نطاقات قوس الأبهر المستعرضة في نموذج الفأر: تقنية طفيفة التوغل في الفئران لتحريض الضغط العالي في البطين الأيسر

الملخص

المصدر: Zaw ، A. M. et al. انقباض الأبهر المستعرض طفيف التوغل في الفئران. J. Vis. Exp. (2017)

في هذا الفيديو ، نوضح بروتوكولا تجريبيا لتضيق الأبهر المستعرض طفيف التوغل في الفئران لفحص قصور القلب الناجم عن الحمل الزائد للضغط.

البروتوكول

تمت مراجعة جميع الإجراءات التي تنطوي على نماذج حيوانية من قبل لجنة رعاية المؤسسية المحلية ومجلس المراجعة البيطرية JoVE.

< p class = "jove_title" >1. إعداد موقع العملية

1. تطهير موقع العملية بكحول الأيزوبروبيل بنسبة 75٪. اضبط درجة حرارة وسادة التسخين على 37 درجة مئوية لتجنب التغيرات في معدلات القلب والتنفس للحيوان المعني.
2. استخدم الأدوات الجراحية المعقمة في معقم الإزاحة بالجاذبية عند 121 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة أو بطرق أخرى مناسبة.
3. خذ 2-4 إبر قياس 30 وقم بثنيها بحامل إبرة ، كما هو موضح في الشكل 1 ، لعمل أداة للربط وفصل الأنسجة ولاستخدامها كضام. قم بتركيب الإبرة المنحنية الآن على قضيب قطني لاستخدامها في الجراحة.
4. قم بتعدين إبرة قياس 27 وثنيها بزاوية 90 درجة باستخدام حامل الإبرة. قم بتنعيم الطرف عن طريق فرك سطح صلب لعمل فاصل 0.4 مم في خطوة الربط.

< p class = "jove_title" >2. تحضير

1. تخدير فأر يبلغ من العمر شهرين ، ذكر ، 22-25 جم C57BL / 6N بمزيج مناسب من الكيتامين والزيلازين بالنسبة لوزن الجسم: 100 مجم / كجم + 10 مجم / كجم IP. تأكد من التخدير باستخدام منعكس قرص الذيل السلبي.
2. قم بإزالة الشعر من الرقبة الأمامية والصدر مع وضع كريم إزالة الشعر لمدة 2 إلى 3 دقائق. قم بإزالة الكريم بالماء الدافئ وقضيب قطني.
3. ضع مرهم أو جل للعيون على عيون لمنع جفاف القرنية.
4. ضع على وسادة تدفئة في وضع الاستلقاء وقم بإجراء المراقبة أثناء الجراحة ، مع التأكد من الاحتفاظ بالوثائق المناسبة كل 15 دقيقة.
5. استخدم شريطا ورقيا جراحيا لتثبيت الأطراف في وسادة التدفئة من أجل إبقاء في الموضع الصحيح أثناء الجراحة.
6. تطهير الجلد بالتناوب بالكحول ومحلول بوفيدون اليود ثلاث مرات.
7. استخدم ستارة معقمة مع مجال تشغيل مكشوف لمنع التلوث. استخدم قفازات معقمة جديدة لكل فأر وحسب الضرورة.

< ص الفئة = "jove_title" >3. إجراء الربط

1. افتح جلد الفأر في وضع خط الوسط للرقبة والصدر بمشرط.
2. اسحب الغدة الدرقية نحو الرأس عن طريق فصل الأنسجة الضامة برفق باستخدام مقص حاد.
3. افصل طبقة العضلات على القصبة الهوائية عند خط الوسط باتجاه كلا الجانبين باستخدام الإبر المنحنية.
4. باستخدام المقص الحاد ، قم بقص القص إلى الضلع الثاني (حوالي 5 مم). افتح القطع باستخدام ضام أو ملقط منحني.
5. افصل فصوص الغدة الصعترية عن بعضها البعض وجدار الصدر السفلي عن طريق فصل النسيج الضام بالإبرة المنحنية ؛ سيكون قوس الأبهر المستعرض والشريانين السباتيين مرئيين بوضوح في هذه المرحلة.
6. ضع الإبرة المنحنية تحت القوس وثقب بين جدار الوعاء والنسيج الضام على الجانب الآخر عن طريق دفع الرأس المنحني للخارج.
7. باستخدام الإبرة المنحنية ، اسحب خياطة الشعيرات الأحادية 6-0 أسفل القوس الأبهري.
8. ضع الفاصل في الحلقة وقم بتثبيت الخيط في مكانه بعقدة مزدوجة. قم بإزالة الفاصل برفق.
9. تأكد من الانقباض الناجح مع وضع العقدة وقطع نهايات الخياطة.
10. أغلق جدار الصدر باستخدام خياطة حريرية 6/0 بنمط خياطة متقطعة بسيط. أغلق الجلد بخياطة أحادية الشعيرات 6/0 بنمط خياطة مستمرة.

