فك الشريط الأبهري الجراحي: إجراء لدراسة إعادة تشكيل البطين الأيسر العكسي في نموذج الفئران لانقباض الأبهر

الملخص

المصدر: Goncalves-Rodrigues، P. et al. دراسة إعادة تشكيل البطين الأيسر العكسي عن طريق تفكيك الأبهر في القوارض. J. Vis. Exp. (2021)

يوضح هذا الفيديو تقنية فك الشريط الأبهري ، والتي يمكن أن تؤدي إلى إعادة تشكيل عكسي للحد من التقدم نحو قصور القلب في نموذج الفئران. بعد التفكيك ، يؤدي انخفاض كبير في الحمل البطيني إلى تراجع تضخم البطين والتليف ، مما يؤدي إلى انتعاش وظائف القلب.

البروتوكول

تمت مراجعة جميع الإجراءات التي تنطوي على نماذج حيوانية من قبل لجنة رعاية المؤسسية المحلية ومجلس المراجعة البيطرية JoVE.

< p class = "jove_title" >1. تحضير الفئران والتنبيب

1. تخدير الفئران الصغيرة C57B1 / J6 (20-25 جم) عن طريق استنشاق 8٪ سيفوفلوران مع 0.5-1.0 لتر / دقيقة 100٪ O₂ في أنبوب مخروطي.
2. تحقق من عمق التخدير باستخدام منعكس انسحاب قرصة إصبع القدم.
3. ضع الفأر عند الاستلقاء الظهري على صفيحة مائلة وانتقل إلى التنبيب الأوروتراكيل.
4. انقل الماوس إلى وسادة التسخين وقم بتوصيل أنبوب orotracheal بسرعة بجهاز التنفس الصناعي لبدء التهوية الميكانيكية.
5. اضبط معلمات جهاز التنفس الصناعي على تردد 160 نفسا / دقيقة وحجم مد وجزر يبلغ 10 مل / كجم.

2. التحضير للجراحة (لكل من جراحات الربط والتفكك)

1. احلق وضعي كريم إزالة الشعر من خط العنق إلى منتصف الصدر للفئران.
2. ضع جل العين على عيون لمنع جفاف القرنية.
3. ضع مسبارا في المستقيم ومقياس التأكسج عند المخلب أو الذيل لمراقبة درجة الحرارة وأكسجة الدم ومعدل ضربات القلب ، على التوالي.
   ملاحظة: يؤدي التخدير إلى انخفاض كبير في حرارة الجسم ، لذلك من المهم الحفاظ على درجة حرارة الجسم الطبيعية أثناء الجراحة لتجنب الانخفاض السريع في معدل ضربات القلب.
4. الحفاظ على التخدير مع سيفوفلوران (2.0-3.0٪). تحقق من المستوى الصحيح للتخدير من خلال عدم وجود منعكس قرصة إصبع القدم.
5. ضع الفئران في الاستلقاء الجانبي الأيمن على وسادة تسخين وقم بتأمين الأطراف بنظام سحب المثبت المغناطيسي بشريط لاصق لإبقاء في الموضع الصحيح أثناء الجراحة (الشكل 1 ، الشكل 2 أ).
6. تطهير صدر الفأر بالكحول بنسبة 70٪ متبوعا بمحلول بوفيدون اليود.

