تمت مراجعة جميع الإجراءات التي تنطوي على نماذج حيوانية من قبل لجنة رعاية المؤسسية المحلية ومجلس المراجعة البيطرية JoVE
فئة
1. الزرع الجراحي لنظام مراقبة درجة الحرارة عن بعد
- عند الوصول من البائع ، اسمح للحيوانات بالراحة في الحوض لمدة أسبوع واحد على الأقل قبل الجراحة لتقليل ضغوط النقل.
- تضم الفئران (بحد أقصى 5 لكل قفص وفقا لإرشادات IACUC المحلية) حتى يوم الجراحة لزرع جهاز قياس درجة الحرارة عن بعد. قم بتخزينها في أقفاص قياسية مقاس 7.25 بوصة (عرض) × 11.75 بوصة (طول) × 5 بوصة (ارتفاع) تحتوي على فراش كوز الذرة. حافظ على دورة الضوء على دورة إضاءة 12 × 12 (تشغيل: 7 صباحا ؛ إيقاف: 7 مساء). حافظ على درجة حرارة السكن عند 20-22 درجة مئوية والرطوبة النسبية (RH) عند 30٪ -60٪. توفير النظام الغذائي القياسي للطعام والماء المخصص حتى بروتوكول البيئة والصحة والسلامة.
ملاحظه: الأساس المنطقي للسكن الفردي هو تجنب إصابات القتال المتكررة في ذكور الفئران C57bl / 6J وتوفير فرصة كبيرة لتشغيل العجلة العفوية لكل فأر.
- لوضع أجهزة القياس عن بعد ، قم بتخدير الفأر بالأيزوفلوران (4٪ ، 0.4-0.6 لتر / دقيقة من O2 الجريان) في غرفة الحث. ثم ضع الفأر تحت التخدير المستمر عبر مخروط الأنف (1.5٪ ، 0.6 لتر / دقيقة).
- استخدم مزلق العين ، مثل مرهم الطبيب البيطري ، لحماية عيون من التلف أو الإصابة أثناء الجراحة.
- لتحضير موقع الجراحة ، احلق أسفل البطن باستخدام مقصات شعر الصغيرة أو استخدم مزيل الشعر المتاح تجاريا. يجب تطبيق الجرعة الأولى من البوبرينورفين تحت الجلد (0.1 ملغ/كغ) خلال هذا الوقت.
- افرك المنطقة بثلاث غسلات من بوفيدون اليود (أو مقشر مبيد للجراثيم مماثل) متبوعا بشطف كحول الأيزوبروبيل بنسبة 70٪ (أو محلول ملحي معقم حسب المتطلبات البيطرية المحلية). ثم انقل الفأر إلى منطقة الجراحة.
- استخدم ستارة لاصقة لعزل موقع الجراحة على الماوس. باستخدام أدوات معقمة وتقنية معقمة ، قم بعمل شق ~ 1 سم على خط الوسط على طول الخط الساحلي ، على بعد حوالي 0.5 سم من الهامش الساحلي. بعد ذلك ، افصل الجلد عن طبقة العضلات وقم بعمل شق أصغر قليلا على linea alba ، مع الحرص على عدم إتلاف الأمعاء أو الأعضاء الداخلية.
- بمجرد فتح طبقة العضلات ، ضع مقياس التقريب المعقم (جهاز القياس الراديوي المصغر القابل لإعادة الاستخدام الخالي من البطارية ؛ 16.5 × 6.5 مم) في التجويف داخل الصفاق أمام الشرايين والأوردة الذيلية والظهرية للأعضاء الهضمية للسماح لها بالطفو ><بحرية.
ملاحظه: يتم تنظيف جميع أجهزة قياس الحرارة بالماء والصابون ، وشطفها جيدا وتعقيمها بالغازات بأكسيد الإيثيلين بين الاستخدامات. إذا لم يكن التعقيم بالغاز متاحا ، يتم قبول الغمر في محاليل التعقيم (وفقا لتوصية الشركة المصنعة للتخفيف ووقت الغمر) لتطهير وتعقيم أجهزة قياس البعد.
- أغلق فتحة البطن بخيطة معقمة قابلة للامتصاص 5-0 وأغلق الجلد باستخدام غرزة متقطعة بسيطة مع خياطة 5-0 برولين.
ملاحظه: ثبت أن السماح لمقياس المقربة بالطفو في حجرة البطن دون ربطه بجدار البطن (وهي طريقة موصى بها من قبل الشركة المصنعة) ناجح ويفضله المؤلفون للتخلص من التوتر الزائد في جدار البطن أثناء الشفاء. علاوة على ذلك ، ليس لهذا أي تأثير على قدرة المستقبل على الحصول على الإشارة من الباعث.
- ضع الماوس في قفصه النظيف مع وسادة تدفئة محمولة أسفل القفص. راقب الفأر كل 15 دقيقة خلال الساعة الأولى من التعافي من التخدير ، ثم عد إلى مرفق إسكان.