مقالة منهجية

عزل العقدة الجيبية الأذينية عن نموذج الفأر: إجراء لحصاد عقدة SA من قلب الفئران

يوليو 8, 2025

في هذه المقالة

الملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

المصدر: Kumar ، P et al. ، تسجيل مصفوفة الأقطاب الكهربائية الدقيقة لمعدل إطلاق العقدة الجيبية الأذينية لتحديد عيوب تنظيم ضربات القلب الجوهرية في الفئران.

يوضح هذا الفيديو إجراء عزل العقدة الجيبية الأذينية أو SAN من قلب الفأر. يضم SAN الخلايا الجيبية الأذينية التي تبدأ ضربات القلب عن طريق توليد إمكانات عمل تلقائية.

البروتوكول

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تمت مراجعة جميع الإجراءات التي تنطوي على نماذج حيوانية من قبل لجنة رعاية المؤسسية المحلية ومجلس المراجعة البيطرية JoVE.

< p class = "jove_title" >1. تشريح العقدة الجيبية الأذينية (SAN)

  1. قم بإعداد حل التيرود الكامل الهبارين لتشريح SAN.
    1. أضف 400 ميكرولتر من الهيبارين (1,000 USP/مل) إلى 40 مل من محلول Complete Tyrode وقم بتسخينه في حمام مائي 37 درجة مئوية.
  2. حقن الفأر داخل الصفاق ب 200-300 ميكرولتر من الهيبارين (1000 USP / مل) واترك يجلس لمدة 10 دقائق.
  3. القتل الرحيم للفأر الهيباريني عن طريق جرعة زائدة من الأيزوفلوران.
    1. ضع الماوس في حجرة زجاجية صغيرة تحتوي على أبخرة الأيزوفلوران الناتجة عن إضافة 200-300 ميكرولتر من الأيزوفلوران السائل إلى ورق ترشيح داخل أنبوب بلاستيكي مثقوب.
      ملاحظة: نظرا لأن الأيزوفلوران يمكن أن يسبب تهيج الجلد ويمكن أيضا امتصاصه من خلال الجلد ، يجب ألا يتصل السائل بالماوس مباشرة. لذلك ، يتم وضع المناديل المبللة بالأيزوفلوران في أنبوب مثقوب للتقديم.
    2. تحقق من الموت عن طريق التوقف عن الحركة وجهد التنفس وعدم وجود منعكس قرصة إصبع القدم. عادة ما يستغرق الموت حوالي 1-2 دقيقة بعد وضعه في الغرفة.
      ملاحظه: عادة ما يكون الموت مصحوبا بالتبول.
  4. ضع الماوس في وضع ضعيف على لوح تشريح مع تمديد الكفوف وقم بتثبيت الكفوف على السبورة باستخدام إبر حقنة بطول 1 بوصة وقياس 23. ثم قم بإزالة الفراء بالقرب من قاع القفص الصدري باستخدام مقص جراحي وقطع الفراء من الجذور.
    ملاحظه: بالنسبة للوحة التشريح ، يمكن استخدام أغطية تبريد البوليسترين.
  5. أثناء إمساك الجلد بالمرقئ ، استخدم مقصا جراحيا لعمل شق عرضي في الجلد أسفل الجزء السفلي من القفص الصدري مباشرة من حوالي القوس الساحلي الأيسر إلى القوس الساحلي الأيمن (الشكل 1 أ).
  6. اقطع الصفاق بمقص جراحي وافصل الكبد بعناية عن الحجاب الحاجز ، مع الحرص على عدم تقطيع الكبد ، مما يؤدي إلى نزيف مفرط (الشكل 1 ب). شق الحجاب الحاجز على طول الصدر لفضح التجويف الصدري (الشكل 1C-D).
  7. باستخدام المقص الجراحي ، قم بقص الجدران الجانبية للقفص الصدري من حواف الأقواس الساحلية حتى الترقوة لفضح القلب ، مع الحرص على تجنب إتلاف القلب (الشكل 1 د). ثم استخدم إبرة حقنة قياس 23 لتثبيت القفص الصدري على الكتف ، وتثبيته في مكانه وبعيدا عن المجال الجراحي.
  8. استخدم ماصة نقل لتقطير محلول Complete Tyrode الدافئ (37 درجة مئوية) على القلب للحفاظ على رطوبته.
    ملاحظه: لا تدع القلب يجف.
  9. قم بإزالة الرئتين عن طريق إمساكهما بملقط Graefe ناعم للغاية وقطع القصبة الهوائية بمقص جراحي (الشكل 1E).
  10. أمسك قمة القلب بملقط Graefe ناعم للغاية وقم بإزالته عن طريق قطع الشريان الأورطي والأجوف الوريدي بمقص جراحي. انقل القلب إلى طبق بتري يحتوي على مطاط صناعي من السيليكون المعالج (الشكل 2 أ) واستخدم ماصة نقل لاستحمام القلب ب 2-3 مل من محلول التيرود الكامل الدافئ (37 درجة مئوية) الدافئ ><(37 درجة مئوية). ملاحظه: احرص على عدم إتلاف الجدار الخلفي الرقيق للأذينين الأيمن، الذي يحتوي على شبكة الأذين، والأوردة الأذينية اليمنى المتصلة. إن استحمام القلب بمحلول Complete Tyrode يمنع القلب من الجفاف ولكن لا تغمر القلب بالكامل في المحلول لأنه سيضعف الرؤية أثناء التشريح.
  11. قم بتوجيه القلب بالأذين الأيمن على يمين المجرب والأذين الأيسر على يسار المجري.
    ملاحظه: يجب أن يتم تشريح أنسجة SAN بسرعة من أجل منع الإصابة المرتبطة بنقص التروية.
  12. نعلق قمة القلب على الطبق مع دبوس تشريح. بعد ذلك ، أثناء الإمساك بالوريد الأجوف السفلي باستخدام ملقط استئصال الصفيحة الصفيحية Dumont # 2 ، أدخل إبرة حقنة 22 G من خلال الوريد الأجوف السفلي والعلوي لتحديد موقعها في الأذين الأيمن ، والذي يحدد أيضا الموضع التقريبي ل SAN (الموجود في رقعة الأنسجة بين الوريد الأجوف السفلي والعلوي (الشكل 2 ب).
  13. باستخدام دبابيس تشريح صغيرة ، قم بتثبيت الزوائد الأذينية اليمنى واليسرى على الطبق.
    1. أثناء الإمساك بالزائدة الأذينية اليسرى باستخدام ملقط استئصال الصفيحة الفقرية Dumont # 2 ، ضع دبوس تشريح من خلال الزائدة الأذينية اليسرى لتثبيته في مكانه.
    2. أثناء حمل الزائدة الأذينية اليمنى باستخدام ملقط Dumont # 55 ، ضع دبوس تشريح من خلال الزائدة الأذينية اليمنى لتثبيته في مكانه.
      ملاحظه: يمكن استخدام نفس النوع من الملقط لتثبيت الزوائد الأذينية اليمنى واليسرى إذا رغبت في ذلك.
  14. قم بإزالة إبرة المحقنة التي تمتد على الوريد الأجوف.
  15. لإخراج الدم من القلب ، استخدم مقص Castroviejo لإزالة قمة القلب (أي النصف السفلي) عن طريق عمل شق عرضي عبر البطينين (الشكل 2 ج). بعد ذلك، اغسل القلب بإضافة محلول كامل تيرود الدافئ (37 درجة مئوية) بالهيبارين باستخدام ماصة نقل.
  16. استخدم مقص Castroviejo للقطع على طول الحاجز الأذيني البطيني مع الحفاظ على الشق أقرب إلى البطين من الأذينين. استمر في القطع على طول الحاجز الأذيني البطيني حتى يتم فصل الأذينين عن البطينين.
  17. قطع على طول الحاجز الأذيني لإزالة الأذين الأيسر.
  18. ضع دبابيس التشريح في محيط الأذين الأيمن لجعله مسطحا (الشكل 2 د). قم بإزالة أي دهون أو أوعية أو أنسجة متبقية من الأذين باستخدام مقص Castroviejo.
  19. حدد موقع SAN في الأذين الأيمن ، والذي يحده في هذا الاتجاه تقريبا الوريد الأجوف العلوي (في الأعلى) ، والوريد الأجوف السفلي (في الأسفل) ، و cristae terminalis (على اليسار) (الشكل 2D).
    ملاحظة: تظهر المحطة الطرفية على شكل حافة عضلية داكنة بين الزائدة الأذينية اليمنى و SAN. غالبا ما يمكن أيضا رؤية شريان SAN يمر عبر SAN (الشكل 2D).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