< p class = "jove_title" >3. جراحة ربط الأبهر التصاعدي

1. باستخدام شفرة يمكن التخلص منها ، قم بإجراء شق صغير (~ 0.5 سم) في الجلد على الجانب الأيسر مباشرة أسفل مستوى الإبط وتشريح الجلد.
2. قم بتشريح وفصل العضلة الصدرية وطبقات العضلات الأخرى برفق حتى تصبح الأضلاع مرئية. استخدم ملقطا دقيقا وتجنب قطع العضلات.
3. تحت المجهر ، حدد المساحات الوربية وافتح شقا صغيرا بين المساحة الوربية 2 و 3 بملقط دقيق.
4. اسحب الأضلاع عن طريق وضع ضام الصدر (الشكل 1 أ).
5. استخدم ملقطا صغيرا لتشريح فصوص الغدة الصعترية وفصلها برفق حتى يصبح الشريان الأورطي الصاعد مرئيا.
   ملاحظه: يجب أن تكون أدوات تطبيق القطن في متناول اليد في حالة النزيف. يجب إعطاء محلول ملحي معقم دافئ تحت الجلد في حالة حدوث نزيف كبير (مثل الشريان الثديي).
6. استخدم ملقطا صغيرا لتشريح الشريان الأورطي برفق.
   ملاحظة: يعتبر الشريان الأورطي تشريحا في حالة عدم وجود دهون أو التصاقات أخرى حوله ومن الممكن بسهولة تطويق الوعاء باستخدام ملقط منحنى صغير.
7. بعد تسلخ الأبهر ، ضع رباط بولي بروبيلين 7-0 حول الشريان الأورطي باستخدام مساعد الربط والملقط المنحني (الشكل 1 ب).
8. ضع الإبرة 26 جم المعرضة للشريان الأورطي (الطرف موجه نحو رأس الفئران) (الشكل 1 ب). بالنسبة للفئران التي تزن 20-25 جم ، تؤدي هذه الإبرة إلى انقباض الأبهر بنسبة 65-70٪ قابلة للتكرار.
9. اصنع عقدتين فضفاضتين حول الشريان الأورطي وإبرة 26 جم بمساعدة ملقطين (الشكل 1 ب).
10. تشديد عقدة 1 ، وبعد ذلك بفترة وجيزة ، العقدة 2. تأكد لفترة وجيزة من الوضع الصحيح للانقباض وإزالة الإبرة بسرعة لاستعادة تدفق الدم الأبهري. أخيرا ، قم بعمل عقدة 3 (مجموعة BA).
11. أعد وضع الغدة الصعترية والعضلات في موضعها الأولي.
12. قم بإجراء الإجراء الوهمي المطابق لإجراء الانقباض مع إبقاء الخيط فضفاضا حول الشريان الأورطي (مجموعة SHAM).
13. قطع نهايات الخيط وإزالة ضام الصدر.
    ملاحظة: قد تزيد نهايات الخياطة القصيرة من احتمالية ارتخاء العقد بالضغط الأبهري ، في حين أن النهايات الطويلة تجعل إجراء فك الشريط أكثر خطورة حيث يمكن أن تحدث الالتصاقات بين الخيط والأذين الأيسر.
14. أغلق جدار الصدر باستخدام خياطة 6-0 من مادة البولي بروبلين بخياطة بسيطة متقطعة أو مستمرة باستخدام أقل عدد ممكن من الغرز. شد عقدة الصدر الأخيرة مع تضخيم الرئتين في نهاية الإلهام عن طريق الضغط على تدفق جهاز التنفس الصناعي لمدة 2 ثانية لإعادة تضخيم الرئتين.
15. أغلق الجلد بخياطة 6-0 من الحرير / البولي بروبيلين بنمط خياطة مستمر. < / > ملاحظة: إذا تم استخدام جهاز تنفس صناعي أحدث ، فمن الممكن برمجته للتوقف مؤقتا في الإلهام (الإعداد المتقدم - الإيقاف المؤقت - الإلهام)

< p class = "jove_title" >4. رعاية ما بعد الجراحة

1. ضع محلول بوفيدون اليود على موقع خياطة الجلد.
2. للتسكين السليم، يتم تطبيق البوبرينورفين تحت الجلد 0.1 ملغم/كغ، مرتين يوميا، حتى يتعافى تماما (عادة بعد 2-3 أيام من الجراحة).
3. حقن محلول ملحي معقم داخل الصفاق لمنع الجفاف في حالة حدوث نزيف كبير أثناء الجراحة.
4. قم بإيقاف تشغيل التخدير (دون إزالة التنبيب من الماوس) وانتظر حتى يستعيد ردود الفعل (حركات الشعيرات هي إشارة إيقاظ) ويبدأ في التنفس تلقائيا.
5. قم بإزالة قنية القصبة الهوائية.
6. دع يتعافى في حاضنة عند 37 درجة مئوية.
7. أعد إلى غرفة دورة فاتحة / مظلمة لمدة 12 ساعة بعد الشفاء التام.

< p class = "jove_title" >5. جراحة فك ضخ الأبهر

1. بعد سبعة أسابيع ، قم بإجراء تفكيك الشريان الأورطي في نصف مكتبة الإسكندرية.
2. كرر جميع الخطوات من 1.1 إلى 2.6 المذكورة أعلاه.
قم
3. بتشريح الأنسجة والتصاقات والتليف حول الشريان الأورطي برفق حتى يصبح انقباضه مرئيا.
4. قم بتشريح الشريان الأورطي بعناية وافصل الخيط عن الشريان الأورطي. قص الخيط بمقص زنبركي بزاوية واحدة (الشكل 2 ب).
5. أغلق جدار الصدر باستخدام خياطة 6-0 من مادة البولي بروبلين بخياطة بسيطة متقطعة أو مستمرة باستخدام أقل عدد ممكن من الغرز.
   ملاحظة: حاول شد خياطة الصدر الأخيرة عند نفخ الرئتين لتجنب استرواح الصدر.
6. أغلق الجلد بخياطة حريرية / بولي بروبلين 6-0 بنمط خياطة مستمر.
7. قم بإجراء جميع إجراءات الرعاية بعد الجراحة كما هو مذكور في الخطوة 4.

النتائج

الشكل 1: إجراء ربط الأبهر.(أ) النهج الصدري للشريان الأورطي الصاعد الذي يتم إجراؤه بمساعدة نظام سحب المثبت المغناطيسي (3 مباعدات مرئية). (ب) الشريان الأورطي الصاعد تشريح ومرئي بوضوح. يتم وضع الإبرة الخافتة وخياطة البولي بروبلين 6-0 في الموضع الصحيح لأداء النطاقات الأبهري.

المواد