفاق بمزيج من الكيتامين والزيلازين بجرعة 80 ملغم/كغ و10 ملغ/كغ على التوالي.
3. احلق فرو الفأر بسرعة على الحلق والجانب الأيسر من القفص الصدري باستخدام ماكينة حلاقة كهربائية.
4. تحقق من عمق التخدير عن طريق الضغط على الذيل و / أو القدمين الخلفيتين واستقرار في وضع ضعيف على وسادة التدفئة. ضع ضغطا صغيرا من الشاش تحت رأس لتجنب ارتفاع درجة حرارة العينين. ضع جل العين لتجنب جفاف العين.
5. قم بتأمين الأطراف الأربعة بشريط لاصق على سطح وسادة التدفئة. مرر حلقة من خياطة الحرير 5-0 أسفل القواطع العلوية وألصق طرف الحلقة بشريط لاصق على وسادة التسخين. هذا سيبقي فم مفتوحا ويسهل القنية.
6. ضعي كريم إزالة الشعر على المناطق المحلوقة مسبقا ودلكي بلطف بقطعة قطن لمدة 1 دقيقة. امسح فائض الفراء والقشدة بشاش. استخدم قطرات من محلول ملحي 0.9٪ وشاش لتنظيف مناطق الشق. ضع قطعا من الشاش المعقم على حلق الحلق والصدر وانقعها في اليودوبوفيدون.
   ملاحظه: نوصي باستخدام دواء مخدر موضعي (ليدوكائين أو بوبيفاكين) على مواقع الشقوق.
7. اضبط جهاز التنفس الصناعي على حجم مد وجزر يبلغ 7 مل / كجم ومعدل تهوية يبلغ 140 ضربة / دقيقة < br / > ملاحظه: من الآن فصاعدا ، اعمل تحت مجهر مجهري للجراحة المجهرية.
8. أمسك الجلد في منتصف الحلق وقم بإجراء شق 0.5 سم بعد خط ذيلي/رأسي باستخدام مقص صغير. افصل فصوص الغدة اللعابية ، ثم افصل بلطف لفافة العضلة القصية اللامية باستخدام ملقط تشريح منحني حتى تظهر الحنجرة والقصبة الهوائية. حواف آمنة للفتحة مع مباعدات متصلة بأشرطة مرنة.
   ملاحظه: قم بهذه الخطوة دون شق العضلات. سيتمكن المشغل المدرب من تنبيب عبر تجويف الفم دون تصور القصبة الهوائية مما يجعل هذه الخطوة اختيارية.
9. امسك اللسان برفق جانبيا. باستخدام الملقط ، أدخل الإبرة الداخلية الضعيفة لقنية 16 جم في القصبة الهوائية. تصور الإدخال الصحيح في القصبة الهوائية من خلال شق الحلق.
10. قم بتوصيل القنية بجهاز التنفس الصناعي وتأكد من التهوية الصحيحة عن طريق وضع أنبوب العادم في الماء. يشير وجود الفقاعات إلى التنبيب الصحيح.
    ملاحظه: من أجل الحفاظ على الأنسجة رطبة أثناء العملية ، ضع شاشا معقما مبللا بمحلول ملحي 0.9٪ ويودوبوفيدون على شق الحلق. التحكم في الرطوبة أثناء العملية.