figure-results-1
الشكل 1: إزالة القلب.(أ) شق عرضي في الجلد أسفل الجزء السفلي من القفص الصدري مباشرة من حوالي القوس الساحلي الأيسر إلى القوس الساحلي الأيمن. (ب) شق الصفاق. (C ، D) شق الحجاب الحاجز على طول الصدر لفضح التجويف الصدري. (ه) إزالة القلب بعد استئصال الرئتين.

< p class = "jove_content" fo: keep-together.within-page = "1" >

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
لم يتم الإعلان عن أي تضارب في المصالح.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة الاسم الشركة رقم فهرسي التعليقات 22 إبرة حقنة قياس فيشر ساينتيك 14-826-5 أ تستخدم للتشريح 23 إبرة حقنة قياس فيشر ساينتيك 14-826-6 ج تستخدم للتشريح أطباق بتري 60 مم جينيسي العلمية 32-105 جرام مقص Castroviejo ، 4 " أدوات العلوم الدقيقة 15024-10 مجهر تشريح جينكو تشريح دبابيس أدوات العلوم الدقيقة 26002-20 دومون # 2 ملقط استئصال الصفيحة الفقرية أدوات العلوم الدقيقة 11223-20 دومون # 55 ملقط أدوات العلوم الدقيقة 11295-51 ملقط Graefe ناعم للغاية أدوات العلوم الدقيقة 11152-10 Hemostat أدوات العلوم الدقيقة 13013-14 الهيبارين Aurobindo Pharma Limited IDA ، باشاميلارام NDC 63739-953-25 مجموعة سيلجروارد المطاط الصناعي داو كورنينج 184 سيل طقم ELAST 0.5 كجم مقص جراحي أدوات العلوم الدقيقة 14074-09 نقل ماصات (3 مل تخرج) سامكو العلمية 225 إيزوفلوران باترسون البيطري 07-893-1389

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

مقالات ذات صلة