< p class = "jove_title" >4. رعاية ما بعد الجراحة

1. ضع محلول بوفيدون اليود على موقع الخياطة وضع في قفص مسخن مسبقا للتعافي ومراقبة ما بعد الجراحة.
2. حقن البوبرينورفين (0.05-0.1 مجم / كجم من الشرب البيئي كل 12 ساعة) بعد أن يستعيد وعيه لتخفيف الألم وتزويد الفأر بالطعام الطري المناسب.
3. أعد إلى غرفة دورة فاتحة / مظلمة لمدة 12 ساعة بعد الشفاء التام.

النتائج

p class = "jove_content" fo: keep-together.within-page = "1" >
الشكل 1: عملية تشكيل خطافات الإبرة المرغوبة عن طريق ثني طرف إبرة قياس 1 بوصة و 30. (أ) طرف الإبرة الأصلي 1 بوصة ، 30 مقياس. (ب) أمسك طرف الإبرة بحامل الإبرة وثني في منتصف الطريق تقريبا على طوله. ثني الإبرة في حلقة ، باستخدام حامل الإبرة واليدين ، حسب الضرورة ، لتشكيل الحلقة المصورة في الجزء العلوي الأيمن من الشكل. (ج) قم...

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة الاسم الشركة رقم فهرسي التعليقات 1 بوصة 30 قياس الإبر BD ، فرانكلين ليكس ، نيوجيرسي 07417 ، الولايات المتحدة الأمريكية 305128 منحني كما في الإجراء والشكل 1 إبرة قياس 27 BD ، فرانكلين ليكس ، نيوجيرسي 07417 ، الولايات المتحدة الأمريكية 301629 اجعلها حادة وسلسة للفاصل 6/0 دافيلون B. Braun ، 34212 Melsungen ، Hessen ، ألمانيا C0933066 6/0 سيلكام B. Braun ، 34212 Melsungen ، Hessen ، ألمانيا C0762067 قفازات معقمة A.R. Medicom، Inc (آسيا) ، هونغ كونغ قضيب قطن مانينغز ، خليج المحجر ، هونغ كونغ مركز تسوق محلي كريم مزيل الشعر فيت (هونغ كونغ) ، كوون تونغ ، كولون ، هونغ كونغ مركز تسوق محلي مقص الأطفال Lexer-Baby FST ، كولومبيا البريطانية V7H 0A6 ، كندا 14078-10 ملقط القزحية المنحني FST ، كولومبيا البريطانية V7H 0A6 ، كندا 11065-07 حامل إبرة مايكرو أولسن هيغار WPI ، ساراسوتا ، فلوريدا 34240 ، الولايات المتحدة الأمريكية 501989 مجهر ستيريو WPI ، ساراسوتا ، فلوريدا 34240 ، الولايات المتحدة الأمريكية PZMIII-BS GenTeal جل العين نوفارتيس ، شرق هانوفر ، نيوجيرسي 07936 ، الولايات المتحدة الأمريكية صيدلية محلية وسادة التدفئة شركة كينت العلمية ، تورينجتون ، CT 06790 ، الولايات المتحدة الأمريكية DCT-20 شريط جراحي وحدة المختبر الكيتامين والزيلازين وحدة المختبر البيتادين وحدة المختبر بوبرينورفين وحدة المختبر