< ص الفئة = "jove_title" >2. ربط الشريان التاجي LAD

1. حرر المخلب الأمامي الأيسر من الشريط اللاصق وحرك الماوس بعناية إلى وضع الاستلقاء الأيمن. قم بتأمين الطرف الأمامي الأيسر بمجرد أن يكون في الموضع الصحيح.
2. حدد الخط الفاصل بين العضلات الصدرية اليسرى الصغرى والعضلات الرئيسية وقم بعمل شق مائل في الجلد على 1 سم بمقص يتبع الخط. مع تشريح مقص صغير حاد ، لفافة منفصلة من عضلات الصدر دون شق. الحفاظ على عضلات الصدر مفصولة مع مباعدات متصلة بشرائط مرنة.
3. اضبط جهاز التنفس الصناعي بضغط نهاية الزفير الإيجابي (PEEP) يبلغ 3 سم H₂O.
4. افتح تجويف الصدر باستخدام ملقط حاد في المساحة الوربية الثالثة بين الأضلاع 3 و 4. تجنب لمس الشريان الصدري الداخلي حيث يوجد خطر النزيف. لا تلمس القلب أو الرئة. ضع ضامتين في القفص الصدري ، واحد على كل ضلع (الشكل 2 أ).
5. باستخدام ملقط ناعم منحني ، قم بإزالة التامور بعناية وفصله دون الإضرار بالقلب والرئتين.
6. حدد موقع الشريان التاجي الأمامي الأيسر الهابط (LAD). يظهر الشريان LAD كخط أحمر لامع سطحي يمتد من حافة الأذن اليسرى باتجاه القمة.
7. استخدم حامل إبرة لتمرير خياطة حريرية 7-0 تحت LAD من 2 إلى 3 مم أسفل الأذينين الأيسر. اسحب الحرير ببطء لتجنب تمزق أنسجة القلب. اربط الرباط بثلاث عقدة. سيتحول الجزء الأيسر السفلي من البطين الأيسر إلى اللون الباهت على الفور عند الربط (الشكل 2B-E).
   ملاحظه: من المهم عدم التعمق في تجويف البطين أو البقاء سطحيا للغاية. بالنسبة للحيوانات التي يتم تشغيلها بشكل زائف ، اسحب الحرير الخيط أسفل LAD وقم بإزالته ببطء مع تجنب تمزق الأنسجة.
8. حرر ضاوات الضلع ، وأمسك الضلع الثالث بالملقط وقم بتمريرتين بخياطة حريرية 6-0 تحت الأضلاع 3 و 4.
   أنذر: لا تثقب القلب أو الرئة. لا تشديد العقد بعد.
9. ضع ثلاث قطرات من محلول ملحي 37 درجة مئوية 0.9٪ على الفتحة وأغلق أنبوب عادم الزفير لمدة 2 أو 3 دورات تنفسية لتضخيم الرئتين بشكل صحيح. شد الخيط وتأمينها برميتين.
10. حرر الضاعرات التي تمسك العضلات وساعدها على استعادة مكانها الصحيح.
11. أغلق الجلد الصدري بغرزتين من الحرير خياطة 5-0 وقم بتثبيته برميتين. أغلق جلد الحلق بغرزة واحدة من خياطة الحرير وقم بتثبيته برميتين.

النتائج

p class = "jove_content" fo: keep-together.within-page = "1" >
الشكل 1: وصف الإعداد الجراحي. (أ) يتكون الإعداد الجراحي من وسادة تدفئة معدلة وجهاز تنفس صناعي ومباعدات متصلة بشرائط مرنة. (ب) مجموعة من المقصات والملقط وحامل الإبرة المستخدم أثناء الجراحة. (ج) لقطة مقربة للضادات الصغيرة. غير معروض: مجهر مجسمة جراحي.

< p class = "jove_content" fo: keep-together.within...

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة الاسم الشركة رقم فهرسي التعليقات 30 جرام إبرة BD ميكرولانس 3 304000 الضاورات الحادة أدوات العلوم الدقيقة 18200-09 مسحات القطن Applimed SA 6001109 مقص تشريح منحني أسكولاب BC603R ماكينة حلاقة كهربائية ريمنجتن HC720 كريم إزالة الشعر, فيت سيلك آند فريش تك. 8218535 مقص صغير ، منحني حاد / حاد أسكولاب إف إم 013 آر 1 حقنة CC ، Omnifix-F ب. براون 9161406 فولت خياطة الحرير 5-0 ، BB إيثيكون K880H خياطة الحرير 6-0 ، P-1 إيثيكون 639 ساعة خياطة الحرير 7-0 ، BV-1 إيثيكون ك 804 الطالب دومون # 7 ملقط أدوات العلوم الدقيقة 91197-00 ملقط الطالب الناعم ، بزاوية أدوات العلوم الدقيقة 91110-10 القفازات الجراحية ويتاكار 834301 وسادة التدفئة الجراحية إعداد شخصي تيمجيسيك سول 0.3 مجم / مل بوبرينورفين Indivior Schweiz AG N02AE01 إبرة داخلية لأنبوب القصبة الهوائية لقطة 16G i.v. أبوكاث تي G714-A01 مجهر S3 العالمي ، OMPIMD زيز جهاز التنفس الصناعي ، MiniVent موديل 845 جهاز هارفارد 73-0043 اللزوجة الكون 1551535 70٪ إيثانول بيتادين 60 مل موندي فارما